尿沉渣定量分析仪用于脑脊液细胞计数的可行性

傅 蓉

(成都市第二人民医院检验科，四川 成都 610017)

脑脊液标本的细胞计数及分类对临床疾病的诊疗及预后有重要意义。然而目前脑脊液常规检查仍广泛采用显微镜手工计数，该方法操作烦琐，速度慢，人为误差较大，无法进行室内或室间质控。且随着当前标本检测数量的增多，手工计数已不能满足大规模样本量的准确快速检测。UF-1000i全自动尿沉渣定量分析仪采用流式细胞术和电阻抗原理对尿液细胞成分进行分类计数，已经在临床实验室广泛开展应用，其检验快速，准确、重复性好、可进行质控管理。鉴于脑脊液标本中的细胞总数一般位于仪器的检测范围内且细胞成分简单，这为使用UF-1000i计数脑脊液中细胞数量及分类提供了理论依据[1]。笔者结合本院实验室实际情况和国内相关文献的研究经验[2，3]，通过对226例住院患者的脑脊液标本同时应用UF-1000i和手工计数细胞进行对比和分析，探讨该仪器在检测脑脊液中的白细胞及红细胞计数及分类的可行性，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 我院2015年1—6月住院患者随机送检的脑脊液标本共计256例。纳入标准：临床医师在无菌条件下进行腰椎穿刺所得，并在2 h内用无菌EDTA抗凝管送检的标本。排除标准：(1)标本送检容器错误；(2)送检时间超过2 h；(3)标本有凝块。按照标准，共计226例标本纳入本研究。

1.2 检验方法 UF-1000i全自动尿沉渣定量分析仪及配套试剂和质控品均由日本SYSMEX公司提供，分析前采用仪器配套质控品进行检测，仪器在控。检测操作严格遵循仪器操作说明书及本实验室SOP。手工镜检法由获得主管检验技师资格证及以上资历的检验人员严格按照第4版《全国临床检验操作规程》操作。所有检测均在标本留取后2 h内完成，结果采用双盲方式判读数据。

1.3 仪器及试剂 UF-1000i全自动尿沉渣定量分析仪及配套试剂(含质控品及校准品)均由日本SYSMEX公司提供，Olympus光学显微镜(日本奥林巴斯公司生产)，改良牛鲍计数板(江苏盐城锦辉玻璃仪器厂生产)，1%冰醋酸及20 μL微量吸管(江苏泰兴市诺金医疗器械厂生产)，EDTA-K2真空抗凝管由成都瑞琦公司提供。

1.4 统计学方法 采用SPSS17.0软件进行组间配对t检验和线性回归分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 对总体标本进行比较 分别用手工镜检法和仪器法对226例标本进行白细胞和红细胞计数，对总体样本情况进行一致性分析：白细胞回归方程y=0.826x+44.67(t=1.148，P<0.05)。红细胞回归方程y=0.916x+102.22(t=1.288，P<0.05)。

2.2 对白细胞进行分组，就组内进一步进行的一致性和均数比较分析 以手工镜检结果为参考标准，将结果按(0～10)×106/L、(11～100)×106/L、(101～1000)×106/L、>1000×106/L梯度将标本分为A组、B组、C组、D组，进行统计学分析，结果详见表1、表2。

表1 脑脊液白细胞计数的UF-1000i计数法与手工镜检结果相关性比较

表2 脑脊液白细胞计数的UF-1000i计数法与手工镜检结果比较

2.3 对红细胞进行分组，就组内进一步进行的一致性和均数比较分析 以手工镜检结果为参考标准，将红细胞结果按(0～100)×106/L、(1 00～1000)×106/L、(1001～10 000)×106/L、>10 001×106/L梯度将标本分为E组、F组、G组、H组，进行统计学分析，结果详见表3、表4。

表3 脑脊液红细胞计数的UF-1000i计数法与手工镜检结果相关性比较

表4 脑脊液红细胞计数的UF-1000i计数法与手工镜检结果比较

3 讨 论

UF-1000i全自动尿沉渣定量分析仪采用流式细胞术和电阻抗原理。尿液中的红细胞、白细胞、上皮细胞和管型等颗粒经过核酸荧光染色后在鞘流贯流分析池中形成鞘流样本，通过红色半导体激光束照射，不同粒子产生相应的前向、侧向散射光以及侧向荧光信号，根据对光电信号进行分析实现对粒子分类进行识别[4]。结果证实，总体而言UF-1000i全自动尿沉渣分析仪检测脑脊液细胞一致性良好。

