TCF7L2基因多态性与2型糖尿病相关性研究

史南平 李 剑 刘佳南

2型糖尿病是临床上较为常见的内分泌疾病之一[1-2]，其发病率较高，慢性进展，致死率及致残率均较高，其是一种以胰岛素抵抗、分泌缺陷为主要特征的多基因，遗传性疾病[3]。目前研究多集中在第5、6、12号染色体变异具有一定的相关性，但关于某一种基因的相关性研究报道则较少，研究也较为微弱。核转录因子7类似物2基因多态性与2型糖尿病具有一定的关联，目前相关研究提示，TCF7L2基因微卫星DG10S478与国内2型糖尿病发病具有一定的关联[4]，但具体病理机制尚不清楚。本研究探讨TCF7L2基因多态性与2型糖尿病相关性的研究，现汇报如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将我院2017年1月-2018年3月收治的186例2型糖尿病患者作为研究对象，并选择同期我院120例健康体检者作为对照组。入选标准：①患者均符合2型糖尿病的诊断标准患[5]；②均签署研究知情同意书；无糖尿病家族病史者；③近4周未服用影响血糖药物者；④无免疫性疾病者；⑤无精神异常者；⑥本研究经医院伦理委员会批准；⑦临床资料完整者；排除标准：①糖尿病家族病史者；②合并自身免疫系统疾病者；③未签署研究检查同意书；④精神异常者；⑤近4周服用影响血糖药物者；⑤临床资料缺失或失访者。

1.2 方法

①对入组研究患者进行详细的体格检查及病史采集，包括患者性别、年龄、病程、身高、血压、腰围等。②早晨对空腹患者静脉采血3～5ml测定患者血糖水平、胰岛素水平，并采集和测定胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)指数[6]；③TCF7L2基因微卫星多态性检查：对入选患者静脉采集外周血，提取DNA水平，具体引物如下：上游5’：TGGTGAAAACCCCAAATCG；下游3’：GGGAGACTGCTCAACTTATC；后对DNA样品进行PCR扩增，产物长度为135bp。采用ABI366测序仪器对扩增DNA片段进行具体的测序，并对数据进行统计分析。④采用稳态胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)评价青少年胰岛素抵抗情况，其值为空腹血糖x空腹胰岛素/22.5[7]；胰岛B细胞功能指数(HBCI)评价青少年胰岛素分泌情况,其值为空腹胰岛素x20/(空腹血糖-3.5)[7]。

1.4 观察项目

记录两组患者进行测序分型，后根据稳态模型评估患者胰岛素β细胞及胰岛素抵抗情况，并对2型糖尿病患者影响因素进行分析研究。

1.5 统计学分析

2 结果

2.1 两组患者一般临床资料及血脂、胰岛素功能的比较 2型糖尿病患者平均年龄高于对照组(P<0.05)；对两组患者年龄、性别校正后，2型糖尿病患者FPG、TG、TC、LDL、Lg HOMA-IR、腰围、收缩压显著高于对照组(P<0.05)，其HDL、IgBMI、LgHBCI水平低于对照组(P<0.05)，两组患者在臀围方面无统计学差异(P>0.05)；见表1。

组别例数(男/女)年龄腰围(cm)臀围(cm)收缩压(kpa)IgBMIFPG(mmol/L)TG(mmol/L)TC(mmol/L)LDL(mmol/L)HDL(mmol/L)LgHOMA-IRLgHBCI2型糖尿病98/8851.73±7.371)88.48±8.471)96.37±6.7417.47±3.251)4.21±0.471)8.46±0.851)2.13±0.461)4.65±0.651)2.98±0.461)1.21±0.231)0.57±0.121)1.57±0.461)对照组63/5745.43±5.2778.36±6.3796.53±6.7814.26±2.864.98±0.565.23±0.641.23±0.344.21±0.542.34±0.321.48±0.320.13±0.111.98±0.52t8.1211.200.248.8312.9735.6118.436.1710.818.5832.347.23P<0.05<0.05>0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05<0.05

注：与对照组比较，1)P<0.05。

2.3 零等位基因、非零等位基因在2型糖尿病患者间的比较 TCF7L2基因微卫星DGl0S478在糖尿病零等位基因和非零等位基因结果示：零等位基因LDL水平低于非零等位基因，而其Lg HBCI高于非零等位基因(P<0.05)，两组患者在其他项目间无统计学差异(P>0.05)；见表2。

