探讨儿童急性髓系白血病T细胞亚群及NK细胞的变化及临床价值

(郑州大学附属儿童医院 河南省儿童医院 郑州儿童医院，河南 郑州　450018)

儿童急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)是目前临床上常见的一种造血干细胞恶性肿瘤，该病在临床上发病率较高[1]。AML的发生与发展与患者体内的免疫功能紊乱有着密切的联系。细胞免疫在临床抗肿瘤治疗的免疫效应中的作用更为重要，而T细胞亚群和NK细胞是机体内执行细胞免疫的细胞，同时也是机体内抗肿瘤免疫的重要活性细胞[2]。本文通过对76例AML患儿和同期健康儿童30例进行研究，采用流式细胞技术检测纳入者外周血肿的T细胞亚群和NK细胞水平，分析探讨T细胞亚群和NK细胞在儿童AML中的临床价值。现对具体内容进行分析报告如下。

1　资料与方法

1.1　一般资料

以郑州大学附属儿童医院2015年5月～2017年5月收治的76例AML患儿和同期进行体检的健康儿童30例为研究对象。其中40例患儿为初发AML(初发组)，36例患儿为完全缓解复查患儿(PR组)。40例初发AML患儿均经过MICM分型，且符合《血液病诊断及疗效标准》中关于AML的诊断标准；排除合并其他免疫相关疾病患儿，同时排除其他恶性肿瘤患儿。其中男23例，女17例；年龄3～14岁，平均(7.56±2.34)岁；AML亚型为：3例M1型，12例M2型，9例M3型，8例M4型，6例M5型，2例M6型。36例AML患儿经过临床治疗达到完全缓解，其中男20例，女16例；年龄2～13岁，平均(7.14±2.28)。同期在郑州儿童医院体检的30例儿童作为对照组，其中男17例，女13例；年龄2～14岁，平均(7.53±2.81)岁。3组纳入者性别、年龄等资料相比无统计学差异(P>0.05)。

1.2　方法

采用流式细胞仪(美国Beckman Coulter)检测患者外周血肿T细胞亚群水平和NK细胞变化。所用抗体均购自于美国BD公司。采集所有纳入者入院时清晨空腹外周血2 mL，置于经过EDTA抗凝处理的试管中并于6 h之内标记抗体。检测方法：利用直接免疫荧光标记法对单克隆抗体进行标记，之后采用流式细胞仪检测所有纳入者的T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)和NK细胞(CD3-CD16+CD56+T)活性，所有操作均严格按照试剂盒中说明书进行操作。

1.3　观察指标

对比观察三组纳入者体内CD3+、CD4+、CD8+、CD3-CD16+CD56+T等指标变化。

1.4　统计学方法

2　结果

2.1　初发AML患儿体内T细胞亚群和NK细胞活性与对照组比较

初发组AML患儿体内CD4+细胞、CD4+/ CD8+、CD3-CD16+CD56+T细胞水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；而CD3+、CD8+细胞水平两组相比无统计学差异(P>0.05)。见表1。

表1　初发AML患儿体内T细胞亚群和NK细胞活性与对照组比较　%

2.2　PR组患儿体内T细胞亚群和NK细胞活性与对照组比较

PR组患儿体内CD3-CD16+CD56+T细胞水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，其他细胞水平两组相比无统计学差异(P>0.05)。见表2。

表2　PR组患儿体内T细胞亚群和NK细胞活性与对照组比较　%

3　讨论

恶性肿瘤的发生主要是由于患者体内的免疫功能障碍所引起的[3]。临床抗肿瘤治疗的过程中细胞免疫发挥主要的作用，其中T淋巴细胞所调节的细胞免疫功能在肿瘤免疫过程中发挥中心调控作用。T淋巴细胞亚群主要是用于执行机体内细胞免疫以及对免疫调节的功能，通过不同功能的淋巴细胞亚群进行免疫监视功能[4]。T淋巴细胞亚群中CD3+用于表示淋巴细胞的数量，CD4+细胞是免疫应答过程中的主要反映细胞，其作用为扩大和增强其他细胞的功能，CD8+细胞可以介导细胞产生细胞毒作用，且可以对CD4+细胞发挥调节性的免疫抑制作用； CD4+/ CD8+维持着机体细胞免疫应答反应的平衡状态，当CD4+/ CD8+为正常水平时，机体方能发挥抗肿瘤的作用。NK细胞是机体抗肿瘤的屏障，其可以直接杀伤肿瘤细胞，或者通过分泌细胞毒因子对肿瘤细胞产生杀伤作用，NK细胞的活性下降是机体内肿瘤发生和发展的重要因素[5]。急性髓系白血病患者的发生常常伴随有T淋巴细胞亚群水平和NK细胞活性变化[6]。本次研究通过对76例AML患儿体内T淋巴细胞亚群和NK细胞活性的变化。结果表明，初发AML患儿体内CD4+细胞、CD4+/ CD8+、CD3-CD16+CD56+T细胞水平与对照组正常儿童相比显著下降，而PR组患儿体内CD3- CD16+CD56+T细胞水平也显著低于对照组(P<0.05)。这一结果表明，初发AML患儿体内NK细胞免疫功能受到损伤，且经过治疗后患儿体内NK细胞的免疫功能未能完全恢复。

综上所述，AML患儿体内细胞免疫功能受损，且主要表现为T淋巴细胞亚群水平的变化和NK细胞活性下降，通过检测T细胞亚群水平和NK细胞活性有助于临床上对于AML患儿病情的控制以及预后效果的评估，具有较高的临床价值。

[参考文献]

[1]徐丽华，岑建农，何海龙，等.儿童急性髓系白血病中miR-196b表达及预后意义[J].临床儿科杂志.2014(12):1145-1149.

[2]孔令君，葛健，夏瑞祥.Treg和淋巴细胞亚群在急性髓系白血病中的意义[J].安徽医科大学学报.2015(4):512-514,515.

[3]冯秀梅，许洪志，张婧瑶，等.再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病患者CD4+T细胞亚群转录因子表达的变化及其临床意义[J].中国实验血液学杂志.2014,22(4):1038-1042.

[4]范佳鑫，曾英坚，吴建伟，等.同种异体 NK 细胞对 CD34+CD38-早期急性髓系白血病细胞的体外杀伤作用[J].广东医学.2015(2):192-195.

[5]郭青.儿童急性髓系白血病微小残留病检测技术的应用进展[J].国际儿科学杂志.2016,43(10):760-762,768.

[6]朱嘉莳，蒋慧，陆正华，等.儿童急性髓系白血病的疗效及预后相关因素分析[J].中国小儿血液与肿瘤杂志.2016,21(4):211-215.