紫外分光光度法测定大米中微量元素硒的含量

何娜

作为人体必需微量元素的一种，硒的氧化性极强，能为细胞提供保护，避免生物膜氧化损伤和体内脂质过氧化反应，也能清除、抑制生物体代谢产生的活性氧。本文以紫外分光光度法测定大米中硒含量，该方法步骤简单、选择性好、灵敏度高、干扰少。

材料与方法

材料。泰国香米、富硒大米及龙江县大米。

仪器与试剂。UVmini1240紫外可见分光光度计；凯氏烧瓶；HY5回旋式振荡器；pH213型酸度计。

5% EDTA溶液、0.2%邻苯二胺溶液、1000μg/mL硒标准溶液、10.0μg/mL硒标准储备液。上述试剂均为分析纯，水为去离子水。

方法。（1）样品处理。依次使用自来水、去离子水洗净米样品，随后以105℃鼓风持续2h干燥，放于粉碎机中磨碎，保存至干燥器，待用；称取样品10.0g，浸泡于30.0ml的水中2h，搅拌5～6次，过滤。用少量去离子水将残渣洗涤后混匀、过滤，合并提取液，转至50mL容量瓶内定容，待用；称取样品1.0g，加入高氯酸4.0mL、硝酸10.0mL，冷消化过夜，并于次日将溶液加热消化至澄清透明，冷却待用。

（2）硒含量测定。量取1.0mL硒标准溶液并定容至100mL，得到标准溶液。在5个125mL的分液漏斗中分别加入0.1、0.2、0.3、0.8、1.0mL标准溶液，随后加入25.0mL水，借助氨水及0.1mol/L的盐酸溶液将其pH调至2，加入2.0mL的1%邻苯二胺盐酸盐试液，振荡、静置，并在10.0mL甲苯加入后再次振蕩，静置15min，取甲苯层。同时以不含硒标准品的甲苯溶液做空白试验，在335nm处重复测定吸收度值，取平均值。

结果与讨论

实验条件的确定。邻苯二胺盐酸盐与Se（Ⅳ）可在酸性条件下形成络合物，而在紫外区该物质拥有335nm的最大吸收峰波长。

工作曲线的绘制。分别量取0.10、0.20、0.50、1.00mL的硒标准溶液（1g/mL），以样品测定步骤为根据对吸光度（A）进行测定，绘制下图1所示的标准工作曲线。回归方程为 Y=0.2975x+0.0020，r=0.9998。硒在0.01～0.1μg/mL的浓度范围内具有较好的时线性。

大米样品硒含量。以上述方法为依据测定三类大米内的硒含量，具体如下表1所示。结果显示，各类大米有着不同的硒含量，其中含量最低的为泰国香米0.033μg/g，最高的为富硒大米0.258μg/g。

精密度。量取5份硒标准溶液（0.5μg/ mL），根据上述方法平行进行5次测定，结果显示RSD为2.25%，该方法具有较好的精密度。

回收率。在1.000g的富硒大米样品中分别加入0.50mL、1.00、2.00硒标准溶液（1μg/ mL），采用同等于样品的条件进行预处理，根据上述方法对每个加标水平平行进行3次测定，结果如下表2所示，该方法加标回收率在98.5%～103.1%，平均回收率为101.4%。

以紫外分光光度法对几类大米硒含量进行测定，得到较为满意的结果。结果显示，富硒大米相对于其他大米而言，微量硒元素含量明显更高。几类大米硒含量在0.033～0.258之间，该方法操作简单，具有较高的灵敏度、实用性，操作费用低、干扰少。