冰片的研究进展

成都市双流区妇幼保健院，四川 成都 610200

冰片为芳香开窍药“凉开”之代表药，始载于《新修本草》，系龙脑香科植物龙脑香树脂的加工品。明代医家李时珍《本草纲目》记载冰片具“通诸窍，散郁火”之功。其“开窍”的功用与现代药理研究结果相符合，证明其确有促进药物透过血脑屏障(blood brain barrier,BBB)的作用。临床常作为麝香的辅助药，可用于寒闭及热闭神昏。天然冰片、合成冰片、艾片均被《中国药典》2015版收载。

1 三种冰片的来源、成分及主产地

天然冰片是从龙脑香的树脂和挥发油中提取的冰较纯的右旋龙脑(d-borneo1)[1]。近代以樟脑、松节油等为原料经化学反应人工合成的，称为合成冰片，又称机片，为目前临床所常用，除含有不低于55%消旋龙脑外，还含有约35%的异龙脑以及其它成分。艾片是菊科植物艾纳香(Blumea balsamifeara DC.)叶片和嫩枝的加工品，始见于《增订伪条辨》(1928年版)。艾纳香喜温暖气候环境，贵州罗甸县为我国的道地产区，另在海南、广东，广西、等地均有分布，作为临床使用的冰片来源之一。艾片主要为左旋龙脑。天然冰片是《中国药典》(2005版)新增的品种，1987年江西省吉安地区林科所发现[2]。2007年新晃县已开发成年产35吨天然冰片的现代化工业生产基地。合成冰片生产工艺较为成熟，生产过程中的使用成本低。

2 三种冰片的提取工艺

天然冰片的提取主要利用水蒸气蒸馏法和通汽蒸馏法[3]。通汽蒸馏法:采用高压蒸汽直接用于枝叶，控制温度在180℃，萃取35～40 min,用冷凝器进行冷凝，使精油、天然冰片、水等同时分离，此法制备可使产能提高20倍，另外还有学者采用超声波强化水蒸气蒸馏法、超临界萃取法等。冰片的纯化工艺主要有重结晶法、化学纯化法等，其中重结晶法是利用樟脑与盐酸羟胺等发生反应后，再进行重结晶得到高纯度的左旋冰片，工艺成熟。

合成冰片是临床使用的主要来源，主要通过樟脑的还原反应或松节油中α-蒎烯(α-Pinene)经过酯化、水解得到。α-Pinene主要用于合成松油醇、芳樟醇以及一些檀香型香料，有松木、针叶及树脂样的气息。常用的3种酯化反应为：①α-Pinene+草酸=草酸龙脑酯；②α-Pinene+苯氧乙酸=苯氧乙酸龙脑酯；③α-Pinene+氯乙酸=氯乙酸龙脑酯。上述3种酯类再经水解即得合成冰片。

艾片可通过艾纳香的新鲜叶片水蒸气蒸馏冷却，再压榨去油，最后提炼结晶劈削成片状即成。有研究[4]对艾纳香叶片6种预处理方法(水蒸气蒸馏-溶剂萃取法、蒸馏萃取法、溶剂浸提法、超声辅助提取法、微波辅助提取法、超声-微波协同萃取法)对比发现，若同时测定左旋龙脑、樟脑和异龙脑，水蒸气蒸馏-溶剂萃取法可行(回收率100%～105%)。若仅测定左旋龙脑，超声-微波协同萃取法即可(回收率87%)。比较上述6种方法的时间、能量、溶剂等因素，消耗最少的是超声-微波协同萃取法，微波功率100W，提取时间30s，可作为快速测定艾纳香中左旋龙脑的预处理选择之一。采收期的不同对艾纳香叶的含量也存在影响，有研究发现[4]每年10月15日至次年1月15日采收的样品中左旋龙脑含量较高，即为最佳采收期。

