泸山猴群狂犬病毒携带情况调查

贾青松 ，李凤琴 ，胡磊 ，宋绍怡 ，杨键

（1.西昌市邛海泸山风景名胜区管理局，四川 西昌 615000；2.西昌学院动物科学学院，四川 西昌 615000）

泸山是邛海泸山风景名胜区的重要组成部分，自上世纪90年代引入猕猴以来，景区内的猴群数量不断增长。据文献记载，猕猴可携带狂犬病毒[1]。为了解泸山景区内猕猴群体携带狂犬病毒的情况，评估泸山景区内猕猴群体传染狂犬病毒的风险，我们开展了本次调查。

1 调查材料

标本来源：2016年12月，经报请四川省林业野生保护部门审批同意，由西昌市邛海泸山管理局、西昌学院、西华师范大学组成的《泸山猕猴种群生态研究及主要人畜共患病的检测与预警》课题组利用泸山猴群抓捕分流的机会，随机采集了47只猕猴个体的血液标本，共抽取了47份猕猴上肢静脉血样（每份血样5mL）。采样比例为捕获猴群的45.63%，是泸山当时全体猴群的18.58%，具有充分的代表性。

2 调查方法

2.1 检测方法 采用夹心酶联免疫吸附法检测血液中狂犬病的带毒情况。

2.1.1 样品、阴性和阳性对照按比例稀释，样品最终稀释度为5倍。

2.1.2 分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包备板孔底部加入准备好的样品和标准品，37℃反应30min。

2.1.3 洗板5次，加入酶标试剂，37℃反应30min。

2.1.4 洗板5次，加入显色液A、B，37℃显色10min。

2.1.5 加入中止液，15 min内在酶标仪中以波长450nm测OD值。

2.2 判定标准 以标准物浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘出标准曲线，根据样品OD值从标准曲线查出相应的浓度。依据说明书，浓度≤50IU/L为阴性，浓度在50～182IU/L为可疑，浓度≥182IU/L为阳性。而样本采用了5倍稀释，故浓度≤10IU/L为阴性，浓度在10～36.4IU/L为可疑，浓度≥36.4IU/L为阳性。2.3 结果 全部47份样本的检测结果都小于10IU/L（表1），故判为阴性。

表1 泸山景区猕猴血清狂犬病毒ELISA检测结果

3 结论与分析

本文采用夹心酶联免疫吸附法，使用猴子狂犬病毒（RV）酶联免疫分析试剂盒检测了47份泸山猕猴的静脉血样，结果全部为阴性。表明泸山猕猴群体作为狂犬病传染源的可能性很小，这与20多年来泸山猴子多次伤人但并没有导致狂犬病发生，同时在日常观测中也没有发现猕猴感染狂犬病毒的情况是吻合的。

本次检测结果为阴性的原因有以下几种可能：第一，猕猴不是狂犬病毒的贮存宿主[2]；第二，泸山是孤山，处于相对独立的生态环境，缺乏动物通道，与周边其他动物接触少，故携带狂犬病毒的几率低；第三，泸山猴群是由二十年前引进的十几只猴子繁殖起来的，繁衍年代较近，属于封闭繁殖，没有外来种群流入，故狂犬病感染几率低；第四，邛泸景区严格实行游客宠物管理，包括犬只在内的所有宠物不得进入景区，泸山景区内住户不得养狗，进一步阻断了狂犬病的传播途径；第五，某些因素导致假阴性样本存在的可能，如检测方法的问题，酶联免疫吸附法灵敏度高、特异性好，但操作各环节稍有不慎（如加样不规范，孵育时间不够，洗板次数过多，显色剂过期等因素）就会对检测结果产生影响，也可能是部分猕猴感染后抗原较少而无法检出。

据文献报道，我国95%的狂犬病病例由犬咬伤引起，3%由猫咬伤引起，2%由鼠、狐、狼、鼬獾等动物引起[3]。目前全国还没有人类因猕猴咬伤而传染狂犬病的报道，结合本次调查全部47份样本都为阴性的结果，我们认为泸山猕猴群体作为狂犬病传染源的可能性极小。通过将泸山猕猴狂犬病毒的检测结论告知被猕猴咬伤的游客，可以消除游客的顾虑。下一步，景区当进一步加强泸山猴群狂犬病及其他人兽共患病的疫情监测工作，开展野生动物人兽共患病防治知识的宣传教育工作，加强文明旅游宣传，让游客与野生动物保持距离，不主动逗猴玩，不携带犬只进景区。