口服补液盐Ⅲ治疗杯状病毒腹泻患儿临床回顾性研究*

向梅 熊励晶 谢晓丽 廖雪春 马小珍 欧小琴 杨静 蒋茂林

(1. 成都市妇女儿童中心医院儿童消化科，四川 成都 610091；2. 四川省疾病预防控制中心微生物检疫所，四川 成都 610041)

流行病学研究显示，在全球范围内人杯状病毒是导致人各个年龄段急性胃肠炎最主要的非细菌性病原体之一，婴幼儿是易感人群[1]。近年来我国杯状病毒性腹泻发生率呈上升趋势，人杯状病毒感染成为儿童腹泻的主要病原之一。

口服补液盐(ORS)的应用是公共卫生领域一大成就。2007年，我国开展的多中心随机双盲对照试验证实国产口服低渗补液盐III(Oral rehydration salts III, ORS III)，能够预防和治疗腹泻病造成的轻、中度脱水，并缓解腹泻、呕吐及脱水等症状[2]。2014年《欧洲儿童急性胃肠炎诊疗指南》将低渗口服补液盐作为儿童急性胃肠炎一线治疗方案[3]。低渗口服补液盐在轮状病毒肠炎治疗中的临床应用已得到证实[4]，但在杯状病毒中的应用尚无报道。现将ORSⅢ治疗杯状病毒腹泻住院患儿的安全性及有效性进行研究。

1 对象和方法

1.1 研究对象 收集我科2012年1月～2014年12月确诊为病毒腹泻1064例5岁以下住院患儿的入院24小时内粪便标本用于病毒检测。回顾检出人杯状病毒阳性患儿的临床治疗，并纳入研究。纳入标准：①根据《儿童腹泻病诊断治疗原则的专家共识》，诊断为急性腹泻病的0～5岁住院患儿。②粪便经RT-PCR检测明确为杯状病毒感染。③不伴有严重的脏器功能损害、肠道并发症。排除标准：①混合细菌感染。②严重脱水。③伴有严重脏器功能损害及并发症。

1.2 方法

1.2.1 材料与试剂 病毒RNA提取试剂盒来源于Promega公司Maxwell 16 Viral Total Nucleic Acid Purification Kit。逆转录试剂盒来源于SuperScript II Reverse Transcriptase Kit, Invitrogen公司。PCR反应试剂来源于Promega公司Go Taq Green Master Mix。RT-PCR反应使用Bio-Rad C1000 PCR仪进行。PCR反应产物使用QIAGEN公司QIAxcel自动核酸电泳仪进行检测。

1.2.2 人类杯状病毒的检测 粪便标本加入PBS，经震荡、离心后制成10%大便标本悬液备用。按试剂盒说明提取病毒RNA。采用RT-PCR方法检测人杯状病毒。人杯状病毒RT-PCR引物，见表1。

表1 人杯状病毒RT-PCR引物Table 1 Primer of RT-PCR for detecting human calicivirus

1.2.3 研究分组 将纳入研究的杯状病毒腹泻住院患儿分为年龄、性别、入院前腹泻情况(腹泻次数、腹泻天数、脱水程度)相匹配的两组。A组使用口服补液盐III，B组不使用口服补液盐Ⅲ，而以静脉补液纠正脱水，家长可喂服除口服补液盐以外的其他液体，但不包括自行研制的糖盐水。其余治疗两组相同，包括蒙脱石、消旋卡多曲、益生菌。收集两组患儿腹泻情况、脱水纠正情况、24小时静脉输液量、住院时间、治疗前后血钾、血钠浓度、有无并发症及过敏等数据。

1.3 统计学分析 统计学分析使用Stata 12.0软件及SPSS 22.0软件完成。分类资料采用卡方(Chi-square)检验或Fisher确切检验进行统计分析。正态分布的连续变量以平均值±方差表示，并采用t检验进行统计分析；非正态分布的连续变量则以中位数方式表示，统计分析选用Mann-Whitney非参数检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 杯状病毒流行特点 2012～2014年我院确诊病毒性腹泻住院患儿共1064例，其中检出杯状病毒感染267例，男性患儿169例(63.3%)，女性患儿98例(36.7%)，以6～11月龄患儿所占比例最大135例(50.6%)。2012～2014每年的杯状病毒感染检出率分别为28.4%(93/328)、21.6%(100/463)、27.1%(74/273)。

2.2 纳入研究资料 将检出的267例杯状病毒腹泻患儿纳入研究141例，男性患儿91例，女性患儿50例，年龄1～59月。A组采用ORSⅢ治疗的患儿组67人，B组未使用ORSIII组74人，两组患儿年龄、性别差异无统计学意义。所有患儿均为杯状病毒感染伴有轻度脱水，伴有电解质紊乱共计33例，其中低钾血症19例，低钠血症14例。两组患儿在入院前的腹泻天数、腹泻次数差异无统计学意义。