3 三种冰片的鉴别方法

3.1 性状鉴别 天然冰片、合成冰片、艾片外观形状极为相似，三者均为片状或块状结晶，色白，气芳香，火试有浓烟，其中天然冰片散发的清凉味相对较弱，艾片部分呈颗粒状结晶，火试为黑烟。单独以性形状鉴别虽可以对其进行区分，但难度较大。

3.2 旋光测定 由于三种冰片的来源不同，其化学成分存在一定差异。按药典规定，天然冰片比旋度为+34°～+38°，艾片-36.5°～-38.5°。李海燕等[5]按《中国药典》2010版一部附录VIIE旋光度测定法，结果显示三者的旋光度有较大差异，天然冰片主要成分为右旋龙脑，比旋度为(+35.1°)，合成冰片为消旋龙脑，其比旋度为(0°)，艾片为左旋龙脑，其比旋度(-37.8°)，由此可见，用旋光测定法进行3种冰品冰片鉴别，方法可靠。

3.3 含量测定 冰片目前常用的含量测定方法有：气相色谱法、气相色谱法质谱联用法、衍生化高效液相色谱法、薄层扫描法、薄层层析法、红外光谱法、紫外-可见光谱法及重量法。其中气相色谱法以及气相色谱-质谱联用能同时对杂质进行测定。据《中国药典》(2015版)记载[6]，在色谱条件为聚乙二醇20000(PEG-20M)、毛细管柱(柱长为30 m，内径0.53 mm，膜厚度为1.0 μm)、柱温为170 ℃，可以对龙脑、异龙脑及樟脑很好地进行分离。

4 三种冰片的主要药理学作用

4.1 镇静、醒脑 冰片可明显延长戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间，产生协同作用。异龙脑作用明显，可能与其脂溶性有关[7]。在培养的海马椎体神经元上，冰片以open-channel blocker的方式抑制内向电流(IGABA)，洗去冰片后，抑制作用迅速消失，说明冰片可能通过抑制其海马神经元受体来提高大鼠中枢神经系统的兴奋性，从而发挥其醒脑功效[8]。

4.2 脑保护 倪朱漠认为冰片“一切卒暴气闭，痰结神昏之病，非此不能治也”。研究显示[9]，艾片及合成冰片均能明显延长小鼠的存活时间，消除脑损伤时白细胞与内皮细胞的粘附，有助于外伤脑水肿的恢复，说明艾片与合成冰片均有脑保护作用。另外，均可有效减轻MACO大鼠NO造成的损伤级联反应[11]，减轻脑损伤。筆丽梅等[10]认为合成冰片可以改善缺血脑区能量代谢，从而改善小鼠脑缺血后记忆障碍。倪彩霞等[11]观察芳香开窍药及其不同提取部位对脑缺血再灌注损伤小鼠BBB通透性的影响发现，麝香、合成冰片能对抗不完全缺血再灌注损伤模型小鼠BBB通透性的异常增高，表现出对病理状态下BBB的保护作用。冰片与丹参相配伍协同增效，可用于临床缺血性脑卒中的治疗[12]。周宗元等[13]研究发现艾片与合成冰片可以通过降低脑水肿，抑制钙离子以发挥脑保护作用。急救时以艾片为佳。

4.3 抗心肌缺血 据现代药理研究证实，冰片有减轻缺血性心肌损伤，降低心肌耗氧量的作用。与苏合香配伍组成的苏冰滴丸对心肌缺血损伤有明显的保护作用。对比研究[14]天然冰片与合成冰片抗急性心肌缺血作用，由天然冰片配伍组成的复方丹参滴丸能显著提高SOD 活性，降低MDA含量，改善大鼠心肌缺血心电图的变化，与同剂量合成冰片组比较无统计学差异，但天然冰片组3.04 g/kg剂量组在30 min前各时间点心电图恢复正常的例数有优于合成冰片组的趋势。