由于本研究中细胞计数数值差别较大，且不同细胞数对临床疾病诊疗的意义不同，因此对总体标本进行均数及标准差检测意义不大。根据以上原因，笔者根据脑脊液临床意义进一步将样本进行分组统计分析：白细胞计数按(0～10)×106/L、(11～100)×106/L、(101～1000)×106/L、>1000×106/L梯度将标本分组；红细胞结果按(0～100)×106/L、(100～1000)×106/L、(1001～10 000)×106/L、>10 001×106/L梯度将标本分组。由分组数据显示，各组白细胞一致性均良好。

根据对标本分组的比较，当白细胞数>100×106/L，由两种方法检测到的细胞数量在统计学上无显著性差异，C组和D组的P值分别为0.237和0.526；可以认为两种方法学检测一致性良好。由于脑脊液正常值为白细胞<15×106/L，鉴于A组和B组的细胞计数均值比较P<0.05，笔者将两组共计146份标本按照白细胞数(0～20)×106/L(甲组)和(>20～100)×106/L(乙组)重新分组进行均值比较：甲组手工法和UF-1000i均值分别是3.95±4.87和6.14±6.57，P<0.05；乙组手工法和UF-1000i均值分别是53.09±25.71和70.00±31.79，P<0.05。因此在白细胞数量<100×106/L，两组数据在统计学上有计数差异，两组白细胞的手工法的计数值均数都低于UF-1000i法。根据笔者经验，在低细胞水平计数均数差异可能与高蛋白、凝块、细胞碎片以及红细胞混入有关。因此在15×106/L为医学决定水平附近的白细胞计数，仍须谨慎报告，不能完全依靠仪器，尤其是细胞分类涉及单个核细胞和分叶核细胞的比例差异也须人工判读。

当白细胞数>100×106/L，检测具有可行性，其相关性和准确性均良好。不过虽然计数差异无统计学意义，仍须注意UF-1000i在白细胞计数上的假性偏低。可能原因为白细胞检测通道和上皮细胞检测通道参数有重叠，当由于脑脊液渗透压改变导致的白细胞胞体偏大或者变形，可能误以为是上皮细胞[5]。

在脑脊液标本中，红细胞计数值要求并无白细胞计数严格。少量红细胞多考虑穿刺损伤导致；大量红细胞多考虑肿瘤、脑室或者蛛网膜出血所致。因此虽然E组和F组的红细胞计数均值在统计学上有差别，但研究认为两种方法检测结果经统计学处理无显著性差异(P>0.05)。根据笔者分析，造成这个差异的原因可能因为不同分组中，细胞计数高低比例数不同有关。虽然相关性良好，UF-1000i计数值轻微假性偏高。考虑到两种检测方法相关性良好，且由于出血导致血性脑脊液血液中红细胞数量级为1012/L。少量红细胞计数对临床意义不大。笔者认为UF-1000i在红细胞计数上符合率较好，尤其是红细胞数>1000×106/L，其相关性和准确性均良好。不仅如此，由于其图像功能具有鉴别红细胞形态的能力，还可以进一步协助区别新鲜出血和陈旧性出血。不过由于样本量不够，笔者未进一步分析红细胞形态。

综上所述，UF-1000i型全自动尿沉渣分析仪应用于脑脊液检查，其操作规范，快速准确，可重复性强，生物安全性高。其白细胞及红细胞的计数值和显微镜手工计数法相关性良好，尤其在白细胞>100×106/L、红细胞>1000×106/L时，其计数值和手工法无统计学差异。随着实验室样本量不断增加，手工检测无法满足需要的情况下将其应用于细胞计数上更加具有临床检测价值。值得注意的是在白细胞<100×106/L时，尤其是白细胞位于(5～20)×106/L时，仪器法不能完全替代手工法，二者应该相互结合。

[1]韩娟，曹军皓，杨琴，等.XT-4000i全自动血细胞分析仪与UF-1000i尿沉渣分析仪在脑脊液细胞计数中的应用[J].国际检验医学杂志，2012，33(18)：2248-2249.

[2]李文庆，李红燕，李玉.Sysmex UF-500i和XT-4000i在体液细胞计数中的应用评价[J].实用医技杂志，2015，22(1)：63-65.

[3]曹兴华.UF-1000i尿有形成分分析仪在脑脊液细胞计数中的应用[J].中国实用神经疾病杂志，2011，14(8)： 97.

[4]左万超，郑卫东.全自动尿沉渣分析仪在脑脊液细胞计数中的应用[J].国际检验医学杂志，2016，37(7)：969-970.

[5]章文.UF-100尿沉渣分析仪在小儿脑脊液及浆膜腔积液检查中的应用[J].国外医学：临床生物化学与检验学分册，2004，25(3)：281.