2.3 两组患儿临床症状缓解及临床结局比较 纳入的杯状病毒腹泻住院患儿平均住院日为(6±1.02)天，服用ORSIII患儿无过敏等不良反应发生。比较使用ORSIII对杯状病毒腹泻住院患儿临床症状缓解与住院时间的影响。两组患儿腹泻缓解时间、脱水纠正时间、入院24小时静脉输液量差异有统计学意义(P<0.05)，其中使用ORSⅢ(A组)后，脱水纠正时间明显缩短，且入院后24小时静脉输液量明显减少。两组患儿血钠浓度差异有统计学意义(P<0.05)，使用ORSIII组患儿血钠浓度较未使用患儿高，但仍在正常范围内，未发生高钠血症。两组患儿血钾浓度及住院时间差异无统计学意义，见表2。

表2 两组杯状病毒腹泻住院患儿临床症状缓解和结局比较Table 2 Clinical symptom remission in applying ORS III in inpatient children infected with human calicivirus

注：①非正态分布的连续变量采用Mann-Whitney U检验,以中位数(分布)表示；②性别采用Pearson卡方检验，检验值取Pearson卡方值；符合正态分布的连续变量采用t检验，检验值取T值；不符合正态分布的连续变量采用U检验，无检验值。

3 讨论

病毒性腹泻是引起婴幼儿急性腹泻的主要原因。其中轮状病毒感染是占病毒性腹泻的首位，但近年来，随着轮状病毒疫苗的普及，轮状病毒感染在逐年降低，而杯状病毒感染在逐年增加[3]。Ahmed等[5]利用Meta分析统计得出全世界范围内诺如病毒的感染率为18%(95%CI：17%～20%)。我国长春、北京、河北卢龙、兰州、昆明等13个地区1999～2005年5岁以下腹泻患儿HuCV检测阳性率为19%(8.3%～38.6%)[6-9]，高于世界平均水平。四川周边的昆明地区2014年7月至2015年6月腹泻儿童杯状病毒检出率为10.59%[10]。

我们的检测数据提示，在成都地区杯状病毒已成为5岁以下婴幼儿腹泻的主要病原体，高于全国平均水平。由于人杯状病毒具有较强的变异性和快速传播能力[11-12]，所以需要引起我们的高度重视，加强防控措施。杯状病毒感染部位主要位于空肠，尽管目前杯状病毒导致腹泻的机制尚未完全阐明[13]，但杯状病毒可引起水样便与呕吐，从而导致不同程度的脱水和低钠血症，因此对症治疗尤为重要。

上世纪80年代临床研究结果提示将标准口服补液盐改为低渗配方口服补液盐治疗婴幼儿急性腹泻病[14-17]，随后在发达国家及发展中国家的多中心临床试验结果证明了低渗补液盐对于减少腹泻次数、腹泻量，缩短疗程，减少静脉输液量的有效性[18-19]。我们研究纳入住院患儿中，杯状病毒感染患儿以轻度脱水为主，中-重度脱水少见。ORSIII作为目前有效地纠正轻度脱水，预防进一步脱水的安全手段，运用于住院患儿的治疗中[20]。我们的结果提示，住院患儿加用ORS-III后虽不能明显的缩短总住院时间，但可以明显的缩短脱水纠正时间以及腹泻病程，减少静脉输液量，证实了ORS-III在杯状病毒腹泻住院患儿中使用的有效性。

ORS-III目前分为WHO配方和ESPGHAN配方，其区别为钠浓度的不同。我们研究中使用的ORS-III为WHO配方，Na浓度为75mmol/L。我们的研究结果显示，使用ORS-III的住院患儿血钠浓度高于未使用ORS组，但并没有高钠血症发生，故临床使用的安全性能够得到保证。近年来ESPGHAN建议使用的低渗低钠ORS，其基础与临床研究提示对于普通腹泻患儿，用60mmol/L钠浓度的ORS-III，在平衡钠离子丢失量的同时，相较于75mmol/L钠浓度，能显著增加小肠对水、钠和葡萄糖的吸收，并且能更好地减少高钠血症的发生风险。因此，相对于Na浓度为75mmol/L的WHO配方，Na浓度为60mmol/L的ORS可能更适合。目前国内暂无针对WHO配方和ESPGHAN配方的大样本量临床对照试验研究。因此未来还需要更多的数据验证低渗的ESPGHAN配方的临床有效性和安全性。

4 结论

本文资料显示，杯状病毒已成为成都地区婴幼儿腹泻的主要病原菌，口服补液盐III治疗杯状病毒腹泻，能够帮助患者快速缓解临床症状、及时纠正脱水、减少输液量，是治疗杯状病毒腹泻安全有效的方法之一。

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