湖南省12个赤拟谷盗品系对磷化氢和敌敌畏抗性测定

王亚洲 刘蔓文 唐培安 陆月明 赵叶飞 冯俊

[摘要]本文针对储粮害虫磷化氢抗性严重，影响储粮安全的现实问题，测定了湖南省12个赤拟谷盗品系的磷化氢和敌敌畏抗性水平，并对抗性分布和发展趋势进行分析。结果表明，12个品系的磷化氢抗性系数范围为1.7～44.4，其中8个是敏感品系，其余4个为抗性品系。对不同场所的抗性情况分析发现，酒厂、加工厂、饲料厂和农户均有抗性品系和敏感品系，而来自粮库的1个品系为敏感品系，表明赤拟谷盗对磷化氢的抗性水平与场所没有显著相关性。对赤拟谷盗敌敌畏抗性水平测定结果表明，12个品系的致死中浓度（LC₅₀）值为0.051～0.108g/L，相对敏感性水平在2.1倍以内，表明这些赤拟谷盗品系对敌敌畏的敏感性差异不大，推测其对敌敌畏的抗性水平较低。

[关键词]赤拟谷盗;磷化氢;敌敌畏;抗性测定

赤拟谷盗（Triholium castaneum）属鞘翅目（Coleplera）、拟步甲科（Tenehrionidae）、拟谷盗属（Triholium），是一种危害性严重的储粮害虫，分布于世界各地[1]，其食性杂，可危害谷物、油料、动物性产品及加工品、中药材等，其中面粉被害最重。除取食外，成虫会分泌臭液，大量分泌时会产生污染，造成巨大的经济损失[2]。磷化氢（PH₃）是一种广泛应用于储粮害虫防治的熏蒸药剂，具有穿透性强、扩散性好、杀虫效果显著、成本低等特点[3]。然而由于长期、单一使用磷化氢以及操作不规范等原因，储粮害虫对磷化氢产生了不同程度的抗性，磷化氢的杀虫效果也因此大幅度降低[4]。敌敌畏是一种有机磷杀虫剂，具有触杀、熏蒸等作用，常被用作防治储粮害虫的空仓杀虫剂。本文测定了采白湖南省的12个赤拟谷盗的品系对磷化氢和敌敌畏抗性水平，并分析了抗性水平与采集场所的关系，不仅为储粮害虫磷化氢抗性治理提供基础数据，还为科学合理防治储粮害虫提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试昆虫

供试昆虫采白湖南省不同地区和场所，具体情况见表1。

1.1.2 仪器与试剂

恒温恒湿培养箱（BSC-250）：上海博讯实业有限公司医疗设备厂;气密性注射器：Hamilton公司;电热恒温鼓风干燥（DUG-9246A）：上海精宏实验设备有限公司;电子分析天平：赛多利斯科学仪器有限公司;PH3气体检测仪：北京佳粮科贸有限公司;粉碎机：天津市泰斯特仪器有限公司;PH3发生和收集装置：自制;浓硫酸、磷化锌粉末、敌敌畏：南京市若研实验器材有限公司。

1.2 方法

1.2.1 饲料准备

使用全麦粉作为饲料。将小麦洗净后置于80℃干燥箱中消毒、烘干，干燥过程中每隔0.5h对小麦进行翻动以保证小麦水分均匀。烘干后参照GB 5497-1985《粮食、油料检验水分测定法》调节小麦的水分至15%±1%，用粉碎机将小麦粉碎成全麦粉，密封后放入冰箱中冷藏保存。

1.2.2 试虫培养

从每个选定的晶系中，分别挑选数百只赤拟谷盗成虫，将其置于装有200g全麦粉的500mL广口瓶中，将广口瓶置于南京财经大学储藏物昆虫研究室内饲养，设定培养条件为温度30℃±1℃，相对湿度75%，无光照。待成虫产卵3d后，挑出全部成虫并转移至另一瓶饲料中继续产卵，经过一段时间的培养后，挑选1～3周龄的羽化成虫进行试验。

