肺炎支原体感染与社区获得性肺炎合并急性心肌梗死的关系

，

社区获得性肺炎(CAP)是指在医院外罹患的感染性肺实质(含肺泡壁，即广义上的肺间质)炎症，包括具有明确潜伏期的病原体感染在入院后于潜伏期内发病的肺炎。肺炎支原体(MP)是我国成人CAP的重要致病源。急性心肌梗死(AMI)是指由于持久而严重的心肌缺血所致的部分心肌急性坏死。CAP和AMI均是老年多发病，随着社会人口老龄化，且合并出现临床较多见，合并出现时病情凶险，死亡率高。本研究分析MP感染与CAP合并AMI的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 CAP合并AMI组为2015年1月—2016年10月在我院老年医学科和冠心病重症监护治疗病房(CCU)住院治疗的病人30例，男18例，女12例，年龄78.27岁±4.72岁，未合并严重肝、肾、内分泌等系统疾病；CAP未合并AMI组为同期住院治疗的病人30例，男19例，女11例，年龄76.67岁±3.83岁，未合并严重心、肝、肾、内分泌等系统疾病。CAP诊断符合中华医学会呼吸病学分会《中国成人社区获得性肺炎诊断和治疗指南》；AMI诊断符合中华医学会心血管病学分会《急性心肌梗死诊断和治疗指南》。健康对照组30名为同期健康体检者，男15名，女15名，年龄76.47岁±4.09岁，经临床检查排除糖尿病、心、脑、肺、肾、肝脏等器官的器质性病变，近2个月无呼吸系统疾病史。

1.2 实验方法

1.2.1 标本采集 分别抽取病人入院24 h内(急性期)及恢复期空腹非抗凝外周静脉血8mL～10mL，3 000 r/min(离心半径18.5 cm)离心10 min分离血清，置-70 ℃冰箱保存备用。两次采血间隔时间约3周。痰标本由专人于入院24 h内用一次性吸痰管送入鼻腔5 cm～10 cm，利用负压吸引的原理，吸取痰液1 mL～2 mL，置-70 ℃冰箱保存备用。咽拭子由专人于入院24 h内用无菌棉拭子擦取病人咽后壁黏膜留取，置-70 ℃冰箱保存备用。采集同期健康体检者空腹非抗凝外周静脉血，离心，置-70 ℃冰箱保存备用。留取健康体检者咽拭子，置-70 ℃冰箱保存备用。

1.2.2 MP-IgM检测 采用ELISA法检测，德国Virion/Serion公司的MP-IgM试剂盒，严格按照说明书操作，检测所有病人急性期、恢复期及健康体检者MP-IgM水平。诊断标准：急性期MP-IgM效价≥1∶160或双份血清学标本抗体滴度升高4倍以上可诊断为MP急性感染阳性。

1.2.3 MP-DNA检测 采用RT-PCR法检测所有病人急性期痰标本、咽拭子MP-DNA，检测健康体检者咽拭子MP-DNA。总核酸(DNA/RNA)提取试剂盒及MP-DNA扩增荧光检测试剂盒购自中山大学达安基因诊断公司。检测仪器为美国ABI 7500自动荧光检测仪。痰标本经震荡、离心、去上清，再加入裂解液提取总核酸；将咽拭子加入1 mL无菌生理盐水充分震荡混匀，取漂洗液离心、去上清，加入裂解液中，提取咽拭子标本中的总核酸。设计上游引物Ⅰ 5’-GCAAGGGTTCGTTATTG-3’，下游引物Ⅱ 5’-CGCCTGCGCTTGCTTTAC-3’，荧光探针 5’-AGGTAATGGCTAGAGTTTGACTG-3’。反应总体积为50 μL。循环温度设置：预变性94 ℃ 2 min；变性93 ℃ 45 s，退火55 ℃ 60 s，循环10次；变性93 ℃ 30 s，退火55 ℃ 45 s，循环30次。结果以Ct值显示，反应结束电脑自动采集、分析结果。诊断标准：MP-DNA拷贝数≥1.00e+005copies/mL，诊断为MP感染阳性。根据阳性质控标准品所得数据分析并调节基线起始值和阈值，标准曲线斜率为-3.70，线性相关系数R2>0.992。结果判定：若扩增曲线呈S型且Ct值<30，则判定样品的MP-DNA为阳性；若扩增曲线不呈S型或Ct值≥30，则判定样品的MP-DNA为阴性。

