药品微生物检测中均质器的应用探讨

王闫

摘 要：随着我国现代社会经济发展水平的不断提高，人们越来越注重个人健康，这也就意味着我国的医疗设备、技术、人才、药品等都会面临巨大的挑战。药品的安全性也就成为了患者是否能够获得生命安全的重要影响因素。药品微生物检测结果的可靠性和准确性对临床医学的发展产生了一定的影响，在药品微生物检测中会有多种方式，本文将重点对使用均质器进行检测作相应的探究。

关键词：均质器；微生物检测；供试液制备

一、药品微生物使用均质器检测的事前准备

（一）准备实验仪器

拍击式均质器（西班牙IUL）；旋刀式均质器；

（二）准备所用到的菌株

有中国食品检定研究院提供的第三代菌种，分别是金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、黑曲霉。

（三）培养基

由美国BD公司提供的胰酪大豆胨琼脂、沙式葡萄糖琼脂。

（四）试药

稀释剂为PH值为7.0的氯化钠-蛋白胨缓冲液。

二、药品微生物使用均质器检测的具体操作步骤和实验结果的获取

（一）配制所需要的菌液

按照《中国药典》中附录中所说的微生物限度的检查法规定的试菌液制备方法，开始制备所需要的菌液。首先将金黄色的葡萄球菌、大肠埃希菌制成每1ml约含50-100cfu的菌悬液；其次将白色念珠菌制成每1ml约含50-100cfu的菌悬液；最后将黑曲霉制成每1ml约含50-100cfu的孢子悬液，完成菌液的制作。

（二）制造所需的供试液

在10g试品中加入100ml的PH值为7.0的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液的均质袋中，将其拍击成1：10的供试品溶液I，完成拍击式均质器的制备。然后同样在10g供试品中加入100ml的PH值为7.0的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，制成供试品溶液Ⅱ，完成旋刀式均质器的制备。

（三）进行实验

按照《中国药典》中的一部分附录中所说的微生物限度检查法规定方法对供试品的细菌数、霉菌、酵母菌的数量进行检测。每株试验菌的每种培养基至少制备两个平皿，最终的技术结果可以通过求其数值的算术平均数得到。將1ml的供试液放在90mm的无菌平皿中，并在其中注入15～20ml温度低于45℃的融化的胰酪大豆胨琼脂和沙式葡萄糖琼脂培养基混合均匀、待其凝固、将其倒置按规定的条件培养并记录数据。

（四）看不同组中微生物的回收率

按照《中国药典》后的增补本第二公示稿非无菌产品需要氧菌检查菌回收率方法将活菌进行回收率试验。在此要注意的是：加入的菌液的体积不能够超过供试液体积的1%。将上述实验中所用的供试液取出，用稀释之后的溶液代替菌液同试验组操作，完成对供试品的对照。然后再将稀释后的液体代替供试液，按照实验组中所论述的步骤加入试验菌液并完成对微生物的回收试验。试验组以法测定，同时测定供试品对照组及菌液对照组菌数做好相应的记录，然后根据所记录的数据求出各个试验组的平均菌落数及其回收率。

三、药品微生物使用均质器检测后对实验结果的对比

取40批的样品，按照上述实验制备供试品溶液，依法检验。制定两种方法检验结果的对比表，然后对样品检验的结果进行统计学的处理并作相关记录。

四、分析如何选择相应的均质器去检测

（一）简单分析旋刀式均质器和拍击式均质器

我们对9批供试品进行加样回收率的试验时，根据上述试验中的相关数据我们可以得到：旋刀式均质器对细菌的回收率要比拍击式均质器的回收率稍稍高出一些，两种均质器的检出率分别是87.5%-100%、77.5%-100%；旋刀式均质器对真菌的回收率是81.6%-98.3%而拍击式均质器对真菌的回收率为83.3%-102%，相较之下旋刀式均质器要比拍击式均质器稍微低一些。

（二）对检测结果的简单分析

我们对40批药品用拍击式均质器和旋刀式均质器进行微生物检测结果利用统计学进行分析时，可以得出通过两种方法处理所得到的霉菌及酵母菌和菌落总数的相关系数分别是0.998和1.000，后经过配对t检验p值是我们得到的数据是：霉菌数为0.324，大于0.05，由这两数据我们可以得知两种方法差距不大。菌落总数的P值为0.035说明两种的方法的检测方法也是有差别的。综上所述，我们可以得到在微生物检测中，我们必须要根据样品的特性选择适宜的均质器来进行样品的试前处理。

（三）对蜜丸的微生物检验的分析

蜜丸的粘性较大，用拍击式均质器可以使蜜丸逐渐分散在稀释液当中，形成较为均匀的供试液，而使用旋刀式均质器的时候蜜丸很容易粘在刀片上，不易均质，如槐角丸、明目地黄丸，根据测出的数据也可以得出旋刀式均质器检出率较低。

（四）对水丸的微生物检验的分析

水丸的硬度相对较大，用拍击式均质器时，易损坏均质袋，而旋刀式均质器能够快速将水丸均匀的打碎，由此可见在水丸的微生物检验时我们需要用旋刀式均质器。

（五）对胶囊剂的微生物检验的分析

在进行胶囊试剂的检测时需要先加入45℃左右的稀释剂软化胶囊使胶囊壳溶解之后再使用相应的均质器。

（六）对颗粒剂以及混合剂检验分析

颗粒是比较容易溶解的均质，两种均质器不会有太大的差别，所以使用两种其中的任一均质器都可以达到混合均匀的效果。

（七）对上述选择均质器作相应的总结

在进行微生物检验使用均质器设备供试液的时候，必须先对药品进行分析和归类，选用合适的均质器，这样才能提高微生物的检出率，确保实验结果的准确性。

总结：本文通过讲述用两种不同均质器进行的药品污染微生物回收率的试验，得到不同剂型的药品细菌的回收率有明显的差距的结果，因此在使用均质器的之前我们首先要分析一下药品的剂型然后再选择合适的均质器进行实验，否则会导致实验结果出现误差，从而影响我国的临床医学的发展，甚至会导致患者的生命安全受到威胁，这与中国现阶段所讲的要实现全面小康，就先实现全面健康不相符，所以我们需要更加注重试验的可考察性。

参考文献

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（作者单位：天津药物研究院药业有限责任公司）