荧光定量PCR检测性病的结果研究

符颖 陈菊香 何瑞英

（文昌市皮肤性病防治中心 海南 文昌 571300）

临床中较为常见的传染性疾病中，性病是其中之一，该病主要是通过性行为传播[1]。近年来，性病的发生率呈现出逐年上升趋势，而该病在临床上的检出率则相对不高，因此，寻找准确、检出率高的检验方法是当前检验人员面对的首要问题。基于上述情况，本文以在我中心就诊的疑似性病患者58例作为研究对象，对荧光定量PCR检测性病的结果进行分析，内容如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

抽取2016年1月至2017年1月在我中心就诊的疑似性病患者58例作为研究对象，其中男性患者38例，女性患者20例，年龄20～48岁，平均年龄（33.5±3.8）岁，本次研究经单位伦理委员会批准，入选者均对本次研究内容知情同意，并在知情研究同意书上签字确认。医生经过询问患者病史、查看体征并根据症状后，58例疑似性病患者均被临床诊断为性病。

1.2 方法

入选者均进行荧光定量PCR检测，女性患者使用窥阴器扩张，将宫颈外分泌物使用无菌生理盐水棉球洗净，再将无菌棉拭子插入宫颈内1～2cm处，旋转5～10s，取出宫颈分泌物，将棉拭子置入无菌玻璃管中，送检。男性患者使用无菌棉拭子在尿道口旋转5～10s，刮取的分泌物密封送检。检验者先对标本进行处理，在标本试管中加入1ml无菌生理盐水，充分摇晃均匀后，吸取1.5ml液体放入离心管中，离心5min后，沉淀加入无菌生理盐水1ml，摇晃均匀后离心5min，在重复洗涤1次。沉淀后加入50μ1DNA提取液，充分摇晃均匀，沸水10min后放在4℃环境下静置6h，再离心5min后，取上清液加入到反应管中。同时提取梯度稀释标准品放入反应管中。离心5s后放入PCR扩增仪，进行扩增和反应前荧光检测，在规定的条件下反应10个循环后，放置在33℃环境下保温，1min后迅速将反应管放入荧光检测仪中，读取并记录读数。观察患者的情况，将检测结果统计分析。

1.4 统计学处理

所有数据均采用SPSS 17.0软件进行统计分析，计量资料应用平均值±标准差(±s)，计量资料采用t检验，组间对比进行分析，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2.结果

58例疑似患者荧光定量PCR检测结果与临床诊断结果比较无统计学差异（P＞0.05），具有可比性。见表1。

表1 疑似患者经荧光定量PCR检测结果与临床诊断结果比较[n=58，(%)]

3.讨论

社会的发展，生产力的提高，使人们的生活水平不断提升，交往活动频繁，人们的思想观念发生了很大的转变，而改革开放进程加快，国外开放思想的涌入，使人们的性意识也发生了极大的改变，不洁性行为情况的发生导致我国性疾病人数逐渐增多，对人们的健康造成了严重的威胁[2]。而我国医疗服务系统尚未完善，一些人缺乏性卫生意识，或者具有不完全的性卫生意识但未对自我保护加以重视，从而导致我国公共卫生建设和社会经济发展受到了影响。因此，加强对性疾病的监察和监管，杜绝性疾病发生，及早发现、诊断疑似性病患者，确诊后尽早治疗对降低性病损害健康的程度起到了重要的意义。

目前，临床中对于性病的检测，传统的衣原体培养方式，但这种方式需要较高的培养条件，需要特殊的设备，检测花费时间长，因此，多数实验室很难开展该技术[3]。此外，ELISA法也是临床中常用的检测技术，该方式的检测敏感性高，检测速度快，但准确性低，而且对一些早期症状不明显的性病，检出率也存在差异性[4]。因此，需要一种花费时间短，检测结果准确性高的检测方法，从而起到及时、准确的诊断，为临床治疗提供依据的目的。

荧光定量PCR检测技术是临床中常用的一种基因诊断方法，荧光定量PCR检测技术是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的累积，对PCR进程实时监测，最后通过标准曲线对位置模板进行定量分析。在相关研究中已经证实，该方法具有高灵敏性和特异性，目前已在临床中频繁的使用。该项检测技术在性病的检测上，是通过搜集的分泌物，按照要求实施检测，在检测中排除了环境因素的影响，自动分析数据，因此，受到干扰小，准确率高，进而提供了临床中对性病的检测。而且，随着年龄的增长，人体内的性激素水平呈现出逐年升高的趋势，性行为较为活跃，这也是近年来性疾病发生率逐年提高的因素。本次研究中，对来我中心就诊的疑似病例进行荧光定量PCR检测，与临床诊断进行对比，结果发现，检测结果与临床诊断结果无明显差异。这说明荧光定量PCR检测具有较高的准确性。与孙海录[5]在同类研究中得出的结果具有一致性，进一步证实了荧光定量PCR检测的准确性高。

综上所述，荧光定量PCR检测性病具有较高的诊断价值，其检测准确性高，花费时间短，能够为临床治疗奠定基础，适合在临床性病检测中推广应用。

[1]魏霜，汪天杰，龙阳，周广彪，林春贵，黄帅，吴希阳.多重富集定量PCR(ME-qPCR)同时检测4种食源性病原弧菌[J].中国农业科学，2016，49(23):4619-4627.

[2]高宇琳.荧光定量PCR检测3种性病病原体结果分析[J].中国医药指南，2013，11(17):632-633.

[3]韦平宣.广西河池地区性病门诊首次就诊患者泌尿生殖道病原体荧光定量PCR检测结果分析[J].分子诊断与治疗杂志，2012，4(05):339-342.

[4]鲜胜.荧光定量PCR检测3种常见性病病原体结果临床分析[J].医学信息，2013，26(4):178.

[5]孙海录.荧光定量PCR检测性病临床结果分析[J].中国社区医师(医学专业)，2011，13(35):247.