杀虫单和杀虫双联合使用对草鱼车轮虫病的防治效果

董亚萍 孙晶 胡鲲 杨先乐

摘要 [目的]研究杀虫单和杀虫双联合使用对草鱼车轮虫病的防治效果。[方法]将杀虫单和杀虫双与环烷酸铜、氯化钠、壬基酚聚氧乙烯醚、聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯、十二烷基硫酸钠、壬基酚聚氧乙烯醚硫酸钠、月桂氮酮按不同比例联合配比，用甲醇和水将其充分混合后制成液体药物，观察其对草鱼车轮虫的杀虫效果。[结果]当杀虫单和杀虫双的含量分别为15.5%和34.0%时，按10 mg/mL的剂量对车轮虫作用24 h后其杀虫效果达100%，并且在不同用药浓度下其混合药物的杀虫效果要显著高于其他组。[结论]将杀虫单和杀虫双2种药物联合使用可以达到最佳的杀虫效果，研究结果可为水产养殖中寄生虫病的防治提供用药参考。

关键词 杀虫单；杀虫双；草鱼；车轮虫

中图分类号 S941.5 文献标识码

A 文章编号 0517-6611（2018）13-0088-02

Study on Control Effect of Combined Use of Monosultap and Dimehypo on Trichodiniasis of Grass Carp

DONG Yaping1，2，3，SUN Jing1，2，3，HU Kun1，2，3 et al

（1.National Pathogen Collection Centre for Aquatic Animals，Shanghai Ocean University，Shanghai 201306；2.National Demonstration Center for Experimental Fisheries Science Education，Shanghai Ocean University，Shanghai 201306；3.Shanghai Collaborative Innovation Center for Aquatic Animal Genetics and Breeding，Shanghai Ocean University，Shanghai 201306）

Abstract [Objective] To study the control effects of combined use of monosultap and dimehypo on trichodiniasis of grass carp.[Method] Monosultap and dimehypo were mixed with copper naphthenate，sodium chloride，nonylphenol polyoxyethylene ether，polyoxyethylene sorbitan monooleate，sodium dodecyl sulfate，nonylphenol polyoxyethylene ether sodium sulfate and ldodecylazacycloheptan2one in different mixing proportions to prepare liquid drugs after they were fully mixed with methanol and water.And their insecticidal effect on Trichodina sp.in grass carp was observed.[Result] When the contents of monosultap and dimehypo were 15.5% and 34.0% respectively，the insecticidal effect reached 100% after they were conducted on Trichodina sp.at a dose of 10 mg/mL 24 h.The insecticidal effect of mixed drugs at different concentrations was significantly higher than that in other groups.[Conclusion] The combined use of monosultap and dimehypo could achieve the best insecticidal effect，and the research could provide medication reference for the prevention and control of parasitosis in aquaculture.

Key words Monosultap；Dimehypo；Grass carp；Trichodina sp.

我國是水产养殖大国，水产动物寄生虫病是影响水产养殖业经济效益的重要因素之一[1]，而寄生虫疾病是危害淡水鱼类较为严重的疾病之一[2]，其中危害较大的水产动物寄生虫有车轮虫、指环虫等。小车轮虫属共有11种寄生虫，其中我国发现5种[3-5]。车轮虫和指环虫可寄生在淡水、海水的各种鱼类，主要寄生在鱼的体表、鳃（丝）上[6]，严重时甚至会导致宿主寄生部位发生病变。当车轮虫或车轮虫与指环虫同时在鱼体皮肤和鳃丝上大量寄生时，不仅会破坏其组织，而且会严重影响鱼类的正常呼吸，甚至引起死亡。车轮虫主要危及鱼苗，同时也容易感染越冬时期和繁殖季节的鱼体[7]，给水产养殖业造成巨大的经济损失。

杀虫单和杀虫双对水生动物及人畜均没有危害，具有杀虫效果好、价格低廉等优点。其中，杀虫单要比杀虫双的杀虫效果好[8]。随着杀虫单或杀虫双在水产养殖中寄生虫疾病中的大量使用，其单独使用的杀虫效果也有所减弱。为增强杀虫剂的效果，降低药物残留，控制耐药风险，笔者研究了杀虫单和杀虫双联合使用对草鱼车轮虫病的防治效果，旨在为水产养殖中车轮虫等原虫引发的疾病提供用药参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物。患有车轮虫病的草鱼400尾，平均体质量（20±5）g，病鱼黑瘦、不摄食，鱼的鳃和嘴周围呈微白色，鳃部黏液较多，鳃丝镜检可发现大量车轮虫寄生（18～25个/尾），虫体较小。将试验用鱼置于4 L玻璃容器中，24 h增氧，pH 7.0～7.4。在试验前暂养15 d。每天投喂2次饲料，参考NRC营养标准配制饲料。

