血清乳酸脱氢酶在急性溶血性贫血诊断及疗效评估中的应用

王英 张亚南

1.衡水市哈励逊国际和平医院输血科；2.衡水市哈励逊国际和平医院老年病二科，河北衡水 053000

急性溶血性贫血（Acute hemolytic anemia，AHA）是由红细胞短时间内大量破坏引发的贫血，作为一种儿科常见疾病，AHA的持续进展可导致骨髓造血功能失代偿，甚至危及生命[1]。抗人球蛋白试验、Ham试验等溶血筛选试验价值已得到临床肯定，但其耗时久且仅为定性诊断，在评估治疗效果、指导治疗方案调整层面存在较大局限性[2]。乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase，LDH）是一种存在于组织内的糖酵解酶，红细胞膜、血红蛋白及红细胞酶异常均可导致LDH活性增高，并表现为血清浓度上升[3]，故LDH有望成为AHA的初步筛选指标，本研究观察LDH在AHA诊断及疗效评估中应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2014年8月至2017年5月参照第七版诸福棠实用儿科学确诊[4]的118例AHA患儿纳入AHA组，同时期100名体检儿童纳入对照组，两组既往均无溶血性贫血史。AHA组男73例，女45例，年龄6个月～12岁，平均（4.60±1.55）岁；对照组男64名，女36名，年龄8个月～14岁，平均（4.37±1.26）岁。两组受试儿童一般治疗比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。参照《血液病诊断及疗效标准》[5]，按照AHA患儿病情，再分轻度AHA组、中度AHA组、重度AHA组。

1.2 检测方法

抽取空腹肘静脉血2 mL，置于肝素抗凝管内，分离血清，使用AU5800全自动生化分析仪（美国Beckman Coulter公司），选用酶标比色法，检测血清LDH水平，正常参考范围为0～240 U/L[6]。使用GENS全自动血液分析仪（美国Beckman Coulter公司），测定血红蛋白（Hb）含量。

1.3 治疗方案

AHA组患儿口服甲泼尼龙，每日1次，每次4～6 mg/kg，1周后复查Hb，口服药物改为醋酸泼尼松，每日1次，每次1.0～1.5 mg/kg，持续5周。治疗期间持续监测血清Hb，若Hb处于正常范围，每周醋酸泼尼松较上周减量10%；同时常规预防糖皮质激素副作用，必要时根据病情输注红细胞悬液或洗涤红细胞[7]。

治疗后临床疗效评价：完全缓解：临床症状消失，血清胆红素、红细胞计数、网织红细胞比例及Hb均恢复正常，抗人球蛋白试验阴性；部分缓解：Hb＞80 g/L，网织红细胞比例＜0.05，血清总胆红素≤34 μmol/L，抗人球蛋白试验阴性或较治疗前效价下降[8]；无效：临床症状及实验室指标均未见明显改善，抗人球蛋白试验阳性。有效率=（完全缓解例数+部分缓解例数）/总例数×100%。

1.4 统计学分析

对本临床研究的所有数据采用SPSS18.0进行分析，性别、临床疗效等计数资料以（n/%）表示，并采用χ2检验，年龄、血清LDH及Hb等计量资料以（x±s）表示，并采用t检验或F检验，相关性分析采用Pearson法，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 受试儿童入组次日血清LDH及Hb水平比较

AHA患儿血清LDH水平均高于对照组，其血清Hb水平低于后者，随着患儿病情的进展，其血清LDH水平逐渐升高、血清Hb水平逐渐下降，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。Pearson相关性分析显示，血清LDH与Hb水平呈负相关（r=-0.693，P＜0.05）。

表1 各组入组日次血清LDH及Hb水平比较（x±s）

2.2 疗效评价结果

118例AHA患儿临床总有效率为81.36%（96/118），随着患儿病情的加重，其有效率逐渐下降，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

2.3 AHA组患儿治疗前后血清LDH及Hb水平变化

AHA组患儿治疗后血清LDH水平均较治疗前下降，完全缓解者血清LDH水平下降最为明显，其次为部分缓解者，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 不同疗效评价结果患儿治疗前后血清LDH水平比较（x±s）

3 讨论

人体红细胞的正常寿命大约为120 d，红细胞在自然衰老的过程中，可能因药物、感染等因素而出现提前破坏，造成红细胞动态平衡失衡，即骨髓产生的红细胞数量低于红细胞破坏数量，此时Hb浓度下降，溶血性贫血症状出现[9-10]。

除贫血症状外，AHA患儿还可出现巩膜黄染、肝脾增大、尿色变深等临床症状[11]，除了溶血筛查试验外， AHA患儿网织红细胞计数升高、骨髓红系增生活跃等病理生理改变的特异性有限，也无法作为AHA的早期筛查依据[12-13]。既往研究发现，在人为溶血试验中，Hb浓度为10 g/L、30 g/L、50 g/L时，血清LDH活性可出现明显的变化，故有学者认为血清LDH浓度对贫血性疾病的诊断具有一定价值[14]。

此次研究AHA患儿血清LDH水平均普遍高于240 U/L的正常上限，且随着患儿病情的加重，其血清LDH水平进一步上升，说明血清LDH检测有助于AHA的辅助诊断，其机制为：红细胞内LDH含量较高，红细胞破坏1%即可造成血清LDH浓度显著上升，故血清LDH水平能够较为灵敏地反映红细胞增殖、代谢和破坏情况[15]。虽然LDH升高也可见于急性心肌梗死、骨骼肌损伤、急性肝炎、白血病、恶性肿瘤等疾病，但在明确诱因及贫血状态的基础上，若患儿出现黄疸、血红蛋白尿、外周血网织红细胞升高等表现，则不难判断血清LDH升高是由AHA所致[16]。

