巨噬细胞在肿瘤免疫治疗中的研究进展①

支馨仪 刘岩厚 高 晶 王轶楠

(吉林大学第一医院，吉林大学免疫学研究所，长春 130061)

巨噬细胞作为人体非特异性免疫的重要一员，在肿瘤侵袭、增殖、转移中发挥作用[1]。一直以来，巨噬细胞被看做促进肿瘤生长转移的帮凶，通过抑制其功能进行肿瘤免疫治疗是主要的研究方向。近年来研究人员发现肿瘤中巨噬细胞被激活后具有显著的抑癌效果，巨噬细胞又重新成为肿瘤免疫治疗领域的研究热点[2]。本文将从巨噬细胞促进肿瘤发生发展的作用及机制，以及恢复肿瘤部位巨噬细胞活性及功能在肿瘤免疫治疗中的作用等方面加以综述。

1 巨噬细胞促进肿瘤发生发展的作用及机制

在原发和继发肿瘤中巨噬细胞被称为肿瘤相关巨噬细胞(Tumor-associated macrophage，TAM)，是肿瘤间质中细胞数量最多的群体，约占细胞总数的30%～50%。根据巨噬细胞的活化类型及其在肿瘤微环境中的不同作用，TAM主要分为M1型和M2型巨噬细胞：M1型巨噬细胞，即经典活化的巨噬细胞，可以高表达IL-12、IL-23、NO、活性氧分子(Reactive oxygen species，ROS)，具有溶解肿瘤细胞，向T细胞提呈肿瘤相关抗原，产生免疫刺激因子，促进T细胞和NK细胞增殖并强化二者抗肿瘤的作用；M2型巨噬细胞，即替代性活化的巨噬细胞，具有促进肿瘤形成和发展的作用，同时M2型巨噬细胞不能有效地提呈抗原，使T细胞的功能受到抑制[3]。

1.1肿瘤相关巨噬细胞增强肿瘤细胞的侵袭和增殖能力 TAM通过产生促炎性细胞因子如肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、IL-6以及IL-11等，激活核因子-κB(Nuclear factor-κB)并促进转录激活子STAT3(The activation of signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)活化，增强肿瘤细胞的存活和增殖能力[4,5]。

集落刺激因子-1(Colony stimulating factor-1,CSF-1)在多种肿瘤细胞表面表达，与细胞表面受体CSF-1R结合后，受体构像发生二聚化，继而磷酸化各种酪氨酸激酶残基，引发信号级联反应，最终导致肿瘤细胞增殖或分化[6]。肿瘤来源的CSF-1可以募集巨噬细胞归巢，并促进巨噬细胞产生大量的表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)，血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)，MMP-9(Matrix metalloprotemases,MMP-9)，转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)，进一步增强肿瘤细胞的侵袭能力[7-9]。

1.2肿瘤相关巨噬细胞促进肿瘤血管生成的作用 TAM在调控肿瘤血管生成过程中起着关键作用，在多种肿瘤中如乳腺癌、葡萄膜黑色素瘤、神经胶质瘤、食管鳞状细胞癌、膀胱癌、前列腺癌中TAM的数量与肿瘤部位的血管水平有密切关系[3]。在肿瘤缺氧的微环境中TAM会上调表达缺氧诱导的转录因子1和2(Hypoxia-inducible transcription factors，HIF-1，HIF-2)[10,11]。Barnett等[12]研究发现除了肿瘤干细胞外，TAMs也具有形成原始脉管网络的能力，这些由TAMs所形成的管道在结构和功能上与动、静脉，淋巴管有相似之处，被称为拟态血管(Vascular mimicry，VM)。VM的形成与肿瘤微环境中缺氧状态密切相关，当去除TAMs髓系特异性HIF-1基因时，会减少VM网络的形成以及灌流情况，抑制肿瘤的生长。同时，TAM会高表达VEGF和其他促进血管生成因子的表达，而这些因子的产生主要依赖于HIF-1。

血管生成素Tie2也是当前研究热点，Tie2是一种内皮细胞酪氨酸激酶受体，当与配体血管生成素结合后，维持血管内皮细胞动态平衡及存活状态，促进血管分支形成[13]。过去认为Tie2只表达在内皮细胞上，最近的研究发现Tie2在单核细胞/巨噬细胞上也有表达，循环和组织中的单核细胞上表达量很少，但在肿瘤组织趋化下以及形成血管周围巨噬细胞的过程中Tie2表达量显著增高[14]。对小鼠乳腺癌(N202)细胞进行基因分析，发现Tie2+TAMs高表达肿瘤相关基因，包括MMP9、Vegfa、Cxcl12、Tlr4、Nrp1以及Pdgfb等。研究显示Tie2+TAM能够显著促进肿瘤内血管生成，当去除Tie2+TAMs后，会使小鼠某些肿瘤如神经胶质瘤、胰腺癌以及乳腺癌中的血管生成和肿瘤生长受抑制[15]。