组别例数年龄腰围(cm)臀围(cm)收缩压(kpa)IgBMIFPG(mmol/L)TG(mmol/L)TC(mmol/L)LDL(mmol/L)HDL(mmol/L)Lg HOMA-IRLg HBCI零等位基因16750.67±7.3286.38±8.5795.33±6.7516.53±3.534.01±0.537.53±0.561.89±0.634.36±0.652.25±0.571)1.26±0.260.47±0.131.67±0.541)非零等位基因1951.63±7.2785.56±8.6395.56±6.7316.56±3.864.08±0.567.43±0.651.94±0.744.39±0.592.64±0.561.28±0.320.46±0.131.41±0.45 t0.540.390.140.030.540.730.320.192.830.310.322.02 P>0.05>0.05>0.05>0.05>0.05>0.05>0.05>0.05<0.05>0.05>0.05<0.05

注：与非零等位基因比较，1)P<0.05

3 讨论

糖尿病是临床上威胁人类健康较为多见的慢性内分泌疾病之一，其发病率较高，严重影响患者生存质量及健康。目前关于糖尿病具体发病机制尚不完全清楚，其是因遗传、环境等多因素所致的疾病，其并非单一性疾病[8]。目前临床上关于氧化应激、慢性炎症、遗传等因素研究得到广泛的研究，关于2型糖尿病基因遗传方面的研究更为重要。TCF7L2是目前发现的2型糖尿病患者易感基因中相关性最强的的，其位于人类10q25.3染色体上[9]，可编码619个氨基酸，该基因功能与Wnt信号传导相关，但其在糖尿病发病机制尚不完全阐释清楚[10]。

本研究观察TCF7L2基因多态性与2型糖尿病相关性的研究。其结果显示：2型糖尿病FPG、TG、TC、LDL、Lg HOMA-IR、腰围、收缩压显著高于对照组(P<0.05)，其HDL、IgBMI、LgHBCI水平低于对照组(P<0.05)；发现6种等位基因、7种基因型， DGl0S478的非132等位基因在2型糖尿病组明显高于对照组，分别为5.5%和2.4%；其相对危险度为1.954；X/0基因型在2型糖尿病为9.7%，高于对照组，基因型相对危险度为1.846；等位基因x的人群特异危险度为1.748%；零等位基因LDL水平低于非零等位基因，而其Lg HBCI高于非零等位基因(P<0.05)；因此，TCF7L2基因微卫星DGl0S478可能与2型糖尿病发病相关，可能是通过降低胰岛素β细胞。笔者研究发现，2型糖尿病患者、收缩压血脂水平高于对照组，进而可提示2型糖尿病患者多合并高血压、血脂异常等，在临床上也与糖尿病临床特征相符合。此外研究也发现肥胖患者血脂异常也存在胰岛素抵抗、胰岛素高水平，这可能与胰岛素抵抗相关[11-12]。同时TC、TG、LDL等血脂长期异常，可引起高胰岛素水平，β细胞分泌功能持续亢进，最终β细胞功能降低或衰竭，胰岛素分泌不足，血糖升高。本研究结果也发现血脂异常、胰岛素抵抗、腰围、BMI是在一定程度上也参与糖尿病的发生，腹型肥胖者是糖耐量降低或恶化的关键病因，内脏脂肪型形成的游离脂肪酸肝脏静脉，导致高胰岛素症[13]，长期发展形成高血糖。同时笔者研究也发现Lg HOMA-IR高于对照组，LgHBCI水平低于对照组，继而说明胰岛素抵抗、β细胞功能减退是2型糖尿病发病的重要环节。目前相关学者研究结果显示[14]，TCF7L2基因变异与糖尿病胰岛素分泌功能减弱相关，其可通过Wnt信号途径调节胰升糖样肽分泌，胰升糖样肽即可促进胰岛素分泌，还可维持胰岛素β细胞分泌，并可抑制其凋亡[15]，若其合成减少则可引起血糖水平的升高。笔者研究发现，2型糖尿病患者中零等位基因LgHBCI水平高于非零等位基因，而胰岛素抵抗功能无明显差异，进而提示该基因变异可能通过胰岛素分泌而增加2型糖尿病的发病风险，而并非通过胰岛素抵抗而引起血糖异常。

综上所述，TCF7L2基因微卫星DGl0S478可能与2型糖尿病发病相关，可能是通过降低胰岛素β细胞。

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