食用菌子实体水提物对肠道菌群的影响初探

张放放，郭晓帆

（沈阳工学院，辽宁 抚顺 113122）

通过对富硒猴头菇的冻干粉和香菇酶解物的研究，发现它们分别可使大肠埃希氏菌和大肠杆菌减少，对肠道菌群环境有改善的效果，从而提高生命体的免疫力。文章通过实验来系统分析不同食用菌子的实体水提物对肠道菌群的不同影响。

1 材料及方法

1.1 材料、试剂

从本地市场采购的新鲜杏鲍菇、双孢菇、平菇、黑木耳、香菇、金针菇6种菌类。

来自试剂公司美国Omega的D3350-1（此为提取出的细菌DNA试剂盒）和国产的分析纯的其他化学试剂。

1.2 设备仪器

可旋转的蒸发仪、压力方式为立式的蒸汽灭菌器、既可数显、测速又可保证恒温的磁力搅拌器、高速组织的绞碎机、厌氧的手套箱、离心机、万用炉（电子）、恒温水浴缸。

1.3 实验方法

（1）制备食用菌子的实体水提物。取一定的蒸馏水加热，然后取蒸馏水一半体积的食用菌子原料，将其绞碎，放入蒸馏水中，在保证蒸馏水恒温55℃的情况下，加热2 h后，将混合液过滤并收集起滤液。将滤液通过低温进行浓缩、干燥冷冻，即为食用菌子的实体水提物。

（2）测定食用菌子的实体水提物具体成分。此实验采用的是自动凯氏定氮仪法来测定蛋白质含量；根据一些文献测定实体水提物的总糖含量以及水分含量。

（3）配制厌氧培养基。厌氧培养基需要实体水提物、菊糖、牛肉膏粉、鱼粉。首先将之前已经提取出来的水提物分别放入6个瓶中，并且在每个瓶中各加入0.18 g的糖；取3个瓶，在瓶中分别加入0.12 g的牛肉膏和鱼粉，并且再多加入0.3 g的菊糖，作为阳性对照；另外3个瓶作为实验组。最后需要在6个瓶中各加入30 mL的基础培养基，然后放在121℃的高压环境中，进行2 h的灭菌。

（4）配制肠道微生物的培养液。配制此培养液需要保证没有其他因素的影响，选择了一位两个月内没有服用过抗生素，且身体健康的青年男性作为受试者。首先需要将受试者的新鲜粪便收集起来。提取3 g已经混合好的新鲜粪便，在里面加入30 m磷酸盐缓冲液（需进行脱氧处理），使用离心机将此混合液进行离心，得到粪便悬液，且将其迅速放在之前准备好的厌氧手套箱中。

（5）培养肠道微生物以及提取分离微生物的DNA。取出之前备好的粪便悬液0.3 g、厌氧培养基实验组2.7 mL、厌氧培养基对照组2.7 mL；将3种液体分别放在一起并进行充分混合。将混合后的液体在厌氧手套箱重进行恒温培养，并每隔12 h进行充分混合。48 h后即可完成对粪便悬液的接种。将接种好的粪便悬液进行提取分离，需按照之前的DNA试剂盒上的说明提取分离，提取分离完成后，将提取分离后的物质放在-20℃的环境中保存。

（6）对样品进行测序分析。将之前的分离出的DNA，通过引物接头的连接，在经过二代测序的方法，对测序后的结果进行统计收集，从而得到不同模板中DNA片段的序列。

2 结语

经过上述实验，得出这样的结论：不同食用菌子的实体水提物所含有的粗蛋白和还原糖均不相等，也因此不同食用菌的实体水提物对肠道微生物的影响各有不同，通过对肠道菌群的影响，达到对身体的影响。例如：食用黑木耳则能产生较多的双歧杆菌，既能通肠胃、环节胃肠障碍，又能有效地抵抗炎症和感染；而金针菇、杏鲍菇则能使身体里产生较多属放线菌门的有益菌，能软化和保护血管，增强免疫力，也可降低人体中血脂和胆固醇；双孢菇的食用则可减少厚壁菌门的数量，达到减肥效果；平菇的食用则可使产生较多的乳杆菌，从而促进肌体健康。总的来说，不同的菌类实体水提物对肠道菌群有不同影响。