妊娠期糖尿病孕妇血浆晚期氧化蛋白产物的变化及意义

陈彩香 李凡 海莎

AOPP是一种新型的蛋白氧化应激标志物, 近期有不少研究都发现AOPP在慢性肾病、糖尿病、慢性动脉粥样硬化、妊娠期糖尿病等疾病患者血浆中的表达都明显升高,提示AOPP可能与血管内皮功能紊乱、氧化应激有一定关联［1,2］。本研究旨在明确AOPP表达与GDM的关系, 现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年6月～2017年6月在本院产科进行产前检查的42例GDM孕妇作为研究组, 另选取40例正常孕妇作为对照组。研究组平均年龄(28.20±3.40)岁,孕前平均体质量指数(BMI)为(21.65±3.05)kg/m2, 平均孕次(1.93±1.12)次, 平均产次(0.33±0.41)次。对照组平均年龄(27.87±4.05)岁, 孕前平均BMI(22.01±2.91)kg/m2, 平均孕次(2.03±1.36)次, 平均产次(0.26±0.39)次。两组孕妇一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 方法 采集两组孕妇空腹静脉血液3 ml, 抗凝离心处理, 分离血清, 保留血浆, 保存在80℃冰箱中, 将14.085 mg氯胺-T与50 ml蒸馏水混合, 配置成氯胺-T标准品。在6只试管中分别加入不同浓度的氯胺-T标准溶液(0、10、20、30、40、50 μmol/L)。取 500 μl血浆样本 , 加入 5 倍的磷酸缓冲盐溶液(PBS)将样本稀释为2500 μl, 混合均匀。取200 ml稀释样本加入样品测试孔。在氯胺-T标准溶液孔中加入200 μl不同浓度的氯胺-T溶液。将200 μl的PBS加入空白调零孔中。每孔分别加入碘化钾溶液(1.16 μmol/L)10 μl, 混合均匀。每孔加入20 μl的冰醋酸溶液, 混合均匀。使用恒温水浴箱(37℃)孵育5 min, 测定OD值(波长340 nm)。计算标准品孔和样品孔的平均OD值, 根据线性回归方程计算血浆AOPP浓度。

1.3 观察指标 对两组孕妇妊娠早期(16～20孕周)、中期(24～28孕周)、晚期(32～36孕周)血浆AOPP水平进行检测并比较, 分析AOPP表达与血糖相关指标的关系。

1.4 统计学方法 采用SPSS22.0统计学软件进行数据统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 采用t检验；计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验；GDM与血浆AOPP的相关性采用Logistic回归分析。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 血浆AOPP水平 研究组孕妇妊娠早期、中期、晚期的血浆AOPP水平分别为(68.102±6.618)、(75.076±7.651)、(81.527±6.646)μmol/L, 均显著高于对照组的 (55.485±7.336)、(64.138±7.543)、(71.647±7.578)μmol/L, 差异有统计学意义(P＜0.05)。见表 1。

2.2 GDM与血浆AOPP的相关性 AOPP水平与GDM的发生呈正相关, 其为GDM的独立危险因素(P＜0.05)。见表2。

表1 两组孕妇妊娠早、中、晚期的血浆AOPP水平变化比较( ±s, μmol/L)

表1 两组孕妇妊娠早、中、晚期的血浆AOPP水平变化比较( ±s, μmol/L)

注：与对照组比较, aP＜0.05

研究组 42 68.102±6.618a 75.076±7.651a 81.527±6.646a对照组 40 55.485±7.336 64.138±7.543 71.647±7.578 t 8.185 6.516 6.285 P<0.05 <0.05 <0.05

表2 GDM与血浆AOPP的相关性分析

3 讨论

AOPP是一种较为精确、敏感的氧化应激标志物, 其能较为准确地反映氧化剂介导的蛋白损伤［3］。有文献报道,AOPP表达升高反映了氧化应激反应的增强, 其会造成血管内皮损伤, 所以其也可能是造成动脉粥样硬化的原因之一［4,5］。有多篇文献报道, 子痫前期患者胎盘组织、脐带血及血浆中的AOPP水平均存在异常升高［6］。从既往的文献报道来看, AOPP可能是通过通过加重或诱导氧化应激反应、促进炎症反应来参与各类疾病的发生与发展的［7］。AOPP的过度表达会刺激脐静脉内皮细胞释放大量的活性氧, 同时促使血管细胞粘附分子-1、细胞间粘附分子-1过表达, 从而加重胎盘组织缺氧、缺血, 而胎盘缺氧、缺血又会进一步加重氧化应激反应［8］。本次研究结果显示, 研究组孕妇妊娠早期、中期、晚期的血浆AOPP水平分别为(68.102±6.618)、(75.076±7.651)、(81.527±6.646)μmol/L, 均显著高于对照组的(55.485±7.336)、(64.138±7.543)、(71.647±7.578)μmol/L,差异有统计学意义(P＜0.05)。这一结果与国内相关文献报道［9］结果相符, 说明GDM患者存在着明显的氧化应激失衡, AOPP水平的异常升高可能与GDM的发生、发展有着密切联系。本文相关性分析结果也显示, AOPP水平与GDM的发生呈正相关, 其为GDM的独立危险因素(P＜0.05)。这可能是因为氧化应激的增强会使体内产生大量的活性氧, 而活性氧是功能性信号分子, 其会激活细胞内应激敏感性信号通路(c-Jun氨基末端激酶/应激活化蛋白激酶、氨基己糖、核因子-κB、蛋白激酶C、p38丝裂原活化蛋白激酶等), 从而对胰岛素信号传导产生干扰, 引起胰岛素抵抗, 进而引发GDM［10］。

综上所述, GDM孕妇的血浆AOPP表达明显升高, 且AOPP的表达水平与GDM发病率存在着正相关关系, 早期进行血浆AOPP检测可为预测GDP的发生提供一定的参考依据。