B族链球菌核酸检测在产前筛查中的应用

张桂花 罗锦彬

GBS是一种常见的细菌, 是导致胎膜早破、新生儿感染、脑膜炎等严重并发症发生的重要致病菌。GBS感染后存活的新生儿可伴有较为严重的耳聋、脑积水、小头畸形等后遗症［1-3］。为此, 对孕产妇进行 GBS检测尤为重要, 不仅能够有效降低并发症发生率, 还能够有效改善母婴结局。临床上主张加强对孕周为35～37周的孕产妇的产前检测, 通过给予孕产妇早期GBS产前检查干预, 能够较好地降低新生儿早期感染风险以及产褥病发生风险, 从而有效提高预防效率, 最大可能保障母婴健康。本文将本院800例孕产妇作为观察对象并进行了研究, 现总结如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 将于2016年7月～2017年7月本院行产检的800例孕产妇作为本次观察对象, 所有孕产妇均行GBS感染产前筛查, 随机抽选出GBS阴性孕产妇(阴性组)和GBS阳性孕产妇(阳性组), 各100例。阴性组年龄最小22岁, 最大48岁, 平均年龄 (40.13±2.62)岁；孕周35～37周, 平均孕周(36.57±0.14)周；57例经产妇, 43例初产妇。阳性组年龄最小23岁, 最大48岁, 平均年龄(40.33±2.56)岁；孕周35～37周, 平均孕周(36.42±0.19)周；58例经产妇, 42例初产妇。两组孕产妇一般资料比较差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。

1. 2 方法 ①标本采集：擦拭清理干净孕产妇的外阴分泌物, 将两根拭子缓慢小心地插入孕产妇的阴道内, 旋转1周,将阴道前1/3处的分泌物采集；而后将拭子缓慢小心地插入孕产妇的肛门, 约3 cm肛门括约肌上缘位置处进行1周的旋转, 进行直肠标本采集, 待标本采集完毕之后进行细菌培养以及PCR检测。②细菌培养：标本置入5%的羊血培养基里, 34～35℃温度保持, 培养时间：16～24 h。而后接种培养选取可疑的灰白色细菌或圆形细菌, 培养时间：16～18 h。对细菌种类进行检测、鉴别, 采用细菌鉴定仪进行操作处理。③PCR检测：采用Vortex振荡器对标本运输液管进行处理,迅速震荡均匀运输液后于其中提取出悬浊液, 并将悬浊液放入1.5 ml离心管内, 对其进行5 min 13000 r离心, 将上清弃掉之后于离心管内将拭子浸泡液1 ml倒入其中, 而后再次对其进行混合均匀处理, 并对其进行5 min 13000 r离心, 将上清弃掉之后液重悬采用50 µl拭子进行浸泡处理。采用一管对固形物进行提取, 并将其置于菌液中, 2 min 95℃干浴后进行高速震荡, 5 min后瞬时离心, 最后10 µl内参照加入, 2 min 95℃干浴后即刻冰浴备用。

1. 3 观察指标及判定标准 观察比较两种检测方法对GBS的阳性检出率以及阴性组、阳性组母婴并发症发生情况。GBS阳性评定标准：荧光信号存在显著的S形扩增曲线, CT值＜33［4］, TexasRed(内参)CT值＜40。母婴并发症发生情况包括胎膜早破、产后出血、早产、败血症、窒息、感染等。

1. 4 统计学方法 采用SPSS17.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 采用t检验；计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2. 1 两种检测方法对GBS的阳性检出率比较 细菌培养检测的GBS阳性检出率为9.00%, 明显低于PCR检测的12.75%, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 两种检测方法对800例孕产妇GBS的阳性检出率比较 ［n(%)］

2. 2 阴性组、阳性组母婴并发症发生情况比较 阴性组孕产妇并发症发生率为18.00%(18/100), 新生儿并发症发生率为5.00%(5/100)；阳性组孕产妇并发症发生率为43.00%(43/100),新生儿并发症发生率为25.00%(25/100)；阳性组孕产妇、新生儿并发症发生率显著高于阴性组, 差异具有统计学意义(P＜0.05)。

3 讨论

GBS通常寄居于人体的直肠或女性的阴道内部, GBS属于条件致病菌, 是导致新生儿脑膜炎、肺炎等严重并发症发生的重要因素。此外, GBS还可导致孕产妇感染, 是胎膜早破、早产的主要致病菌之一。相关数据研究显示, 在健康女性生殖道内, 约有30%的女性体内存在GBS, 通常情况下,GBS不会致病, 当人体身体抵抗力下降或机体免疫功能减退时可引发严重感染, 尤其是在妊娠期过程中极易出现GBS感染, 导致孕产妇患上胎膜感染、菌血症等严重性疾病［5-7］。

以往, 临床上行GBS检测通常采用细菌培养的方式进行处理, 通过收集直肠、阴道分泌物进行细菌培养, 能够在一定程度上有效检测出阳性GBS, 但是随着医学的深入发展,人们发现采用常规方式进行细菌培养极易出现假阴性等不良情况［8］。与此同时, 常规的细菌培养其检测方法所消耗的时间比较长, 阳性鉴定最短时间需要48 h, 且该检测方式的免疫学敏感性往往和菌量检测存在紧密的联系, 若检测的菌量比较低时极易发生漏诊、误诊等情况［9,10］。GBS的携带存在较为明显的间歇性以及短暂性等特征, 对孕产妇实施B族链球检测过程中选择合适的时机非常重要。

本文采取PCR对孕产妇进行GBS核酸检测, 从筛查、检测的结果来看, 细菌培养检测的GBS阳性检出率为9.00%,明显低于PCR检测的12.75%, 差异具有统计学意义(P＜0.05),充分表明了在产前筛查中应用PCR检测的应用优势。GBS感染可诱发多种妊娠期并发症, 如胎膜早破、早产、败血症等, 因而临床上将GBS作为妊娠期并发症诱发的主要致病菌之一。

综上所述, 在产前筛查中应用PCR检测方进行检查, 可以有效提高GBS的阳性检出率, 便于及时对阳性的孕产妇进行有效的干预处理, 从而最大限度降低母婴并发症发生风险,确保母婴的生命安全。

［收稿日期：2018-04-02］