中药川芎对Ⅰ型胶原蛋白含量表达的影响

正畸治疗是临床常见的治疗方式，且受多方面因素的影响，其临床应用率呈现升高的趋势，而治疗过程中的骨代谢变化明显，表现为破骨细胞和成骨细胞的相互作用与影响，因此成骨细胞在本类患者中的研究占比较高，而Ⅰ型胶原蛋白作为成骨细胞分泌生成的重要原胶原[1]，在正畸治疗过程中的作用明显，且其表达水平有助于了解成骨细胞的作用情况。中药川芎是临床中具有较强补骨强肾作用的中药，其对成骨细胞的影响研究不足。因此本研究就中药川芎对Ⅰ型胶原蛋白含量表达的影响进行探究，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 基本资料

以小鼠成骨细胞株MC3T3-E1为实验对象，以浓度1 μg/ml、5 μg/ml、10μg/ml、15 μg/ml、20 μg/ml的川芎提取液及西药干预作为观察组及对照组1组，并以α-MEM培养液干预为对照组2组。

1.2 方法

1.2.1 材料 盐酸川芎嗪标准品购自北京亿诺辉科技发展有限公司；小鼠成骨细胞株MC3T3-E1购自上海中科院细胞库；二甲基亚砜购自Sigma公司；胎牛血清购自杭州四季青公司；小鼠Ⅰ型胶原酶联免疫分析试剂盒购自上海岚派生物科技有限公司。

1.2.2 实验方法 首先将小鼠成骨细胞株MC3T3-E1进行培养，稳定二氧化碳（5%）水平二氧化碳培养箱中进行培养，温度为37℃，湿度在95%，培养液更换间隔时间为2.0 d，细胞汇合度至80%～90%时采用0.25%胰蛋白酶进行消化细胞处理，进行传代。盐酸川芎嗪标准品采用对倍稀释法处理，制备成浓度分别 为 1 μg/ml、5 μg/ml、10 μg/ml、15 μg/ml及 20 μg/ml的川芎药液，另制备重组人胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）100 ng/ml浓度药液，其中川芎组为观察组，IGF-Ⅰ组作为对照1组，另以α-MEM培养液加入的空白对照组作为对照2组，其中观察组与对照组1组均于干预24 h及48 h各检测1次，每次均设置5个复孔。采用小鼠Ⅰ型胶原酶联免疫分析试剂盒进行Ⅰ型胶原蛋白含量的检测。

1.3 统计学分析

本研究中的数据检验软件为SPSS20.0，计量资料的表示方式为（±s），两两比较进行t检验，重复测量的计量资料进行方差分析，检验水准α=0.05，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

干预后24 h及48 h观察组及对照组1组的Ⅰ型胶原蛋白含量表达均高于对照组2组，观察组则高于对照组1组，差异有统计学意义（P＜0.05），观察组浓度10 μg/ml的Ⅰ型胶原蛋白含量表达均高于其他浓度，差异有统计学意义（P＜0.05），详细比较见表1。

3 讨论

正畸治疗过程中的牙周组织变化及骨代谢状态均表现明显，因此临床中对于此方面的干预研究多见，而为达到有效促进牙齿的矫正及降低复发的目的，对于骨组织形成与改建的平衡与维持成为研究重点之一[2-4]。成骨细胞作为骨形成的主要功能细胞，其分泌的Ⅰ型胶原蛋白是骨代谢过程中的有效指标，在提高骨强度及保持骨架完整性方面均有突出的作用，因此提升Ⅰ型胶原蛋白的含量成为正畸治疗过程中的重要方面[5-9]。临床中关于中药川芎的研究多见，其强补骨强肾作用提示了本药对于骨代谢的影响作用，但是关于中药川芎对成骨细胞分泌Ⅰ型胶原蛋白的研究相对不足，因此对本方面的进一步细致研究十分必要。

本研究结果显示，浓度 1 μg/ml、5 μg/ml、10 μg/ml、15 μg/ml、20μg/ml的川芎提取液干预后24 h及48 hⅠ型胶原蛋白含量表达均高于IGF-Ⅰ及空白对照组，且浓度10 μg/ml川芎提取液干预后的Ⅰ型胶原蛋白含量表达均高于其他浓度，说明川芎提取液对成骨细胞的影响明显。这可能与中药川芎对成骨细胞的增殖促进作用有关[10-11]，并对成骨细胞分泌Ⅰ型胶原蛋白具有积极的调控作用，因此表现为表达水平的提升，进而在骨重建过程中提供了必要的基础条件[12]，同时也提示了中药川芎在正畸治疗中的应用可取性。

综上所述，中药川芎可有效促进Ⅰ型胶原蛋白含量的表达，以浓度10μg/ml相对更好。

表1 三组干预后24 h及48 h的Ⅰ型胶原蛋白含量表达情况比较

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