军事医学与特种医学

自噬活性的降低增加人鼻咽癌CNE-2细胞的放射敏感性

卢小迪，朱小东，赵伟，等

摘要：目的：鼻咽癌是我国高发的恶性肿瘤之一，放射治疗被公认为其最有效的治疗手段。然而，研究发现，鼻咽癌组织中存在一定比例的放射抗拒细胞，严重制约了鼻咽癌的放射治疗疗效和预后。自噬是胞质大分子物质和细胞器在裂解腔隙中大量降解的非选择性动力学过程。自噬被认为不仅可以通过清除细胞内的废物、维持细胞内环境的稳定而影响细胞的生长发育，而且参与了多种疾病及肿瘤的发生、发展过程。研究表明，在多种人类肿瘤中均存在自噬活性的改变。自噬是近年来国内外研究肿瘤细胞死亡机制的新热点。然而，关于自噬与放疗的关系，特别是自噬在鼻咽癌放射治疗中的作用的研究国内外却鲜有报道。本课题组前期实验已证实，射线可以诱导鼻咽癌CNE-2细胞发生自噬，并且，自噬的发生表现为不同程度的剂量和时间依赖关系。基于以上理论，本研究选取自噬相关基因ATG5为切入点，利用慢病毒介导的RNA干扰这一实验方法，沉默自噬相关基因ATG5，进一步研究自噬与鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性之间的关系，以期为鼻咽癌放射抗拒的研究提供理论依据，为提高鼻咽癌放疗疗效提供新思路。方法：采用慢病毒介导的RNA干扰技术建立稳定沉默自噬相关基因ATG5的人鼻咽癌CNE-2细胞系，实验分为Control组、NC组及ATG5组，应用CCK-8法、流式细胞术及克隆形成实验检测细胞增殖、凋亡及放射敏感性的变化。结果：CCK-8实验结果显示，与Control组和NC组相比，各剂量点ATG5组的细胞存活率均显著降低（F＝3.755、46.086、8.609、44.160，P＜0.05），绘制细胞生存曲线可见下调ATG5的表达后可以增加CNE-2细胞的放射敏感性；流式细胞术结果显示，经6 Gy X射线照射后，ATG5组细胞的凋亡指数较NC组及Control组明显升高（F＝394.876，P＜0.01）；克隆形成实验结果提示沉默ATG5基因可增加鼻咽癌CNE-2细胞的放射敏感性（F＝219.025，P＜0.05）。结论：降低鼻咽癌CNE-2细胞的自噬活性可以增强其放射敏感性。

来源出版物：中华放射医学与防护杂志, 2015, 35(6):423-427

入选年份：2015