六味地黄滴丸质量标准研究

车庆珍

【摘 要】本品由六味地黄软胶囊改变剂型而来。其提取工艺针对牡丹皮有效成分丹皮酚，山茱萸有效成分熊果酸、齐墩果酸等，茯苓有效成分为多糖，应用现代提取技术分别提取，制法合理。参照六味地黄软胶囊提取工艺，经工艺及滴丸成型工艺考察，最终制定本品制法。

【关键词】六味地黄滴丸；质量标准；熊果酸；丹皮酚

中图分类号： R286 文献标识码： A 文章编号： 2095-2457（2018）09-0228-001

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2018.09.110

Study on Quality Standard of Liuwei Dihuang Dripping Pills

CHE Qing-zhen

（Xuzhou Medical Higher Vocational School， Xuzhou， Jiangsu 221116， China）

【Abstract】This product comes from Liuweidihuang soft capsules. The extraction process is aimed at the effective components of Paeonia suffruticosa Paeonol， the effective components of hawthorn， ursolic acid and oleanolic acid， etc. The effective component of alfalfa is polysaccharide， which is extracted by modern extraction technology and the method is reasonable. With reference to the extraction process of Liuweidihuang soft capsule， the process and the dropping pill molding process were investigated to finally formulate the method of the product.

【Key words】Liuwei Dihuang Dripping Pill； Quality standard； Ursolic acid； Paeonol

1 薄层鉴别

1.1 熊果酸

（1）取本品5g加乙醚60回流提取4小时，放冷，滤过，滤液回收乙醚至干，残留物用石油醚（30～60℃）浸泡2次，每次15ml（浸泡约2分钟），倾去石油醚，残留物加甲醇2ml使溶解，上清液作为供试品溶液。另取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环已烷-氯仿-醋酸乙酯-冰醋酸（20：5：8：0.5）为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在110℃烘5～7分钟。因本品采用水溶性基质，对乙醚回流提取熊果酸有影响，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，斑点不明显。

（2）方法2：

加水20ml溶解，移至分液漏斗，加乙醚萃取三次（20ml、20ml、10ml），合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液。取不含山茱萸的阴性样品适量，同法制得阴性对照样品溶液。另取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录VIB）试验，吸取上述三种溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环已烷-氯仿-醋酸乙酯-冰醋酸（20：5：8：0.5）为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10%硫酸乙醇溶液，115℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相对应的位置上，显相同颜色的斑点。且斑点清晰，分离效果好，Rf值适中，重现性好，阴性对照在相应位置无干扰。因此，将本鉴别方法列入质量标准。

1.2 丹皮酚

1.2.1 方法1

取本品5g，加乙醚60ml回流提取1小时，滤过，滤液挥干，残渣加乙醚2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为供试品溶液。照薄层色谱法（附录VIB）试验，吸取供试品溶液10 ul，对照品溶液5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环已烷-醋酸乙酯（3：1）为展开剂，展开，取出，凉干，喷以盐酸酸性三氯化铁溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

因本品采用水溶性基质，对乙醚回流提取丹皮酚有影响，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，斑点不明显。

1.2.2 方法2

取鉴别1项其方法2供试品溶液为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为供试品溶液。取不含牡丹皮的阴性样品适量，同法制得阴性对照样品溶液。照薄层色谱法（附录VIB）试验，吸取供试品溶液对照品溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环已烷-醋酸乙酯（3：1）为展开剂，展开，取出，凉干，喷以盐酸酸性三氯化铁溶液，热风吹至斑点显色清晰。

上述试验在供试品色谱中，在与对照品色谱相对应的位置上，均显相同的颜色斑点。斑点分离效果好，显色清晰，重现性好，阴性无干扰。因此，将本鉴别方法列入质量标准。

2 含量测定

六味地黄丸是滋补肾阴的代表方，由熟地黄、山茱萸、山药、丹皮、茯苓、泽泻6味药组成，并可衍生出许多加减方。《中国药典》2015年版采用薄层扫描法测定山茱萸药材、六味地黄丸及其加减方中的熊果酸含量。中国中药杂志第27卷第8期丁晴等在HPLC法测定六味地黄丸及六味地黄胶囊中齐墩果酸、熊果酸的含量一文中用HPLC法同时测定六味地黄丸及六味地黄胶囊中的齐墩果酸与熊果酸含量。结果发现齐墩果酸与熊果酸难以液相分离。并且在短波长测定，溶剂存在较大干扰。故在质量标准中没有对熊果酸进行含量测定。

中国药典（2015年版）规定六味地黄丸中丹皮酚含量是其定量指标之一，定量准确、快速。因此参照上述文献方法，对六味地黄滴丸中丹皮酚进行测定，以控制制剂质量。

2.1 检测波长的选择

取丹皮酚对照品适量，以水配制合适浓度的溶液（约10ug/ml），在200～400nm范围内进行扫描。结果表明：在274nm波长处有较大的吸收，且陰性空白对测定无干扰，故选择检测波长为274nm。

2.2.1 仪器与试剂

仪器：岛津UV-2401PC紫外分光光度仪

FA1004精密天平

试剂：重蒸水 自制

2.2.2 对照及样品来源

对照品：丹皮酚对照品（中国药品生物制品检定所提供，批号0708-9704，供含量测定用）

样品： 批号：180314、180316、180318 自制

2.2.3 线性实验

精密称取丹皮酚对照品，用水配成0.1mg/ml （丹皮酚）的对照品溶液。精密吸取该液0.5ml，1.0ml，2.0ml，3.0ml，4.0ml，5.0ml，分别置50mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀。照分光光度法（附录VA），在274nm波长处测定吸收度，以浓度为横坐标， 吸收度为纵坐标，绘制标准曲线。结果见表1

回归方程为：丹皮酚Y=0.0858X-0.0055，r=0.9999

结果表明，丹皮酚在1.031～10.31μg/ml范围内吸收度与浓度呈良好的线性关系。方法简便，准确，可行。

参照中国药店典六味地黄软胶囊熊果酸及丹皮酚鉴别项进行鉴别，结果供试品色谱中，在与对照品色谱相对应的位置上，均显相同的颜色斑点。斑点分离效果好，显色清晰，重现性好，阴性无干扰。