在了解LDH对于AHA辅助诊断价值的基础上，本研究也对AHA患儿治疗前后血清LDH水平变化进行了观察，结果显示，患儿治疗后LDH下降程度与治疗效果具有密切关联，且血清LDH水平与Hb水平存在负相关性，说明监测血清LDH水平变化对于AHA疗效评估也有着一定价值。作为AHA治疗的常用药物，糖皮质激素的作用机制包括封闭体内抗红细胞抗体、溶解淋巴细胞、抑制单核细胞-巨噬细胞上的IgG及C3受体趋化作用，从而抑制引起溶血的免疫反应、促进红细胞表面IgG的脱落、减少红细胞的吞噬破坏[17]。然而，并不是所有的患儿均可自糖皮质激素治疗中获益[18]。

综上所述，AHA患儿血清LDH普遍升高，且LDH的升高伴随着病情的加重与Hb含量的下降，在检测血清LDH的基础上，结合临床表现及实验室指标有望为AHA的早期筛查与诊断提供参考，同时，监测AHA患儿血清LDH水平变化，可评估治疗效果、指导治疗方案的调整。

[1] AUGOFF K, HRYNIEWICZ-JANKOWSKA A, TABOLA R.Lactate dehydrogenase 5： an old friend and a new hope in the war on cancer[J]. Cancer Lett, 2015, 358(1)： 1-7.

[2] MECABO G, YAMAMOTO M, BIASSI T P, et al. Lactate dehydrogenase isoenzyme 3 and hemolysis in sickle cell anemia：a possible correlation?[J]. Blood, 2015, 125(24)： 3821-3822.

[3] 王静, 李亚蕊, 郝国平. 研究乳酸脱氢酶在小儿贫血中的变化及诊断价值[J]. 中国医学创新, 2013(10)：31-32.

[4] FIUME L, MANERBA M, VETTRAINO M, et al. Inhibition of lactate dehydrogenase activity as an approach to cancer therapy[J]. Future Med Chem, 2014, 6(4)： 429-445.

[5] ITO T, AOSHIMA M, SUGIURA K, et al. Pustular psoriasislike lesions associated with hereditary lactate dehydrogenase M subunit def i ciency without interleukin-36 receptor antagonist mutation： long-term follow-up of two cases[J]. Br J Dermatol,2015, 172(6)： 1674-1676.

[6] BALLAS S K, JIALAL I, RASHIDI H H, et al. Clinical utility of lactate dehydrogenase in determining the severity of hemolysis in sickle cell anemia[J]. Am J Clin Pathol, 2015,144(1)： 173-174.

[7] XIE H, HANAI J, REN J G, et al. Targeting lactate dehydrogenase-a inhibits tumorigenesis and tumor progression in mouse models of lung cancer and impacts tumor-initiating cells[J]. Cell Metab, 2014, 19(5)： 795-809.

[8] CETIN B, AFSAR B, DEGER S M, et al. Association between hemoglobin, calcium, and lactate dehydrogenase variability and mortality among metastatic renal cell carcinoma[J]. Int Urol Nephrol, 2014, 46(6)： 1081-1087.

[9] 解飞, 洪萍, 周霖,等. 误诊为遗传性球形红细胞增多症的自身免疫性溶血性贫血[J]. 临床误诊误治, 2017, 30(4)：52-54.

[10] HUANG R, LI M, GREGORY R L. Nicotine promotes Streptococcus mutans extracellular polysaccharide synthesis,cell aggregation and overall lactate dehydrogenase activity[J].Arch Oral Biol, 2015, 60(8)： 1083-1090.

[11] MARKVARDSEN L H, CHRISTIANSEN I, HARBO T,et al. Hemolytic anemia following high dose intravenous immunoglobulin in patients with chronic neurological disorders[J]. Eur J Neurol, 2014, 21(1)： 147-152.

[12] DEUTSCH M, DOURAKIS S P, PAPANIKOLOPOULOS K,et al. Autoimmune hemolytic anemia in a patient with acute myelocytic leukemia[J]. Am J Hematol, 2003, 74(2)：147.

[13] BRIGHENTI E, CARNICELLI D, BRIGOTTI M, et al. The inhibition of lactate dehydrogenase A hinders the transcription of histone 2B gene independently from the block of aerobic glycolysis[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2017, 485(4)： 742-745.

[14] 田华, 王金波, 冯万周. LDH及sTfR在成人急性溶血性贫血中的意义[J]. 标记免疫分析与临床, 2016, 23(6)： 691-692.

[15] KHENG S, MUTH S, TAYLOR W R J, et al. Tolerability and safety of weekly primaquine against relapse of Plasmodium vivax in Cambodians with glucose-6-phosphate dehydrogenase def i ciency[J]. BMC Med, 2015, 13(1)： 203.

[16] CORNEC-LE GALL E, DELMAS Y, DE PARSCAU L, et al.Adult-onset eculizumab-resistant hemolytic uremic syndrome associated with cobalamin C def i ciency[J]. Am J Kidney Dis,2014, 63(1)： 119-123.

[17] LIU X, YANG Z, CHEN Z, et al. Effects of the suppression of lactate dehydrogenase A on the growth and invasion of human gastric cancer cells[J]. Oncol Rep, 2015, 33(1)： 157-162.

[18] KIM A, FUNG E, PARIKH S G, et al. Isocitrate treatment of acute anemia of inf l ammation in a mouse model[J]. Blood Cells Mol Dis, 2016, 56(1)： 31-36.