缺血型和出血型成年烟雾病患者MMP与VEGF的表达水平差异及其与病情程度的关系

杨学丽 严兴丽

烟雾病(moyamoya disease，MMD)是一组以双侧颈内动脉及其主要侧支内膜缓慢增厚，动脉管腔逐渐狭窄致闭塞，并伴有狭窄部位异常血管网形成为特征的脑底异常血管网病[1]。以短暂性脑缺血发作、脑梗死、自发性颅内出血为主要临床表现。基质金属蛋白酶-9(matrix metalloteinase-9，MMP-9)在体内多种生物学进程中发挥重要作用，在受损的心血管中和炎细胞中均可以高表达[2]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor ，VEGF)可促进MMP的表达，参与血管生成的生理和病理过程，促进新生血管形成，保护和营养神经[3-4]。目前研究主要集中在VEGF与MMP-9在急性脑出血和急性脑梗死中的作用机制，鲜有VEGF与MMP-9在MMD中的发生机制文献报道。本研究通过检测MMP-9与VEGF在MMD患者中的表达水平，探讨成人烟雾病患者脑缺血、脑出血事件发生与MMP和VEGF表达水平的关系。

1 对象与方法

1.1 临床对象 选取2014年1月-2017年1月于本院治疗的80例烟雾病患者，均≥18岁，经临床诊断、CT或脑血管造影确诊为成人烟雾病，符合《2012年新版烟雾病指南》，排除动脉粥样硬化、颅内肿瘤、头颅外伤、自身免疫性疾病引起烟雾样变化者。出血组34例，其中男16例，女18例，年龄29～67岁，平均年龄(44.31±5.81)岁；缺血组46例，其中男21例，女25例，年龄32～69岁，平均年龄(41.67±4.89)岁。同时选取同期在本院进行体检健康的60例作为对照组。3组患者在年龄、性别等临床资料方面无明显差异(P>0.05)，具有可比性。经医院伦理委员会批准，患者全部自愿签署知情同意书。

1.2 血清VEGF和MMP-9水平检测 出血型烟雾病和缺血型烟雾病患者发病后第1、5、10和15 d空腹抽取肘正中静脉血5 mL，静置30 min，然后4 ℃﹑离心取上层血清置冰箱待测。对照组采集血清1次，方法同上。采用酶联免疫法(enzyme-linked immunoassay，ELISA)检测血清VEGF 和MMP-9水平，操作过程按试剂盒说明书进行。比较3组患者的VEGF和MMP-9水平。根据病情进程，分别将出血型和缺血型烟雾病患者分成好转组和非好转组，比较2组的VEGF和MMP-9水平。VEGF、MMP-9试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司。采用美国GE公司LCE+型数字减影血管造影机进行颅内血管造影。按照烟雾病Suzuki分级分为6级。

2 结 果

2.1 3组患者的血清VEGF和MMP-9水平比较 成人烟雾病出血型和缺血型患者的VEGF和MMP-9水平均高于对照组(P<0.05)(表1)。

2.2 2组患者血清VEGF和MMP-9水平与Suzuki分级的关系 随着Suzuki分级的增加,2组患者的VEGF和MMP-9水平也相应增加，且有明显差异(P<0.05)(表2)。

2.3 2组患者血清VEGF和MMP-9水平与烟雾病病情发展的关系 根据病程进展将患者分为好转组和非好转组，在入院后第3 d比较2组患者血清VEGF和MMP-9水平，好转组的血清VEGF和MMP-9水平显著高于对照组。(表3)。

2.4 2组患者血清VEGF和MMP-9水平与烟雾病病情预后的关系 在入院后的第15 d，好转组的血清VEGF和MMP-9水平显著高于非好转组(P<0.05)(表4)。

3 讨 论

MMD是一种病因不明的慢性进行性脑血管疾病，主要表现为双侧颈内动脉虹吸部、大脑前动脉及大脑中动脉近端进行性狭窄或闭塞，同时伴有颅底、脑膜等一些细小血管代偿性增生而形成的异常新生毛细血管网，造影时显示似漂浮的烟雾[5-6]。分为管腔扩张、管壁相对壁薄的出血型和管壁增厚伴随管腔狭窄的缺血型[7]。

表1 3组患者的血清VEGF和MMP-9水平比较)

注:与对照组比较，*P<0.05

表2 2组患者血清VEGF和MMP-9水平与Suzuki分级的关系)

注：与Ⅴ级比较，*P<0.05

表3 好转组与非好转组患者入院后第3 d血清VEGF和MMP-9水平)

注：与非好转组比较，*P<0.05

表4 好转组与非好转组患者入院后第15 d血清VEGF和MMP-9水平)

注：与非好转组比较，*P<0.05

本研究结果显示，成人烟雾病出血型和缺血型患者的VEGF和MMP-9水平均高于对照组(P<0.05)，并且随着病情的程度加重，VEGF和MMP-9水平相应增高，表明脑梗死后MMP-9表达上调，破坏血脑屏障，加重脑水肿的同时增加了出血风险[8]。在缺血、缺氧状态下VEGF 的表达较明显，促进新生血管形成，侧支循环建立。MMP 能够降解脑血管基底膜和细胞外基质成分，通过蛋白水解作用参与血脑屏障的破坏、脑水肿和脑梗死后出血等多种病理生理过程[10]。出血型主要以Ⅲ、Ⅳ级为主，异常增生的烟雾状血管处于比较丰盛的时期[9]。VEGF和MMP-9可通过调节信号通路作用于神经细胞，调控神经细胞的修复在脑梗死的恢复中起重要作用[11]。高岩升等人研究显示，与健康对照组比较急性脑出血组各时点血清 VEGF 及 MMP-9水平均明显增高(P<0.05)[12]，这与本研究结果一致。

本研究好转组第3 d、第14 d的血清VEGF和MMP-9水平均低于非好转组，提示VEGF和MPP-9对于缺血型和出血型成年烟雾病患者病情评估和近期预后判断有一定作用。李曼等人研究显示，与对照组比较急性脑梗死患者第1、7和14 d血清VEGF 水平均明显高于对照组(P<0.01)，并且急性脑梗死患者大中梗死组和第1、7和第14 d VEGF水平均明显高于小梗死组(P<0.01)[13]。张皆德研究显示，烟雾病患者血清MMP-9水平显著高于健康成人(P<0.05)，而同时烟雾病颅内出血患者血清MMP-9水平显著高于颅内未出血患者(P<0.05)[14]。文献报道，在脑梗死患者中MMP-9的表达与VEGF表达呈现协同关系，MMP-9随着动脉粥样硬化的发展表达水平呈升高趋势，表达水平与内皮细胞受损程度呈现明显的相关性，发生脑梗死的可能性也增加[15]。

缺血型和出血型成年烟雾病均有可能导致患者暂时或永久性的神经损伤、认知功能障碍,严重者甚至死亡等,对患者的日常生活质量造成重大影响,本研究推测VEGF与MMP-9可作为烟雾病的早期筛查手段，并可用于病情评价、术后评价、预后评估及随访。

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