1.2.3 磷化氢气体发生与浓度测定

采用联合国粮食及农业组织（FAO）[5]推荐的装置，PH₃气体由磷化锌和10%硫酸反应制备而得，发生装置见图1。

1.2.4 磷化氢抗性测定

采用FAO推荐的磷化氢抗性测定方法，并稍做改动。通过预实验，设定5～7个浓度梯度，使试虫死亡率为16%-84%，设1个空白对照，每个浓度设3次重复。把50只试虫放入熏蒸瓶，用高真空硅脂把熏蒸瓶与玻璃旋塞密封。使用相应量程的气密性注射器抽取PH₃气体，从熏蒸瓶上的橡胶塞注入熏蒸瓶内，轻轻摇匀，置于溫度为30℃、相对湿度为75%、无光照的培养箱中密闭熏蒸20h。熏蒸结束后在通风橱中打开熏蒸瓶的玻璃旋塞，散气1h后取出试虫，给饲料饲养至少3d后，统计死亡数量，用毛笔触碰虫体，如果试虫的附肢都不动即视作死亡，记录每个浓度下试虫的死亡数与总数。

1.2.5 敌敌畏抗性测定

参考侯毅等[6]的方法，并稍做改动。用丙酮将敌敌畏原油稀释成不同的浓度，通过预实验，设定5-7个浓度梯度，使试虫的死亡率为16%-84%，用丙酮做对照实验，每个浓度设3次重复。吸取1mL丙酮稀释过的敌敌畏试剂，将试剂均匀地涂在直径为9cm的培养皿中，将培养皿放置在通风处1h，待丙酮挥发之后，将30只试虫放于培养皿中，让其在培养皿中运动2h。将处理过的试虫移到新的培养皿中，加入饲料，过24h，统计死亡数量，用毛笔触碰虫体，如果试虫的附肢都不动即视作死亡，记录每个浓度下试虫的死亡数与总数。

1.3 数据处理

用SPSS 17.0软件分析测定结果，分析得出12个品系的LC₅₀值、LC₉₉值和相应的毒力回归方程并计算抗性系数（Rf）以及相对抗性系数。其中，抗性系数（Rf）=试虫实际LC₅₀/敏感品系LC₅₀，相对系数=试虫实际LC₅₀/最小LC₅₀。

2 结果与分析

2.1 赤拟谷盗磷化氢抗性测定

赤拟谷盗各品系的磷化氢抗性数据见表2。结果表明，12个赤拟谷盗品系的磷化氢抗性系数范围为1.7-44.4，其中有8个品系是敏感品系，占调查总数的66.7%，其余4个品系为抗性品系，其中1个低抗品系、2个中抗品系、1个高抗品系，抗性品系占调查总数的33.3%。对不同场所的抗性情况分析发现，酒厂、加工厂、饲料厂和农户均有抗性品系和敏感品系，而来自粮库的1个品系为敏感品系，表明赤拟谷盗对磷化氢的抗性水平与场所没有显著相关性。与已有研究相比，本文所测定的赤拟谷盗磷化氢抗性水平不高。

2.2 赤拟谷盗敌敌畏抗性测定

12个赤拟谷盗品系的敌敌畏抗性数据见表3。结果表明，12个品系的致死中浓度（LC₅₀）值为0.051-0.108g/L，相对敏感性水平在2.1倍以内，表明这些赤拟谷盗品系对于敌敌畏的敏感性差异不大。12个赤拟谷盗品系来源于湖南省5个市5种不同的场所，推测湖南不同地区的赤拟谷盗品系对于敌敌畏的抗性水平较低，可以用敌敌畏来进行空仓熏蒸，以期达到理想的熏蒸效果。

