蜜蜂病毒病诊断
2018-08-01
中国农业科学院蜜蜂研究所，北京100093
病毒是一种由核酸与蛋白质或仅由蛋白质构成的非细胞型病原。病毒个体微小，结构简单，完全寄生。蜜蜂病毒病具有感染不易发现，潜伏期长等特点。大部分蜜蜂病毒都是小RNA病毒，属于小核糖核酸RNA病毒科。由于其病毒的感染具有较强的潜伏性，具有较强的存活能力，因此对蜜蜂的健康构成极大的危害。至今已发现超过20种病毒能够感染蜜蜂并具有较强的致病性。本文只介绍我国分布最广及危害较为严重的主要蜜蜂病毒。
一、蜜蜂卷翅病毒
1.病原
蜜蜂卷翅病毒能引起蜜蜂的翅发育不全或畸形，无法呈现正常平整状态，造成蜜蜂不能飞翔。蜜蜂卷翅病毒为正义单链RNA病毒，属于传染性软腐病病毒属。现全球已获得超过100个毒株，但其毒株的致病性具有明显的差异性。
2.症状与判别方法
图1 感染蜜蜂卷翅病毒的典型症状
该病毒主要感染新出房的蜜蜂工蜂，其翅是不完整或畸形的，不能飞翔，在巢门前爬行。其最典型症状为蜜蜂成蜂的翅残缺不完整（见图1），其体形变小，失去正常颜色，而与卷翅病毒最为紧密的还有另一个病害，狄斯瓦螨，俗称大蜂螨。一般情况下，此类病毒的蜂群一定能够发现大蜂螨的危害。剥开幼虫体表或蛹巢房能发现蜂螨在幼虫或蛹的身体上，如发现螨害严重，大多时候已经感染卷翅病毒。显微镜下能观察到形状为二十面体的大小为30nm的病毒粒子。
3.主要防治措施
由于此病毒能与螨紧密互作，在上一年越冬前处理螨的过程中，一定要彻底杀螨。在卷翅病毒感染早期可以采取杀螨或换王的方式，阻止病毒进一步传播与扩散。也可以将弱群合并，强群饲养，增加蜂群的整体抵抗力。尽量减少蜂具及蜂粮在蜂群间的共用率，尤其是感染严重的蜂群的巢框、巢脾、蜜脾及蜂刷不要放入其他健康或染病较轻的蜂群，以防带入感染源。当卷翅病毒感染非常严重时，可将整箱蜜蜂进行搬离原场（也要远离其他蜂箱或蜂场）或销毁。同时，为了整体蜂群的健康，不能判别症状时禁止乱用药。蜜蜂保护研究室已开发相关药物，正在中试阶段。
二、慢性麻痹病毒
蜜蜂慢性麻痹病毒是主要感染成蜂的一种病毒病，近几年对蜂群的影响更为严重，此病毒有两种不同的感染型，即黑亮型和大肚型。
（一）黑亮型
1.病原
蜜蜂慢性麻痹病毒也是一种正义单链小RNA病毒，目前由于慢性麻痹病毒的结构与功能尚未完全解析，并且其病毒粒子的大小与形状也与其他蜜蜂小RNA病毒不相近，因此，国际病毒分类委员会在其病毒的种属分类上至今未归入任何科属。其毒株基因组主要是由两个RNA分子片段组成，为RNA 1与RNA 2。
图2 感染蜜蜂慢性麻痹病毒的典型症状（黑亮型）
图3 感染蜜蜂慢性麻痹病毒的典型症状（大肚型）
2.症状与判别方法
该病毒主要感染成蜂，在过去主要发生于春末或秋初，现在发生并流行于春初秋末或冬初。其典型症状为背腹部油黑发亮，绒毛脱落，感染此病毒的蜂主要在蜂箱门前及附近进行爬行，不能飞翔，或大部分在巢框上爬行。显微镜下的病毒粒子为不规则的大小为28nm左右。
3.主要防治措施