1.2.4 白介素-6(IL-6)检测 采用ELISA法，试剂盒由德国Virion/Serion公司提供，严格按说明书操作，检测所有病人急性期及健康体检者IL-6水平。

2 结 果

2.1 MP的感染情况

2.1.1 血清MP-IgM检测结果 CAP合并AMI组血清MP-IgM阳性率为40.00%(12/30)，CAP未合并AMI组血清MP-IgM阳性率为20.00%(6/30)。CAP合并AMI组MP-IgM阳性率高于CAP未合并AMI组，差异无统计学意义(χ2=2.857，P=0.091)。

2.1.2 痰标本MP-DNA检测结果 CAP合并AMI组痰标本MP-DNA阳性率为63.33%(19/30)，CAP未合并AMI组痰标本MP-DNA阳性率为30.00%(9/30)。CAP合并AMI组痰标本MP-DNA阳性率明显高于CAP未合并AMI组，差异有统计学意义(χ2=6.696，P=0.010)。

2.1.3 咽拭子MP-DNA检测结果 CAP合并AMI组咽拭子MP-DNA阳性率为63.33%(19/30)，CAP未合并AMI组咽拭子MP-DNA阳性率为20.00%(6/30)，健康对照组咽拭子MP-DNA阳性率为6.67%(2/30)。CAP合并AMI组咽拭子MP-DNA阳性率明显高于CAP未合并AMI组，差异有统计学意义(χ2=11.589，P<0.01)。CAP合并AMI组咽拭子MP-DNA阳性率明显高于健康对照组，差异有统计学意义(χ2=21.172，P<0.01)。CAP未合并AMI组咽拭子MP-DNA阳性率与健康对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2 3组IL-6水平比较 CAP合并AMI组IL-6水平明显高于CAP未合并AMI组和健康对照组，CAP未合并AMI组IL-6水平明显高于健康对照组，LSD、SNK检验结果表明3组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。详见表1。

表1 3组IL-6水平比较 (±s) ng/L

3 讨 论

动脉粥样硬化(AS)是动脉壁的一种病理改变，其特征是血管增厚、僵硬和管腔缩小。AS认为是一种胆固醇贮积疾病，过去几年中，对AS病理生理学的认识经历明显演变。AS认为是一种慢性炎症性疾病[1]，其特征是具有吞噬和抗原提呈能力的细胞被激活，氧化修饰脂蛋白的积累，受损的免疫细胞和组织原位修复的增加及动脉内膜的增生性病变[2-4]，其中病原微生物感染可能是病因之一[5-7]。AMI是冠状动脉急性、持续性缺血缺氧所引起的心肌坏死。AS不稳定斑块破裂或糜烂导致冠状动脉内血栓形成，认为是大多数AMI发病的主要病理基础。

本研究显示，CAP合并AMI组MP-IgM阳性率(40.00%)高于CAP未合并AMI组MP-IgM阳性率(20.00%)；CAP合并AMI组痰标本MP-DNA阳性率(63.33%)明显高于CAP未合并AMI组痰标本MP-DNA阳性率(30.00%)；CAP合并AMI组咽拭子MP-DNA阳性率(63.33%)明显高于CAP未合并AMI组咽拭子MP-DNA阳性率(20.00%)。结果表明CAP合并AMI时MP感染阳性率较高，提示MP急性感染在AMI起病过程中发挥重要作用，MP感染可能是AMI病因之一。

IL-6是由活化的单核/巨噬细胞、T细胞、成纤维细胞等多种细胞产生的一种糖蛋白[8-9]，可激活炎症细胞，促进肝细胞合成大量C反应蛋白(CRP)，激活的炎症细胞合成、释放其他促炎因子，参与肝脏急性期反应，故IL-6水平反映机体的炎症状态[10]。激活的炎症细胞引起内皮细胞损伤，细胞黏附分子表达增加，参与血栓形成；同时CRP与脂蛋白结合，通过经典途径激活补体系统，加重心肌细胞损伤、坏死。Anderson等[11]研究表明，AMI病人IL-6 mRNA表达高于正常冠脉对照组6倍，提示IL-6介导的炎症反应可能参与动脉粥样斑块的易损和破裂，IL-6水平可能与斑块的不稳定程度有关。故认为IL-6是AMI的危险因素。

