柴胡皂苷A对内毒素诱导子痫前期大鼠模型的影响

杨永康，张淼芳，杨 静，张 婷

(陕西中医药大学第二附属医院，陕西 咸阳 712000)

子痫前期是一种妊娠期特发疾病，虽然发病率不高，却严重影响孕妇及胎儿的健康。母体、胎盘及胎儿等诸多因素都有可能参与子痫前期的发生，而氧化应激以及炎症反应作为子痫前期发病的重要潜在因素近年来受到学者的广泛关注，如何通过抑制氧化应激以及炎症反应减少子痫前期的发生是目前研究的热点[1-3]。柴胡皂苷A(SSA)是中药柴胡的主要提取物，其能够抑制氧化应激反应，抑制内毒素(LPS)诱导的炎症反应，降低LPS的动物毒性作用[4-6]；能够调节机体的免疫功能，而对免疫细胞功能的调节是其潜在的机制[7-8]。本研究观察了SSA对LPS诱导子痫前期大鼠模型的影响，旨在为子痫前期的预防治疗提供更多依据。

1 实验资料

1.1实验动物 40只10周龄雌性SD大鼠，购买并饲养于西安交通大学医学部动物中心，动物合格证号：SCXK2007-001。

1.2实验方法 试验方案通过陕西中医药大学及西安交通大学动物伦理委员会审核并批准。待雌性大鼠处于发情期时，与同处发情期健壮雄性SD大鼠1∶1配对过夜。次日检测雌鼠阴道精子作为受孕成功的标志，记录为受孕第1天。40只雌性大鼠中共计受孕33只，将33只受孕大鼠按完全随机法分成空白组、LPS组和LPS+SSA组，每组11只。受孕第5天，测每只受孕鼠体质量与血压。自受孕第5天始，空白组尾静脉注射2 mL生理盐水，LPS组尾静脉注射0.5 mg/kg LPS(购自美国Sigma公司)溶液2 mL，LPS+SSA组尾静脉注射0.5 mg/kg LPS和20 mg/kg SSA(购自美国Sigma公司)混合溶液2 mL，均1次/d，至受孕第18天。

1.3检测指标 ①注射结束后，使用尾套法测量各组孕鼠8:00—10:00收缩压和舒张压，测血压前先将孕鼠置于38 ℃环境中，待大鼠适应环境后每只孕鼠连续监测血压15次，连续3次血压值差异在6 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)内记录为有效血压。②收集干预最后一天20:00—10:00每只孕鼠的总尿液，收集前将孕鼠置于独立的代谢笼中，期间禁食。③测量每只孕鼠体质量，之后腹腔注射10%水合氯醛3 mL/kg麻醉孕鼠，手术分离子鼠并测量每只子鼠体质量。孕鼠体质量变化计算公式：体质量变化=受孕第18天体质量-子鼠体质量-受孕第5天体质量。

1.4统计学方法 所有实验数据使用Photoshop 5.0作图，采用SPSS 22.0统计软件、以单因素方差法对实验结果进行统计分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1各组孕鼠血压比较 LPS组收缩压和舒张压均明显高于空白组(P均<0.05)，提示子痫前期模型建立成功；LPS+SSA组收缩压和舒张压均明显低于LPS组(P均<0.05)，与空白组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。见图1及图2。

图1 各组孕鼠收缩压比较

2.2各组孕鼠尿蛋白量比较 LPS组尿蛋白量明显高于空白组(P<0.05)，而LPS+SSA组尿蛋白量明显低于LPS组(P<0.05)，与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见图3。

图2 各组孕鼠舒张压比较

图3 各组孕鼠尿蛋白量比较

2.3各组孕鼠及子鼠体质量比较 3组间孕鼠体质量变化比较差异均无统计学意义(P均>0.05)，见图4；LPS组子鼠体质量明显低于空白组(P<0.05)，LPS+SSA组子鼠体质量明显高于LPS组(P<0.05)，与空白组比较差异无统计学意义(P>0.05)，见图5。

图4 各组孕鼠体质量变化比较

图5 各组子鼠体质量比较

3 讨 论

LPS诱导的子痫前期大鼠模型因为操作简便，造模成功率高而广泛用于子痫前期的研究。虽然炎症并不是子痫前期发生的唯一原因，而且LPS诱导的子痫前期模型仅能够表现出部分子痫前期表型，但此模型对于研究子痫前期中异常炎症反应与炎症信号的传导与转化机制具有重要意义[9-10]。本研究发现LPS诱导后孕鼠收缩压、舒张压、尿蛋白量均明显升高，子鼠体质量明显降低，提示子痫前期模型建立成功。

中药柴胡具有抗炎、止痛及清热的药效，广泛用于临床。SSA作为柴胡的主要提取物，其能够通过抑制ERK/NF-κB信号通路，显著下调IL-1β、IL-6和TNF-α等炎性因子的表达，抑制炎症反应[11-13]；其还能够调节烟酸、烟酰胺以及花生四烯酸代谢，具有明确的抑制炎症的潜在分子基础[14]。但SSA是否能够通过抑制炎症抑制子痫前期的发生目前并不清楚。

本研究结果发现，LPS+SSA组孕鼠血压及尿蛋白量均明显低于LPS组，而子鼠体质量明显高于LPS组，且均与空白组相近； 3组间孕鼠体质量变化比较差异均无统计学意义。提示LPS造模对母体无明显影响，但显著影响胎鼠的生长与发育，而SSA能够抑制LPS诱导的血压及尿蛋白升高，抑制子痫前期的发生，为将来SSA应用于临床预防或治疗子痫前期提供了理论基础。但SSA是如何抑制LPS所诱导的子痫前期的发生尚不清楚，有待后续进一步研究。

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