由于病毒感染多数发生于隐性感染，发现典型症状时，已危害严重。在防治上，要注意保温及干燥，尤其是早春时，加强保温。另外，要注意饲料及蜂粮的卫生，当饲喂花粉时应先经过辐照或其他类似的方法杀菌。同时，在感染初期如发现有爬蜂但症状不明显时，可拉出蜜蜂的中肠，观察其中肠是否正常，如发现环纹消失或发现微孢子虫感染，要及时处理蜂群。再之，发现蜂群感染严重，及时换王或销毁严重蜂群。蜜蜂保护研究室已开发相关药物，正在中试阶段。
（二）大肚型
1.病原
其病原相同于黑亮型。由于其病毒的分子生物学特点、基因结构及分类尚未完全理解，因此不能判断其导致不同症状的原因。
2.症状与判别方法
大肚型是此类感染蜜蜂的典型症状。感染的病蜂腹部明显膨大，不能消化，在巢门前或蜂箱附近缓慢爬行，不能飞翔，在爬行过程中翅和身体经常性颤抖，有时一些蜂会在蜂箱顶部结团，拉出中肠后可见黄色液体、黑褐色或水样状液体。
3.主要防治措施
主要防治措施等同于黑亮型。
三、黑蜂王台病毒
1.病原
蜜蜂黑蜂王台病是由黑蜂王台病毒引起的一种小RNA病毒。在病毒分类学上，属于双顺反子病毒科，蟋蟀麻痹病毒属，其病毒粒子大小为30 nm。
2.症状与判别方法
最初发现该病时，在蜂王幼虫的巢房里，死亡的幼虫为黑色，其巢房也为深黑色。黑蜂王台病毒于1977年第一次被分离自死蜂王幼虫和预蛹。在感染此病毒的初期，染病的幼虫呈现灰黄色，然后呈囊状型，类似于囊状幼虫病的症状。黑蜂王台病毒与蜜蜂微孢子虫及狄斯瓦螨紧密相关，当发现有螨或拉开蜜蜂中肠可见微孢子，要及时防治。
图4 感染黑蜂王台病毒的典型症状
3.主要防治措施
近年来，由于黑蜂王台病在我国流行范围较广，危害涉及面较大，并且大部分情况下均建立隐性持续性感染，当遇到其他压力因素，如蜂螨或微孢子虫，会出现大量爬蜂的现象。当前蜂群实际感染黑蜂王台病相当普遍，工蜂尤其突出，并且症状不如以前那样明显，幼虫感染的几率相对小。当发现疑似蜂群可将蜂样送检，采用分子手段进行检测进一步确认。首先，发现巢房与幼虫有变黑色的症状，应立即换王，将原有幼虫脾移出，隔离或销毁。其次重点检查蜂群是否感染微孢子虫，如果镜检发现感染了微孢子虫，立即采取饲喂柠檬酸或米醋等防治。同时，在饲喂花粉时，一定要将花粉先消毒，尤其是春季，湿冷天气，必须保证花粉的卫生质量，保证其巢箱的干燥。
四、蜜蜂丝状病毒
1.病原
蜜蜂丝状病毒是感染蜜蜂的DNA病毒，在病毒学分类上暂未分类。在本研究团队的前期调查研究过程中，发现蜜蜂丝状病毒在蜂群中有较高的流行率，而且大部分为隐性感染。该病毒于1977年首次于美国发现，其形状呈线或丝状，病毒粒子大小为0.3～0.47 μm。
2.症状与判别方法
最初发现该病毒是在爬蜂中，感染此病毒的蜜蜂不能飞翔，在巢门口附近乱爬，多发病于春季或秋季。当取少量蜜蜂血淋巴，其状态呈乳白色血淋巴，当置于显微镜下，可见血淋巴充满了小颗粒，这些小颗粒的形状从圆形到棒形，含有细丝。
3.主要防治措施
由于蜜蜂的DNA病毒相对RNA病毒了解的太少，而且其基因组结构尚未完全解析。现无有效的防控措施。
五、KaKugo病毒
1.病原