3 结论

磷化氢作为储粮熏蒸剂，具有成本低、效果好、施药方便等特点，广泛运用于储粮害虫防治。然而由于长期且单一地使用磷化氢，储粮害虫对磷化氢产生了十分严重的抗药性[7]，导致磷化氢的杀虫效果大幅度下降。曹阳等[8]对五种储粮害虫11个品系的磷化氢抗性进行了测定，结果表明，与敏感品系相比，赤拟谷盗抗性品系的磷化氢抗性已高达449倍，而谷蠹与米象的抗性分别达327倍与148倍。严晓平等[9]对我国23个省（自治区）、55个地区粮库中的主要储粮害虫进行抗性测定，结果表明，低抗性虫样占9.8%、中抗性虫样占7.6%、高抗性虫样占13.0%、极高抗性虫样占15.2%。本文主要研究了湖南省5个市5种不同场所的12个赤拟谷盗品系对磷化氢的抗性数据，12个品系的磷化氢抗性系数范围为1.7-44.4，抗性品系占调查总数的33.3%。对不同场所的抗性情况分析发现，赤拟谷盗对磷化氢的抗性水平与场所没有显著相关性。赤拟谷盗晶系对磷化氢的抗性数据表明，湖南省这5个市的赤拟谷盗品系对磷化氢的抗性不严重，磷化氢仍然可以作为防治赤拟谷盗的熏蒸剂。然而由于样本数量较少，这些磷化氢抗性数据仅作为参考。与前人报道的赤拟谷盗抗性水平相比，本文测定的抗性水平偏低，其原因可能与样本的采集地、采集场所、样本经历的磷化氢熏蒸过程有关。

敌敌畏是一种有机磷杀虫剂，具有触杀、熏蒸等作用，常被用作防治储粮害虫的空仓杀虫剂。侯毅等[6]通过药膜法测定了赤拟谷盗成虫对于敌敌畏的抗性，致死中浓度（LC₅₀）为493.99mg/L。刘新等[10]测定了小麦蛾对敌敌畏的抗性，致死中浓度（LC₅₀）为618.5μg/mL。王长青等[1]研究了中华微蛾对敌敌畏的抗性，致死中浓度（LC₅₀）为98.21mg/L。劳传忠等[2]研究了敌敌畏对小眼书虱成虫的触杀效果，结果表明，致死中浓度（LC₅₀）为0.344 2μg/cm²。本文主要测定了湖南省5个市的12个赤拟谷盗品系对于敌敌畏的抗性水平，12个品系的致死中浓度（LC₅₀）值为0.051-0.108g/L，相对敏感性水平在2.1倍以内，表明这些赤拟谷盗品系对于敌敌畏的敏感性差异不大，据此推测，赤拟谷盗对敌敌畏没有产生较强的抗药性，敌敌畏仍然可以作为储粮空仓杀虫的有效药剂。

参考文献

[1]陈艳，张红建，谢更祥，等.海南地区赤拟谷盗抗药性及磷化氢完全致死浓度与时间的研究[J].热带农业科学，2017（5）：63-66.

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[3]段锦艳，吴海晶，唐培安，等.8个品系锈赤扁谷盗和谷蠹的磷化氢抗性测定[J].粮食储藏，2016 （1）：1-4.

[4]周天智，刘士强，马文斌，等.鄂中地区四种储粮害虫对磷化氢抗性发展及对策研究[J].粮食储藏，2011 （4）：6-9.

[5] ANONYMOUS. Reconmmend methods for the detection andmeasurement of resistance of agricultural pest to pesticidesTeantative method for adulrs of some major pests of stored cerealswith methylbromide and phosphine[J].FAO Plant ProtectionBulletin，1975（10）：120-122.

[6]侯毅，靳然，王志超，等.常用殺虫剂对赤拟谷盗成虫和幼虫的毒力测定[J].山西农业大学学报（自然科学版），2007 （2）：190-192.

[7]禹建辉，谢令德，沈茜，等.湖北不同地区锈赤扁谷盗磷化氢抗性比较[J].武汉工业学院学报，2013 （2）：22-25.

[8]曹阳，刘梅，郑彦昌.五种储粮害虫11个品系的磷化氢抗性测定[J].粮食储藏，2003 （2）：9-11+25.

[9]严晓平，周浩，沈兆鹏，等，中国储粮昆虫历次调查总结与分析[J].粮食储藏，2008 （6）：3-11.

[10]刘新，尤民生.敌敌畏、高效氯氰菊酯及其混剂对小菜蛾的毒力与药效[J].福建农业大学学报，2000 （2）：206-209.

[11]王长青，吉志新，王长安.敌敌畏·除虫菊提取液混配对中华微蛾的增效作用[J].安徽农业科学，2010 （5）：2438-2440.

[12]劳传忠，冼庆，刘芳芳，等.杀虫剂对小眼书虱成虫的触杀毒力[J].粮食储藏，2007 （4）：11-12+18.