炎症性肠病患者尿sCD163水平检测及临床意义

刘　冬，王　晶，胡　翠，梅　俏，许建明

炎症性肠病(inflammatory bowel disease，IBD)是一种病因尚不十分清楚的慢性肠道炎症性疾病，包括克罗恩病(Crohn’s disease，CD)和溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)，有慢性和反复发作的临床特点，主要依靠临床表现、内镜和病理组织学诊断[1]。最直接的诊断和评估方法是内镜表现以及组织活检病理检查，胃肠镜检查常给患者带来不同程度的痛苦，具有一定侵入性，影响患者的依从性和检测频率。相关实验室检查如血沉(erythrocyte sedimentation rate ,ESR)、C反应蛋白(C-reactive protein ,CRP)等炎性指标虽可反映疾病的活动性，但不是特异性指标[2]，易受多种因素干扰，影响其在IBD诊断和病情评估中的的作用。因此，寻找反映IBD病情评估敏感、方便的生物标志物是目前IBD研究领域的热点之一。

研究表明IBD患者的肠道炎症反应中，肠道组织中巨噬细胞数量明显增加[3]，并参与IBD的病理生理过程， 在肠道巨噬细胞的标志物中，CD163作为巨噬细胞系-血红蛋白-珠蛋白清道夫受体，是巨噬细胞活化的特殊标记[4]。CD163被释放进循环的形式为可溶性CD163(soluble CD163，sCD163)，可从尿中排出，同时研究[5]表明尿液中sCD163浓度与巨噬细胞的活化功能和水平密切相关。巨噬细胞是作为体内重要的吞噬和抗原呈递细胞，对于维持肠道稳态具有重要意义[6]。IBD患者体内巨噬细胞功能常有不同程度改变[7]。该研究拟通过检测IBD患者尿液中sCD163水平的改变，探讨尿液中sCD163在IBD临床评估中的意义。

1　材料与方法

1.2尿液标本收集方法分别采集对照组和IBD患者入院后24 h内晨尿标本，加入防腐剂二甲苯，混合后离心抽取5 ml于-80 ℃保存待测。

1.3检测方法采用ELISA方法测定尿液sCD163水平。CD163 ELISA试剂盒购自美国R&D公司，采用美国Bio-Rad公司MD550酶标仪检测吸光度值，按照试剂盒说明书操作，使用标准品绘制标准曲线，对照标准曲线计算sCD163的表达水平。

2　结果

2.1IBD患者与对照组尿中sCD163水平的比较对照组尿液sCD163水平为(0.06±0.03)μg/ml，IBD组患者尿液sCD163水平为(0.26±0.013)μg/ml，CD组患者尿液sCD163水平为(0.57±0.24)μg/ml，UC组患者尿液sCD163水平为(0.06±0.03)μg/ml，分别与对照组尿液sCD163水平比较，均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2IBD患者尿液中sCD163水平与临床特征的关联分析

2.2.1UC患者尿液中sCD163水平与临床特征的关联分析UC患者缓解期尿液sCD163水平为(0.36±0.15)μg/ml，活动期轻度患者尿液sCD163水平为(0.24±0.08)μg/ml，中度患者尿液sCD163水平为(0.38±0.09)μg/ml，重度患者尿液sCD163水平为(0.54±0.05)μg /ml，均明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，但各组间未见明显差异(F=3.68,P=0.156)；按UC病变范围分析，E1型UC患者尿液sCD163水平为(0.35±0.13)μg/ml、E2型UC患者尿液sCD163水平为(0.36±0.13)μg/ml、E3型UC患者尿液sCD163水平为(0.32±0.15)μg/ml，均明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，但各组间未见明显差异(F=4.73,P=0.189)。