该病毒首次在日本防御工蜂的头部分离获得，属于传染性软化病毒属，粒子大小类似于卷翅病毒，约30 nm。
2.症状与判别方法
该病毒最明显的特征是巢门口的守卫蜂，尤其是注意观察守卫蜂的行为，如发现攻击性较强的蜜蜂，多数为感染了此病毒。或者当管理人员检查某一群蜂时，发现某一群蜂易攻击人，尤其是在蜜、粉充足的情况下，具有较强攻击性的蜂群很可能感染了此病毒。
3.主要防治措施
此病毒主要是由于感染蜜蜂的脑部神经基因的变化引起的，至目前为止，并无有效的防治药物。另外，由于该病毒与卷翅病毒在遗传结构上紧密相关，因此在饲养管理上，加强螨害的防治，如发现蜂螨危害，立即采取药物治疗蜂螨。
六、以色列急性麻痹病毒
1.病原
以色列急性麻痹病毒于2002年首次在以色列死蜂中分离到，属于双顺反子病毒科。病毒粒子大约28～30 nm，二十面体状。在全世界现已发现20个以上的毒株，不同毒株间的致病力差异性较大。
2.症状与判别方法
感染以色列急性麻痹病毒的蜜蜂，其典型症状为颤抖，乱爬，不能飞翔，进而蜜蜂出现麻痹症状，尤其是清晰可见蜜蜂的足麻痹颤抖，进而身体变黑，体毛脱光。
图5 蜜蜂丝状蜜蜂病毒的形态（A）及感染蜜蜂的典型症状（B、C）
图6 感染Kakugo病毒的典型行为特征（引自《Tomoko,et al.2004》）
图7 感染囊状幼虫病毒的典型症状
3.主要防治措施
虽然以色列急性麻痹病毒在我国并不是危害蜜蜂的主要病原，但是在最近的病原调查中发现，感染以色列急性麻痹病毒的感染率不断提高。最主要的防治措施是加强饲养管理，强群饲养，增加群体抵抗力。其次是饲喂dsRNA为主要制剂的生物防治药物，但是其成本较高。蜜蜂保护研究室已开发相关药物，正在中试阶段。
七、中华蜜蜂囊状幼虫病毒
1.病原
中华蜜蜂囊状幼虫病毒是囊状幼虫病毒的一个毒株。囊状幼虫病毒主要有西方蜜蜂囊状幼虫病毒、中蜂囊状幼虫病毒与泰国囊状幼虫病毒。该病毒粒子呈球形，粒子大小约为30nm。在我国中蜂囊状幼虫病对中蜂产业构成严重威胁。
2.症状与判别方法
该病毒最初1971年在我国广东发生并流行。此病毒最典型的症状是导致感染的幼虫具有囊状水样外观。而感染此病毒的幼虫不能化蛹，虫体的颜色是由白到淡黄，最后变成棕褐色而死亡。大日龄幼虫在感染此病毒后，头部上翘，体表失去光泽。另一个典型的症状是，整个子脾容易出现花子的现象。
3.主要防治措施
中蜂囊状幼虫病是当前中蜂最为严重的病害。当感染初期不严重时发现，可采取中草药半枝莲（50g）与金银花（50g）煎熬后，将药汁与糖水（1∶1）喂于蜜蜂，饲喂4～5次后观察其治疗效果，如果有效，再继续饲喂2～3次。其次，在早春时，营养饲料必须充足，加强群势，以强群为主，增加抵抗力，如分蜂群感染囊状幼虫病，应将多个弱群合并后组成强群饲养。如果仍无效时，应立即换王，改变子一代感染的情况。当发现蜂群感染此病毒非常严重时，子脾呈现幼虫分布不均，花子现象特别厉害时，应隔离蜂群，将病群搬离原场，禁止将病群的子脾，巢框等设备移入健康群进行使用。蜜蜂保护研究室已开发相关药物，正在中试阶段。
