肝癌组织miR-196b表达变化及其与患者临床病理参数和预后的关系

温萍，陈盛铎

(湖北省中医院花园山院区，武汉430000)

microRNA(miRNA)是一类由内源基因编码、长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子。近年研究证实，miRNA通过调节癌基因或抑癌基因表达，调控细胞的增殖、分化、凋亡，从而促进肿瘤的发生、发展[1，2]。miR-196b是miRNA家族成员之一，在胃癌、结直肠癌、肺癌等多种恶性肿瘤组织中高表达，并且其高表达与患者预后不良有关，具有促癌基因作用[3]。本研究分析肝癌组织miR-196b表达变化及其表达与患者临床病理参数和预后的关系，探讨miR-196b在肝癌发生发展中的作用。

1　临床资料

1.1基本资料研究对象为2012年7月～2014年6月湖北省中医院花园山院区收治的首诊肝癌患者137例，男109例、女28例，年龄(57.98±10.33)岁。纳入标准：①年龄18～80岁；②经过病理检查、临床评估和影像学检查确诊为原发性肝细胞癌；③拟行肝癌切除手术，术前未行任何抗肿瘤治疗；④术后随访资料完整。排除标准：①继发转移性肝癌；②有肝移植史；③合并其他恶性肿瘤；④存在严重感染；⑤妊娠期或哺乳期妇女。肝功能Child-pugh分级：A级110例，B级27例；ECOG评分：0分90例，1分38例，2分5例，3分4例；相关病史：乙肝史109例，肝硬化史79例；肿瘤直径：≥5 cm 68例，<5 cm 69例；病灶数量：单发79例，多发58例；BCLC分期：A期59例，B期29例，C期31例；有静脉侵犯49例，无静脉侵犯88例。术后采用门诊或电话等方式随访，随访截止至2017年6月30日，随访时间30(1～60)个月，患者总体生存期(OS)为31(1～60)个月。本研究经湖北省中医院花园山院区医学伦理委员会批准，患者均知情同意。本研究统计学处理采用SPSS22.0统计软件。计量资料以M(P25～P75)表示，结果比较采用Wilcoxon秩和检验或Kruskal-WallisH秩和检验。生存分析采用Kaplan-Meier法，生存率比较采用Log Rank检验。P<0.05为差异有统计学意义。

1.2癌组织及其癌旁组织miR-196b表达情况取手术切除的肝癌组织及其配对的癌旁正常组织(距肿瘤边缘3～5 cm)，采用qRT-PCR法检测miR-196b表达，以U6为内参，采用2-ΔΔCt法计算miR-196b相对表达量。本组患者肝癌组织miR-196b相对表达量为1.853(1.173～4.706)，癌旁正常组织为1.032(0.451～1.886)，二者比较P<0.01。肝癌组织miR-196b相对表达量的中位数为1.853，以此为截断值，肝癌患者miR-196b高表达者69例、低表达者68例。

1.3肝癌组织miR-196b表达与患者临床病理特征的关系见表1。

表1　　　　肝癌组织miR-196b表达与患者临床病理参数的关系[M(P25～P75)]

1.4癌组织miR-196b表达与患者OS的关系69例miR-196b高表达者与68例低表达者OS分别为21(1～58)个月、40.5(4～60)个月，二者比较P<0.01。

2　讨论

研究证实， miRNA能通过与靶基因3′端非翻译序列结合促进靶基因降解或抑制目标mRNA翻译过程，从而抑制靶基因表达[4]；能通过调控AKT/ERK通路、上皮间质转化、促癌基因IGF-Ⅱ和IGF-IR表达以及神经白细胞素等调节肿瘤细胞的增殖、分化、调亡，影响肿瘤的发生、发展[5，6]。miR-196分为具有序列同源性的miR-196a和miR-196b，后者位于同源框蛋白(HOX)A9和HOXA10基因区间的一个高度进化的保守区域，定位于人类染色体7p15.2[7]。miR-196b在启动子甲基化不足时，可导致miR-196b在胃癌组织或胃癌细胞中过表达[8]； miR-196b高表达还可增加胃癌MKN28细胞的侵袭能力，其机制可能与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路有关[9]。Yu等[10]研究发现，miR-196b可通过HOXA9的异位表达诱导非小细胞肺癌细胞侵袭和迁移；miR-196b过表达可提高HOXA10基因的表达，从而促进胃癌细胞侵袭和迁移[11]。以上研究提示，miR-196b可通过调控多种通路或蛋白促进肿瘤细胞增殖并抑制其凋亡。本研究结果显示，肝癌组织miR-196b相对表达量明显高于癌旁正常组织；肝癌组织miR-196b相对表达量与肿瘤直径、静脉侵犯有关。提示miR-196b可能作为癌基因参与肝癌的发生、发展；miR-196b表达越高，肝癌细胞增殖、侵袭、转移能力越强，与既往研究[8～11]结果类似。

有研究发现，多种恶性肿瘤组织miR-196b表达与患者预后相关，miR-196b表达越高，患者预后越差[12，13]。Kanno等[14]分析了248例胰腺癌患者miRNA基因表达矩阵发现，在胰腺癌组织中miR-196b是上调幅度最大的miRNA，且其高表达与患者预后差有关。本研究结果显示，肝癌组织miR-196b高表达者中位OS明显低于miR-196b低表达者，说明miR-196b高表达与肝癌患者预后有关。其原因可能为miR-196b能通过调节多个靶基因，促进肿瘤细胞分化、增殖、迁移，进而影响肝癌患者病情。有研究发现，miR-196b表达下调可提高患者对5-氟尿嘧啶的化疗敏感性[15]。因此推测，miR-196高表达有可能降低肝癌化疗药物敏感性，继而导致患者预后不良。

综上所述， miRNA-196b可促进肝癌的发生及发展。本研究的不足为样本量较小、随访时间较短。

参考文献：

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