输液系统中抗氧剂迁移量测定的方法学研究

李委潞，谢 博，苏鸿雁，梅开忠

(天津梅花医药有限公司 天津 300384)

药品制剂选择合适的内包材需要进行药品与包装材料的相容性研究。不同给药途径制剂与包装系统发生相互作用的风险级别不同，其中，注射液和注射用混悬液的风险级别最高[1]，因其直接进入人体血液循环系统，所以安全性更需要关注。而注射剂除了直接接触内包材，在使用过程中，往往还需直接接触输液器或注射器等医疗器械，故对注射剂与输液系统的相容性、二者之间的相互作用也应重点考察。输液系统的构造复杂，组件较多，不同组件的添加剂种类也多，有文献指出聚丙烯聚乙烯等包装材料中有抗氧剂迁出[2]。本文对输液系统中可能存在的5种抗氧剂在注射液中迁移量测定的方法学进行研究。

1 实验条件

1.1 仪器与试药

仪器：岛津 LC2030高效液相色谱仪，色谱柱为Thermo C18，5,μm，4.6,mm×250,mm。

试药：抗氧剂 BHT(批号 101927788，纯度 99.0，阿拉丁)、抗氧剂 1010(批号 1002331683，纯度 99.0，阿拉丁)、抗氧剂 1076(批号 1002324221，纯度 99.0，阿拉丁)、抗氧剂 330(批号 1002507252，纯度 99.0，阿拉丁)、抗氧剂 168(批号 1002384913，纯度 99.0，阿拉丁)，乙腈、四氢呋喃均为色谱纯。

样品：一次性使用输液器(带针)(山东威高集团医用高分子制品股份有限公司，批号 20171021)，10%,葡萄糖注射液 250,mL(山东齐都药业有限公司，批号11B1708039)。

1.2 色谱条件

色谱柱：Thermo C18(5,μm，4.6,mm×250,mm，S/N：10504426)。流动相：乙腈-四氢呋喃-水(58∶30∶12)。柱温：40,℃。检测波长：274,nm。进样量：20,μL。

1.3 对照储备液的配制

分别取抗氧剂 1010、抗氧剂 1076、抗氧剂 330、抗氧剂 168、抗氧剂 BHT的对照品 60,mg，精密称定，置于同一个 50,mL容量瓶中，加四氢呋喃-乙腈(体积比＝1∶1)溶解并稀释至刻度，摇匀，配成浓度约为1.2,mg/mL的溶液，作为储备液1。

分别取抗氧剂 1010、抗氧剂 1076、抗氧剂 330、抗氧剂 168、抗氧剂 BHT的对照品 75,mg，精密称定，置于同一个 50,mL容量瓶中，加四氢呋喃-乙腈(体积比＝1∶1)[3]溶解并稀释至刻度，再精密量取1,mL置于 50,mL容量瓶中，加四氢呋喃-乙腈(体积比＝1∶1)稀释至刻度，摇匀，配成浓度约为30,μg/mL的溶液，作为储备液2。

2 方法与结果

2.1 线性试验

精密量取储备液 1适量，加四氢呋喃-乙腈(体积比＝1∶1)稀释，分别制得浓度为 0.3、1.2、6、12、24、60、120、240、300,μg/mL 的对照溶液，精密量取各20,μL，按 1.2项下色谱条件分别进样，记录色谱图。以峰面积(A)对浓度(C，μg/mL)进行线性回归，得抗氧剂1010、抗氧剂1076、抗氧剂330、抗氧剂168、抗氧剂 BHT的回归方程和相关系数，结果(见表1)表明：抗氧剂 1010、抗氧剂 1076、抗氧剂 330、抗氧剂168、抗氧剂BHT分别在表中所示浓度范围内线性关系良好。图1为对照品色谱图。

图1 对照品色谱图Fig.1 Comparative chromatogram

表1 线性试验Tab.1 Linear test

2.2 精密度试验

取2.1项下浓度为6、120,μg/mL的对照溶液，分别连续进样重复测定 6次，得到峰面积，计算 RSD值。结果如表2。根据 RSD值可以看出，该方法精密度良好。

表2 精密度试验Tab.2 Precision test

2.3 稳定性试验

取 2.1项下浓度为 120、24、6,μg/mL 的对照溶液，分别在室温放置 0、24,h，进样 3次进行测定。RSD(%),结果如表3，显示该方法稳定性良好。

