2018年三亚雪古丽牛羊布鲁氏菌病及口蹄疫监测与风险评估

易 忠 ，赵华林 ，林奕全 ，王运俅 ，杜 丽 ，储岳峰 ，朱建明 *

（1.新疆畜牧科学院兽医研究所，乌鲁木齐 830000；2.三亚雪古丽现代生态农业综合开发有限公司，海南 三亚 572000 3.海南大学，海口 570000；4.中国农业科学院兰州兽医研究所，兰州 730046）

布鲁氏杆菌病（brucellosis）由布鲁氏菌属(Brucella)细菌所致以侵害生殖系统为特征的人畜共患地方流行性传染病，羊为主要传染源，皮毛、肉类加工、挤奶等可经皮肤黏膜受染，进食病畜肉、奶及奶制品可经消化道传染[1,2]。 口蹄疫（Foot-and-mouth disease，FMD）是由口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus，FMDV）引起的世界性重大动物疫病，严重制约着全球畜牧业的发展[3]。畜牧业是海南热带高效农业的重要内容之一，“无疫区”不仅是海南畜牧业发展的品牌，也是海南国际旅游岛建设和公共卫生安全的基础性工程。近年来，在农业部关于“促进草食畜牧业加快发展的指导意见”的引导下，海南农民养牛的积极性不断高涨。保证该产业健康发展不仅关系到畜产品的卫生与安全，而且影响到全省旅游业的发展和国家“海南国际旅游岛发展战略”的顺利实施。因此，持续性确保海南牛羊口蹄疫及布鲁氏菌病无疫作用重大，意义深远[4]。基于上述目标，我们对三亚雪古丽的牛羊及从云南引进的羊进行了口蹄疫及布鲁氏菌病自我监测与风险评估。

1 材料与方法

1.1 检测样品

2018年1月2日至31日采集三亚雪古丽奶牛场牛血液194份、OP液 21份；三亚雪古丽种羊场羊血液596份、OP液25份，昌江雪古丽羊场羊血液452份、OP液 25份，雪古丽引进云南羊血液190份、OP液7份，共计血液样品1 432份、OP液78份(注：牛血液有8份未分离出血清）。

1.2 检测方法及试剂盒

参照布鲁氏菌病诊断技术规程用虎红平板方法检测羊布鲁氏菌病[5]。虎红平板凝集试验抗原（敏感型）、布鲁氏菌试管凝集抗原及布鲁氏菌阳性对照血清（羊种）购自英国OIE参考实验室。

口蹄疫免疫抗体检测使用液相阻断ELISA方法，口蹄疫病原学检测采用多重RT-PCR（Multi-RTPCR）方法，试剂盒均购自中国农业科学院兰州兽医研究所。

2 结果与分析

2.1 三亚雪古丽羊血清样品的布鲁氏菌病检测情况

2018年三亚雪古丽种羊场、昌江雪古丽羊场和雪古丽云南引进羊血清样品共计1 238头份使用虎红平板方法用于布鲁氏菌病监测，检测结果全部阴性（—）。结果表明雪古丽的羊场目前不存在布鲁氏菌感染情况。

2.2 三亚雪古丽牛羊样品口蹄疫检测情况

为了持续监测本单位所有牛羊口蹄疫免疫情况及携带或感染口蹄疫情况，对采集的牛羊样品进行了口蹄疫免疫抗体及病原学检测，具体如下表1。

表1 牛羊样品口蹄疫检测情况

2.3 牛羊A、O型口蹄疫抗体免疫抗体检测结果

采集样品的口蹄疫A型 和O型免疫抗体检测结果见表2、表3。

表2 牛口蹄疫A型免疫抗体检测结果

从表2及表3表中可见，雪古丽的牛口蹄疫群体免疫水平（牛O型 ）达到国家重大动物疫病规定的免疫合格率（70%）的标准，O型抗体免疫合格率72%；A型抗体免疫合格率47.4%，羊O型免疫合格率53.55%，免疫水平未达到农业部规定的免疫合格率的标准。

表3 牛羊口蹄疫O型免疫抗体检测结果

2.4 口蹄疫病原学样品监测结果

随机抽取牛羊OP液样品使用多重RT-PCR进行口蹄疫病原学检测，结果显示无病原学阳性样品，样品RT-PCR结果见图1、图2、图3和图4。

图1 三亚雪古丽牛场样品口蹄疫病原学检测RT-PCR结果

图2 三亚雪古丽羊场样品口蹄疫病原学检测RT-PCR结果

图3 昌江雪古丽样品口蹄疫病原学检测RT-PCR结果

图4 引进羊（云南）样品口蹄疫病原学检测RT-PCR结果

随机抽取样品的口蹄疫病原学检测结果表明，目前雪古丽的牛羊及引进羊只未被口蹄疫病毒感染。

3 讨 论

口蹄疫是国家强制免疫的重大动物疫病，海南是口蹄疫无疫区，持续性确保海南牛羊口蹄疫无疫作用重大，意义深远[3,6]。

布鲁氏菌病在我国主要流行羊种，从临床看，羊种的致病力最强，感染后症状较重，可引起暴发流行；布鲁菌在自然环境中生命力较强，故可通过多种途径传播[7]。在病畜的分泌物、排泄物及在畜的脏器中传染源存在[8]。检出的病畜，及时隔离治疗，必要时宰杀之，对受威胁动物重要措施是进行菌苗免疫。病畜的流产物及死畜必需深埋。防止病畜或患者的排泄物污染水源。对与牲畜或畜产品接触密切者，要进行宣传教育，做好个人防护。

2017年海南三亚雪古丽曾进行过口蹄疫病原及免疫抗体的自我监测与风险评估，检测结果显示本场牛O型免疫抗体合格率刚刚达到农业部规定的免疫合格率（70%）的标准，而羊的群体免疫状况较差，免疫抗体合格率远低于农业部规定的标准[9]。

2018年采集的海南雪古丽牛羊血清样品及OP液样品，再次用于羊布鲁氏菌、口蹄疫病原及免疫抗体的自我监测与风险评估。虎红平板检测布鲁氏菌病，结果表明雪古丽的羊场目前不存在布鲁氏菌感染情况，但应每年进行一次监测，确保牛羊始终处于布鲁氏菌病净化状态[10]。本次监测中雪古丽的牛羊中仅牛O型口蹄疫群体免疫水平达到国家重大动物疫病规定的免疫合格率（70%）的标准，即O型抗体免疫合格的有126头份，合格率72%；A型抗体免疫合格的有83头份，合格率47.4%；检测中羊O型抗体免疫合格的有663头份，免疫合格率53.55%。

为确保雪古丽牛羊持续无疫，免疫抗体不合格动物应及时给予补免。同时，加强免疫持续监测，引种时要做好隔离观察及检测。