2.2.2CD患者尿液中sCD163水平与临床特征的关联分析CD患者缓解期尿液sCD163水平为(0.28±0.13)μg/ml，活动期轻度患者尿液sCD163水平为(0.26±0.12)μg/ml，中度患者尿液sCD163水平为(0.30±0.12)μg/ml，重度患者尿液中sCD163水平为(0.34±0.06)μg/ml，均明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，但各组间未见明显差异(F=4.12，P=0.167)。按CD病变部位分析，L1型CD患者尿液sCD163水平为(0.28±0.14)μg/ml、L2型CD患者尿液sCD163水平为(0.26±0.12)μg/ml，L3型UC患者尿液sCD163水平为(0.24±0.14)μg/ml，均明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，但各组间未见明显差异(F=4.24,P=0.085)。按CD疾病行为分析，B1型CD患者尿液sCD163水平为(0.22±0.12)μg/ml，B2型CD患者尿液sCD163水平为(0.35±0.13)μg/ml，B3型UC患者尿液sCD163水平为(0.22±0.13)μg/ml，均明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，且各组间比较差异有统计学意义(F=3.85,P=0.007)。

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2.3IBD患者尿液中sCD163水平与血CRP、ESR水平及Mayo评分相关分析CD患者尿液sCD163水平与CRP及CDA评分显著相关(P<0.05)；UC患者尿液sCD163水平与ESR、CRP及Mayo评分相关性不显著。见表1。

表1　IBD患者尿液中sCD163与血CRP、ESR及CDAI/Mayo评分的关联分析

表2　IBD患者治疗前后尿中sCD163水平改变的比较

3　讨论

研究[9]表明巨噬细胞在IBD病理生理机制中具有重要作用，肠道巨噬细胞接触大量细菌和抗原，作为机体免疫防御的重要屏障。病原体激活黏膜巨噬细胞产生促炎因子或趋化因子，释放白介素1、白介素6、白介素18、转化生长因子-β、肿瘤坏死因子-α等细胞因子，损伤肠黏膜屏障，促进IBD的发生发展[9]。巨噬细胞分为M1型亚群和M2型亚群，两种细胞分别具有促炎和抗炎作用。CD163分子量为130 ku，在M2型巨噬细胞表面特异性表达[10]，为巨噬细胞活化的标志物。因具有可溶性可存在于血浆内的CD163称为sCDl63。sCDl63包含CD163大部分胞外区域，与CD163具有相同的抗炎作用。在正常人的外周血中sCD163表达水平较低，sCD163表达与膜CD163表达成反比，在炎症信号的刺激下，膜CD163脱落成为sCD163，sCD163表达水平迅速升高，膜表面CD163表达降低[11]，研究[11]表明，CD163及sCD163水平与炎症性疾病密切相关。

sCD163水平对于IBD的评估具有重要意义。本研究表明，IBD患者的血液中CD163水平升高，局部肠道黏膜CD163表达明显高于对照组，但在UC及CD患者中无明显区别，因此，CD163在IBD患者肠道黏膜炎症过程中具有重要作用[12]。由于sCD163具有可溶性，存在于机体体液中，相比之下尿液更易获得，且完全无创并可以连续性收集，受体内不稳定因素干扰较小，尿液检测更为简便，容易为患者接受。另一方面由于肾小管的天然屏障，尿液中蛋白质组成复杂度降低，更容易观察某些低丰度蛋白的变化[13]。目前评估IBD疾病活动的方法主要包括ESR、CRP等炎症指标以及肠镜检查[14]，ESR、CRP等炎症指标存在灵敏度不足，特异性较差等缺点，肠镜检查等是侵入性检查方法，患者依从性较低，不利于常规监测。本研究表明，IBD组及CD、UC亚组患者尿液sCD163水平均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；由于患者组与对照组差异达4～8倍，具有一定的诊断价值。在临床关联分析中，尿液sCD163水平与CD组患者有明显相关性，特别是与CRP、是否活动期显著相关，而在UC组中相关性不明显，提示其CD发病机制及疾病进展有一定关系，并有一定的鉴别价值，IBD组及UC、CD亚组治疗前后对比，尿中sCD163水平均有所降低，差异具有统计学意义，提示其对于疗效预测有一定的临床应用价值；尿液中炎症标志物检测可成为一种简单、易行的评估IBD疾病活动的监测方式，有助于调整IBD治疗方案和判定疗效，且尿液检留取方便，患者依从性较好，因此监测尿sCD163水平，在IBD病情评估和疗效观察中具有一定的临床意义，由于本研究样本量有限，尿sCD163水平在IBD中的临床意义需要扩大样本量的临床研究证实。

参考文献