2.4 重复性试验

取 10%,葡萄糖注射液，与一次性使用输液器(带针)连接，模拟输液过程，从输液针出口量取通过输液器的葡萄糖溶液 100,mL置于容量瓶中。将葡萄糖溶液以 2～3,mL/min的速度通过固相萃取柱。分别用 5,mL甲醇、3,mL四氢呋喃依次洗脱，收集洗脱液，用四氢呋喃-乙腈(体积比＝1∶1)稀释至 10,mL，平均制备 6份，直接进样测定，均检出抗氧剂 BHT，其余4种抗氧剂均未检出。将测得BHT的峰面积代入标准曲线进行计算，结果见表4。抗氧剂 BHT的RSD(%)为1.86，表明该方法重复性良好。

表3 抗氧剂对照品室温放置稳定性试验Tab.3 Stability test for room temperature placement of antioxidant reference product

表4 重复性试验结果Tab.4 Repetition test results

2.5 检测限

取抗氧剂 1010、抗氧剂 1076、抗氧剂 330、抗氧剂 168、抗氧剂 BHT对照品 75,mg，精密称定，分别置于50,mL量瓶中，加四氢呋喃-乙腈(体积比＝1∶1)溶解并稀释至刻度，精密量取 1,mL置 50,mL量瓶中，加四氢呋喃-乙腈(体积比＝1∶1)稀释至刻度，摇匀，配成浓度约为 30,μg/mL的溶液，将各溶液逐级稀释，按1.2项下色谱条件进样，经测定信噪比(S/N)为 2～3时，抗氧剂 1010、抗氧剂 1076、抗氧剂 330、抗氧剂168、抗氧剂BHT浓度分别约为 0.06、0.075、0.03、0.06、0.075,μg/mL。

2.6 回收率试验

取 10%,葡萄糖注射液，与一次性使用输液器(带针)连接，模拟输液过程，从输液针出口量取通过输液器的葡萄糖溶液100,mL置于容量瓶中，加入1,mL储备液 2，混匀。溶液以 2～3,mL/min的速度通过固相萃取柱。分别用5,mL甲醇、3,mL四氢呋喃依次洗脱，收集洗脱液，用四氢呋喃-乙腈(体积比＝1∶1)稀释至 10,mL，直接进样测定。将测得峰面积代入标准曲线进行计算，结果见表5。

2.7 抗氧剂在注射液中迁移量的测定

取 10%,葡萄糖注射液，与一次性使用输液器(带针)连接，分别在常温及高温 60,℃下模拟输液过程，在 0、3、6、24,h时量取通过输液器的溶液 100,mL置于容量瓶中。溶液以 2～3,mL/min的速度通过固相萃取柱。分别用 5,mL甲醇、3,mL四氢呋喃依次洗脱，收集洗脱液，用四氢呋喃-乙腈(体积比＝1∶1)稀释至 10,mL，直接进样测定[4]。将测得峰面积代入标准曲线进行计算，结果见表6。抗氧剂 1010、1076、330、168的迁移量均低于检测限，视为未检出。图 2为抗氧剂迁移测定结果，3.971为抗氧剂BHT的峰。

表5 抗氧剂迁移回收率试验结果Tab.5 Test results of the transfer recovery rate of antioxidant

表6 抗氧剂在注射液中迁移量测定结果Tab.6 Determination of migration of antioxidant in injection

图2 抗氧剂迁移测定结果Fig.2 Results of the migration determination of antioxidant

3 讨 论

输液系统包括输液器、输液针、输液瓶等部件，其中输液器构造复杂，组件多，主要包括穿刺器、软管、滴斗、过滤器、螺旋接头、流量调节器等。目前市售输液器多为 PVC、聚乙烯或聚丙烯材质，而输液瓶主要有钠钙玻璃、低/中硼硅玻璃、低密度聚乙烯/聚丙烯等材质，除玻璃材质外的输液用品在生产过程中经常会添加一些抗氧剂，但一般不会超过 3种。因此，开发能够及时、准确、批量化地检测输液系统中抗氧剂迁移的方法非常必要。本文用 HPLC法对输液系统中可能存在的 5种常见抗氧剂的迁移量进行方法学研究，包括线性试验、精密度试验、稳定性试验、重复性试验、检测限、回收率试验，结果表明该方法适用性好，能够准确检测出输液系统抗氧剂在注射液中的迁移含量，可作为评价输液系统与药液相容性的依据，并可为进一步评价其安全性提供参考。