本研究显示，CAP合并AMI病人IL-6水平明显升高，同时MP感染阳性率明显升高，提示AMI时存在较强的炎症激活，MP感染是炎症因子激活的因素之一。机体感染MP后，IL-6诱导T细胞分化、B细胞生长，参与炎症反应的病理过程。刘芳等[12]研究提示IL-6水平在肺炎支原体肺炎急性期明显高于普通肺炎，且急性期高于恢复期，重症病人高于轻症病人，提示其在肺炎支原体肺炎免疫应答的、早期即发挥重要作用，IL-6可能与MP感染的严重程度和转归相关。有研究表明，IL-6水平增高是早期出现的感染指标[13]，其过度表达可致多器官、多系统损伤[14-15]。MP持续感染导致内皮细胞损伤、平滑肌细胞增殖、胆固醇沉积、泡沫细胞形成，促进AS斑块形成；急性MP感染促进AS斑块破裂、脱落，诱发AMI。

综上所述，MP感染是炎症因子增加的因素之一，感染急性期IL-6明显升高，导致较强的炎症激活，促进AS斑块破裂、脱落，诱发AMI。说明AMI发生在一定程度上与炎症反应有关，而MP感染加重冠状动脉内炎症反应，触发AS斑块不稳定，导致AMI发生。早期准确、及时控制MP感染，可减少CAP合并AMI的发生，具有重要的临床意义。

[1] Mariann H，Peter S，Gyorgy P.Atherosclerosis：a complex interplay of inflammatory processes[J].Clinical Lipidology，2009，4(2)：167-187.

[2] Shah PK.Link between infection and atherosclerosis：who are the culprits：viruses，bacteria，both，or neither?[J].Circulation，2001，103(1)：5-6.

[3] Zhang S，Guo Y，Ma Y，et al.Cytotoxin-associated gene-A-seropositive virulent strains of helicobacter pylori and atherosclerotic diseases：a systematic review[J].Chin Med J (Engl)，2008，121(10)：946-951.

[4] Coombes BK，Mahony JB.Chlamydia pneumoniae infection of human endothelial cells induces proliferation of smooth muscle cells via an endothelial cell-derived soluble factor(s)[J].Infect Immun，1999，67(6)：2909-2915.

[5] Kalayoglu MV，Miranpuri GS，Golenbock DT，et al.Characterization of low-density lipoprotein uptake by murine macrophages exposed to chlamydia pneumoniae[J].Microbes Infect，1999，1(6)：409-418.

[6] Andraws R，Berger JS，Brown DL.Effects of antibiotic therapy on outcomes of patients with coronary artery disease：a meta-analysis of randomized controlled trials[J].JAMA，2005，293(21)：2641-2647.

[7] Joensen JB，Juul S，Henneberg E，et al.Can long-term antibiotic treatment prevent progression of peripheral arterial occlusive disease? A large，randomized，double-blinded，placebo-controlled trial[J].Atherosclerosis，2008，196(2)：937-942.

[8] 高彦，潘娅萍，吕云，等.血清肌红蛋白、TnI、IL-6和M-CSF水平对心肌梗死患者预后的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志，2014，12(12)：1475-1476.

[9] Kanikowska D，Pyda M，Korybalska K，et al.Age-related limitations of interleukin-6 in predicting early mortality in acute ST-elevation myocardial infarction[J].Immun Ageing，2014，11(1)：1-5.

[10] 都渝.急性冠脉综合征病人冠脉病变情况与TNF-α及白介素-6的关系探讨[J].中西医结合心脑血管病杂志，2016，14(6)：637-639.

[11] Anderson DR，Poterucha JT，Mikuls TR，et al.IL-6 and its receptors in coronary artery disease and acute myocardial infarction[J].Cytokine，2013，62(3)：395-400.

[12] 刘芳，赵宇华，陈霜慧，等.IL-6、IL-8及IL-10在肺炎支原体肺炎患儿血清中的表达及临床意义[J].实用临床医药杂志，2015，19(17)：61-66.

[13] 肖政辉，易著文，胥志跃，等.重症肺炎患儿血浆IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α变化及临床意义[J].医学临床研究，2007，24(8)：1345.

[14] Ma LD，Chen B，Dong Y，et al.Rapid mycoplasma culture for the early diagnosis of mycoplasma pneumoniae infection[J].J Clin Lab Anal，2010，24(4)：224-229.

[15] Yang J，Hooper WC，Phillips DJ，et al.Regulation of proinflammatory cytokines in human lung epithelial cells infected with mycoplasma pneumoniae[J].Infect Immun，2002，70(7)：3649-3655.