液相色谱示差折光法测定无糖食品中8种糖和糖醇的含量

2018-07-26曹宁阳

农业科技与装备 2018年3期

曹宁阳，岑琴

（1.沈阳食品检验所，沈阳 110136；2.沈阳产品质量监督检验院，沈阳 110000）

糖醇作为糖的重要衍生物之一，具有甜度低、热值低的特点，对人体血糖值上升无影响，因而被广泛应用于无糖食品中。按照国际惯例，无糖食品是指不含蔗糖和淀粉糖，而必须含有作为食糖替代品的糖醇（木糖醇、山梨糖醇、麦芽糖醇、甘露醇等）的一类食品。GB13432-2004《预包装特殊膳食用食品标签通则》中对无糖食品的规定是，包括所有的单糖和双糖在内在固体和液体食品中的总含糖量低于0.5 g/100 g（100mL）。为此建立利用高效液相示差折光方法，对无糖食品中多种糖和糖醇进行测定。结果表明，此方法简单、准确，可作为无糖食品中糖及糖醇的定量分析方法。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

木糖醇（99.8%）、山梨糖醇（99.5%）、甘露糖醇（99.5%）、果糖（99.5%）、蔗糖（99.5%）均产自德国 Dr公司；赤藓醇（99.9%）产自安谱公司；阿拉伯醇（99.0%）和半乳糖醇（98.0%）产自 TRC 公司。

乙腈为色谱纯，水为去离子水，其它试剂均为分析纯。

供试样品为超市购买的无糖糕点、无糖麦麸粉、无糖饼干和无糖八宝粥。

1.2 仪器与设备

岛津LC20A高效液相色谱仪，配有示差检测器；HZF-A500电子天平（福州华志科学仪器有限公司）；KQ-250DB超声波发生器（昆山市超声仪器有限公司）；H2050R离心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司）。

1.3 试验方法

1.3.1 HPLC 色谱条件色谱柱：Thermo APS-2 HYPERSIL，250 mm×4.6 mm，5 μm；柱温：40 ℃；流速：1.2 mL/min；进样量：10 μL。流动相：乙腈∶水＝90∶10

1.3.2 标准溶液的配制分别准确称取糖及糖醇50 mg（精确至 0.1mg），置于 10 mL 容量瓶中，加入适量水溶解，定容，配置成 0.5 g/100mL的标准溶液。

1.3.3 样品前处理准确称取 2.5 g（精确到 0.001 g）试样于50 mL具塞离心管中，分别用水和80%乙腈水作为提取液进行提取。加提取液约10 mL，涡旋混匀，水浴超声 15 min，于 4 000 r/min离心 5 min，将提取液转移至25 mL容量瓶中；在残渣中加提取液10 mL重复提取一次，提取液转移至同一容量瓶中，用提取液定容至刻度，混匀。取上清液经0.45 μm微孔滤膜过滤，用高效液相色谱仪进行分析。

2 结果与分析

2.1 分离条件优化

采用 Thermo APS-2 HYPERSIL （250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以不同比例的乙腈水溶液流速作为流动相洗脱，在柱温40℃的条件下，采用不同流速优化最佳分离条件。

试验发现，以90%乙腈水溶液作洗脱液，流速1.2 mL/min，可使赤藓醇、木糖醇、阿拉伯醇、果糖、山梨糖醇、甘露醇、半乳糖醇、蔗糖这8种组分保持良好的分离度和峰形，详见图1。

图1 8种糖和糖醇液相分析色谱图Figure 1 Liquid chromatography of eight kinds of sugar and sugar glycol

2.2 方法的回收率和精密度

取同一空白样品6份，采用不同的前处理方法，分别添加3个浓度水平的8种糖和糖醇混合标准溶液，按优化后的条件进行测定。每个浓度平行测定6次，计算样品组分的回收率和精密度，结果见表1和表2。

表1 水提取液的回收率和精密度Table 1 Recovery and precision of water extraction solution /%

表2 80%乙腈水提取液的回收率和精密度Table 2 The recovery and precision of 80%acetonitrile water extraction solution /%

由表1和表2中的数据可见，水的提取效率更高，且8种糖和糖醇的回收率在92.9%～102.6%之间，精密度在0.98%～6.47%之间，具有良好的回收率和精密度。

2.3 阳性样品验证

用优化条件检测市售的无糖食品，同时按照GB/T 5009.140-2008 和 GB 5009.97-2016 的方法对无糖食品中的甜味剂安赛蜜和甜蜜素进行测定，结果见表3。

由表3可知：无糖食品中的木糖醇和山梨糖醇添加量较大，且有4种产品的含糖量超过了0.5%的国家标准，有3种产品含有甜味剂安赛蜜。

3 结论

采用氨基柱分离，在柱温40℃、90%乙腈水为流动相、流速1.2 mL/min的条件下，用高效液相色谱仪和示差检测器同时测定无糖食品中的赤藓醇、木糖醇、阿拉伯醇、山梨糖醇、甘露醇、半乳糖醇、果糖、蔗糖。试验结果表明，该方法前处理简单、灵敏度高、回收率（＞92.9%）和精密度（RSD＜6.47%）良好；在 40 min内完成8种糖和糖醇的分离，且结果比较理想。