1.3肿瘤相关巨噬细胞促进肿瘤转移的作用 在原发肿瘤部位中，TAM的数量越多预示着肿瘤发生早期转移的可能性越高。在这一过程中需要来自巨噬细胞的EGF和来自肿瘤细胞的CSF-1之间相互作用，巨噬细胞分泌的EGF能够使肿瘤细胞形成细长的突起并增强其侵袭能力，同时肿瘤细胞产生的CSF-1能够促进巨噬细胞分泌更多的EGF，EGF反过来可促进肿瘤CSF-1的生成，由此产生正反馈环路，显著提高肿瘤细胞的侵袭力，从而促进肿瘤发生转移[7]。此外，实验研究显示TAM表达促进淋巴管生成的内皮生长因子-C(Vascular endothelial growth factor-C，VEGF-C)，可能参与肿瘤细胞淋巴转移的过程[16]。

在肿瘤肺转移中，来自血小板微小凝块中的肿瘤细胞会滞留在靶组织的血管中，从而使CCL2介导的Ly6C+单核细胞在该处聚集，并分化成为CCR2+VEGFR1+Ly6C-F4/80+转移相关巨噬细胞(Metastasis-associated macrophage，MAM)，进而促进肿瘤细胞的转移[17]。

Matthew F.Krumel研究团队发现循环肿瘤细胞(Circulating tumor cells，CTCs)进入肺部后，在毛细血管剪切流作用下动态生成肿瘤微粒。通过荧光谱系标记和流式细胞术，观察到不同亚群的髓系细胞以不同方式作用于CTCs，形成肿瘤微粒，其中巨噬细胞在此过程中参与形成超过60%的肿瘤微粒。吞噬肿瘤微粒后的髓系细胞在肺间质中沿着成功转移的肿瘤细胞聚集，促进存活下来的肿瘤细胞转移，同时自身发生与吞噬肿瘤微粒相关的表型改变[18]。

1.4肿瘤相关巨噬细胞构成肿瘤免疫微环境，抑制其他效应细胞的抗肿瘤作用 肿瘤免疫抑制微环境中的IL-10、TGF-β1和PGE2能够抑制巨噬细胞表面的MHC Ⅱ 类分子表达，从而使巨噬细胞不能有效地向T细胞提呈肿瘤抗原，阻碍T细胞对肿瘤细胞发挥特异性杀伤反应。除了肿瘤微环境的作用，TAM自身也可分泌IL-10、TGF-β并激活STAT3[17,19]。

TAM还可通过表达多种受体或者配体来发挥抑制功能，如表达精氨酸酶-1(Arginase-1，ARG-1)抑制T细胞的活性；或者通过表面高表达PD-1(Programmed cell death protein 1)，受体PD-L1和PD-L2促进肿瘤的免疫逃逸并使T细胞发生耗竭；表达T细胞共刺激调节受体配体B7-H4从而抑制T细胞活化等。TAM表面过表达抑制性受体(如CD94，ILT2/4)的配体HLA(HLA-C,E/G)，通过与T细胞表面抑制性受体ILT2/4结合抑制T细胞的增殖和功能发挥；通过Fas/FasL途径诱导CD8+T细胞凋亡，亦能有效抑制CTL的免疫杀伤活性。TAM还可以通过与NK细胞表面的ILT2受体结合抑制NK细胞的杀伤功能；TAM过表达的吲哚胺2，3-双加氧酶(Indoleamine2,3-dioxygenase-1，IDO-1)可以广泛抑制T细胞的功能并促进肿瘤血管生成[17,19,20]。

2 巨噬细胞在肿瘤免疫治疗中的应用策略

近年来，基于T细胞的免疫治疗取得了极大进展，但由于T细胞自身特点的限制，如不易趋化至肿瘤内部、抑制性受体在实体瘤环境下表达上调等，在治疗实体瘤中疗效不佳。针对肿瘤相关巨噬细胞在肿瘤发生发展中的多种作用及机制，研究者通过多种手段和途径试图恢复或增强巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤能力，诱导肿瘤相关巨噬细胞向M1型转化，以及促进其作为抗原提呈细胞对其他抗肿瘤效应细胞的活化能力，使得巨噬细胞重新成为肿瘤免疫治疗研究和应用的重要成员。

2.1恢复或增强巨噬细胞的吞噬能力

2.1.1阻断CD47/SIRP-α信号通路 CD47是目前研究恢复巨噬细胞抗肿瘤功能的重要分子。CD47几乎表达于所有人类细胞的表面，巨噬细胞表面表达有CD47的受体信号调节蛋白α(Signal regulatory protein-α，SIRP-α)，二者结合可帮助巨噬细胞识别“本我”和“非我”细胞，而肿瘤细胞可以通过高表达CD47分子实现免疫逃逸[21]。研究者通过各种方式阻止肿瘤细胞表面的CD47分子与SIRP-α结合，从而修复巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬能力。