1.1.2 试剂。杀虫单（CAS：29547-00-0）和杀虫双（CAS：52207-48-4）购自北京市教科生物技术有限公司；环烷酸铜、氯化钠、壬基酚聚氧乙烯醚、聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯、十二烷基硫酸钠、壬基酚聚氧乙烯醚硫酸钠、月桂氮酮、甲醇均购于国药化学试剂有限公司。

1.1.3 仪器与耗材。光学显微镜、量筒，蒸馏水、玻璃棒、养殖箱等。

1.2 方法 各组杀虫单、杀虫双、环烷酸铜、氯化钠、壬基酚聚氧乙烯醚、聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯、十二烷基硫酸钠、壬基酚聚氧乙烯醚硫酸钠、月桂氮酮、甲醇和水按不同的比例配制（表1），每组20尾草鱼，按6、10、12 mg/L的浓度分别泼洒到各组中进行试验。分别在6、12、24 h和7 d后取活体鱼的鳃丝和体表黏液，制成切片，在40～160倍显微镜下观察单个视野中车轮虫的存活情况。

1.3 数据分析 杀虫率为20%～30%的药物浓度为最低有效浓度；在鱼未中毒且达到最高杀虫率时的药物浓度为最佳杀虫浓度。按照以下公式计算杀虫率：杀虫率=（用药前车轮虫的平均存活数量-用药之后车轮虫的平均存活数量）/用药前车轮虫的平均存活数量×100%。

2 结果与分析

不同比例的药物在不同浓度下作用6、12、24 h后，使用显微镜观察车轮虫活体数量。与对照组相比，用药组在不同药物浓度下随着时间的增加，其剩余活体虫的数量逐渐减少。根据用药前后的虫体活体数量，计算出不同药物在不同时间的杀虫率。从图1可以看出，与其他组相比，24 h后，当浓度为10 mg/mL时组④的杀虫率达100%，且组④在不同药物浓度的杀虫率也明显高于其他组。对照组中车轮虫虫体数量随着时间的增加呈现增长状态，虫体在没有用药的情况下，虫体呈正常游动状态，而各用药组的虫体游动异常或游动缓慢。由此可见，无用药组的虫体是不断生长和繁殖的。

3 讨论与结论

近年来，水产动物寄生虫病害问题有增无减，几种病并发的状况也时有发生[9]，目前对车轮虫病的防治方法仍然以药物防治为主[10-11]，生产实践中运用各种防治寄生虫病的药物不仅增加了防治难度，而且药物使用安全问题也日益突出。 水产养殖中对寄生虫防治的常用药物有消毒剂类、抗微生物类、微生态制剂类、抗寄生虫类、农药类等9类[12-15]，其中有机磷类农药在我国农药产量的占比中高达50%[16-17]。在使用过程中仅有少部分的药物通过乙酰胆碱酯酶（AChE）等引起神经传导紊乱[10-11，18]，作用于动物的靶细胞达到杀虫效果，但大部分会转至土壤、水环境等。

在水产养殖中过量使用含磷类杀虫药物不仅对水生动物有高毒性，而且还会造成水体污染，引起水生生物体内药物残留超标或急性危害。汪安泰等[19]研究了硫酸铜、亚甲基蓝以及中性红对车轮虫的防治效果，结果发现硫酸铜相比于后两者对原虫的杀灭作用要强，产生的毒性较高。高莉霞等[20]研究了福尔马林、硫酸铜及硫酸亚铁等消毒剂对车轮虫和斜管虫的防治作用，结果发现福尔马林的防治效果显著高于其他2种，并且安全浓度为2 mg/L，在实际生产中的用量可能会高于此浓度。但药物的不恰当使用会引起水产动物正常组织损伤，也在不同程度影响其免疫功能[21]，同时也会产生耐药性。药物的联合使用可以最大程度地发挥单种药物的作用，也可以降低药物的使用量，较少药物残留，降低耐药风险。

杀虫单和杀虫双均具有很强的触杀、胃毒以及内吸传导作用。该试验中当杀虫单与杀虫双的比例为15.5∶34.0时杀虫效果最优，并且添加1.2%的环烷酸铜作为渗透和杀菌剂、6.5%的无机盐氯化钠，分别添加1.5%和1.0%的壬基酚聚氧乙烯醚和聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯作非离子表明活性剂、十二烷基硫酸钠和壬基酚聚氧乙烯醚硫酸钠作为阴离子表面活性剂添加量分别为0.5%和0.2%，月桂氮酮可以促进药物快速渗透到机体内，其添加量为0.8%。混合配制的杀虫药物溶液不仅具有杀虫效果，而且可以净化水质，降低药物对环境造成污染。研究结果可为水产养殖中车轮虫病防治提供用药参考。

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