4.4 促进药物吸收 冰片促进药物吸收主要通过3种方式[15]。一是增加BBB的通透性，促进其他药物透过BBB；二是提高其他药物的血药浓度，提高其他药物生物利用度，发挥其“佐使则有功”特点；三是促透皮吸收，其促透皮作用主要是改变皮肤的角质层的脂质分子排列以增加流动性。达到一定浓度的冰片可以促进药物的鼻腔吸收、口腔黏膜吸收、肠段吸收作用。杨乐等[16]以小鼠微血管内皮细胞制备BBB模型，发现冰片可以促进葛根素(P-gp底物)透过BBB，显著优于单独给药葛根素的吸收率，其机制可从细胞的相关紧密连接蛋白的表达水平来考虑。灯盏花素其水溶性较高，难以透过BBB，但与冰片联合用药后明显增强了药理效应，这可能与上调ZO-1、Claudin-5的表达相关[17]，对脑缺血再灌注大鼠具有同样的促透作用。

冰片近年来多用于配伍各类抗肿瘤药物，通过开发新剂型来提高其生物利用度。梁诗婷等[18]将不同浓度冰片配伍丹酚酸，测试在大鼠不同肠段的吸收率，在一定范围内增加冰片浓度后，丹酚酸B，紫草酸、迷迭香吸收速率有所增加。用于治疗消化道肿瘤的5-氟尿嘧啶口服给药后血药浓度低，天然冰片、艾片、合成冰片均可不同程度的提高5-氟尿嘧啶在小肠的吸收[19]。刘冰垒等[20]认为促进鼻腔吸收的机制可能与抑制MUC5AC的基因表达有关，延长药物在鼻腔的滞留时间后使药物“上行入脑”增加了新西兰兔脑脊液中川芎嗪的浓度。冰片作为吸收促进剂可显著提高P-gp蛋白底物柠檬苦素在大鼠体内的血药浓度[21]，对柠檬苦素的剂型设计提供思路。赖玲等[22]研究结果显示，冰片对三七总皂苷(PNS)在小肠段的促吸收作用优于其他促吸收剂，如卡波姆、聚山梨酯-80以及牛胆盐和壳聚糖等，体现了冰片作为使药的“引经”作用。但实验证实[23]，冰片对CGA通过体外吸收模型Caco-2细胞单层膜的转运过程没有促进作用。

4.5 其他 赵雨千等[24]研究显示,在新型战伤急救止血剂的止痛成分研究中，沸石-冰片组大鼠术后痛阈明显高于对照组,可有效控制急性疼痛(P<0.05)，说明沸石-冰片样品对急性疼痛具有镇痛作用。有研究表明[25]，不同冰片对LPS 80 μg/kg诱导的发热模型大鼠体温的影响持续效应及强弱呈艾片>天然冰片>合成冰片趋势。因此，治温病发热组方中建议用艾片为宜。

5 小结

综上可知，古代医药学家对冰片的记载颇多，古用多为天然冰片，因其资源稀缺，售价昂贵，现临床多用合成冰片替代，《药典》(2010版)中又载有植物艾纳香的提取物艾片作为冰片使用。据统计，《药典》(2015版)中含冰片的成方制剂达160余种，不同来源的冰片其四气五味亦有不同，对其来源、成分、产地及鉴别方法、临床药理作用作出严格区分显得尤为重要。从其“四气”的记载可知，天然冰片为“凉”，合成冰片与艾片均为“微寒”，三者归心、脾、肺经。从化学成分来看，天然冰片主成分为右旋龙脑，分布于江西、湖南一带；艾片主成分为左旋龙脑，主产于云南、广西、贵州等地。合成冰片含龙脑、异龙脑及少量樟脑。3种冰片虽性状极为相似，但仍有细微差别：天然冰片的清凉味较弱，艾片呈颗粒状结晶，火试为黑烟，鉴别以旋光测定法较为可行；冰片具有抗炎镇痛、抗心肌缺血、脑保护、促透等作用，多用于促进吸收剂，发挥其“佐使则有功”之效。用于急救或温热病时以艾片为最优选择。

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