在动物实验中，CD47抗体对于多种肿瘤均有显著的治疗效果。CD47抗体项目目前处于研发阶段，全球共有3个CD47抗体项目处于Phase 1阶段、1个处于IND阶段、4个处于临床前研究阶段。处于Phase 1阶段的三个药物分别为Forty Seven公司的Hu5F9-G4、Celgene公司的CC-90002以及Trillium公司的TTI-621。值得注意的是，Trillium的CD47抗体项目为SIRP-αFc融合蛋白形式[22]。

除了应用单克隆抗体以及融合蛋白抑制CD47-SIRP-α通路外，Wang等[23]的实验结果显示运用RNA干扰技术敲除肿瘤细胞CD47分子后，巨噬细胞对肿瘤的清除能力得到有效增强。因此，他们建立了一种由脂质体-鱼精蛋白-透明质酸包被anti-CD47-siRNA的纳米颗粒递送系统，经静脉注射给荷载黑色素瘤的小鼠模型后，发现黑色素瘤的生长得到了有效的抑制。将该纳米颗粒注射给小鼠肺转移模型，结果显示与对照组相比，实验组中肺转移的发生得到有效抑制，并且该纳米颗粒不具有肝脏毒性，更适于临床治疗的应用。

2.1.2增强巨噬细胞介导的程序性细胞清除(Programmed cell removal，PrCR)作用 巨噬细胞介导的程序性细胞清除在肿瘤监视和清除过程中扮演着重要角色。Feng等[24]的研究结果显示巨噬细胞的Toll样受体(Toll-like receptor，TLR)活化后，会激活下游的Btk(Bruton′s tyrosine kinase)信号通路，进而使内质网中的钙网织蛋白(Calreticulin,CRT)发生磷酸化解离，解离后的CRT表达于巨噬细胞膜表面，形成CRT/CD91/C1q复合物介导巨噬细胞吞噬肿瘤。研究还发现，如果将TLR信号通路与抗CD47分子靶向治疗结合后，可以显著增强巨噬细胞对肿瘤细胞的PrCR作用。

2.1.3增强巨噬细胞介导的抗体依赖的吞噬作用(Antibody-dependent cell phagocytosis ,ADCP) 研究表明在依靠单克隆抗体治疗肿瘤过程中，巨噬细胞不可或缺，主要发挥ADCP。用抗CD38分子的单克隆抗体Daratumumab(DARA)治疗SCID-BEIGE小鼠白血病异种移植模型证实了这一抗肿瘤作用机制[25]。在另一项研究中显示，接受抗CD142单克隆抗体的治疗后，TAM表面表达FcγR并且能够吞噬肿瘤细胞，当去除巨噬细胞后，会减弱抗CD142单克隆抗体的治疗效果[26]。

2.1.4增强巨噬细胞对肿瘤细胞的杀伤毒性 研究人员通过体外特异性刺激活化的方式，如在体外培养巨噬细胞时加入巨噬细胞集落刺激因子(Macrophage colony stimulating factor,M-CSF)，胞壁酰二肽(Muramyl dipeptide,MDP)等，来增强巨噬细胞的细胞毒性，运用过继转输的治疗手段实现抗肿瘤作用；或者通过静脉注射荷载免疫调节剂的脂质体增强巨噬细胞的杀伤活性[27]。Moyes等[28]通过基因改造的方式使巨噬细胞能够分泌可溶性TGF-βRⅡ，中和免疫抑制性细胞因子TGF-β的功能，从而减少肿瘤免疫抑制微环境对巨噬细胞功能的抑制作用。微生物制剂和病原体来源的分子可以激发巨噬细胞的抗肿瘤细胞毒性，如应用卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)治疗膀胱癌[2]。在体外试验中，BCG刺激巨噬细胞会增加巨噬细胞对某些膀胱癌细胞系的细胞毒性；此外，有证据表明BCG治疗的膀胱癌患者尿液中IL-6、IL-12以及TNF含量增高，有可能与巨噬细胞的功能增强有关[29]。sialyl-Tn(sTn)是一种受唾液酸转移酶ST6GALNAC1调控合成，并异常表达在膀胱癌细胞表面的O-linked糖链，Paula A.Videira和Fabio Dall′Olio的团队在研究sTn是否参与BCG治疗膀胱癌的免疫应答的过程中，构建了表达sTn的膀胱癌细胞系MCRsTn，发现BCG刺激可促进MCRsTn分泌IL-6和IL-8，这些细胞因子进一步刺激巨噬细胞产生大量的IL-6、IL-1β和TNF-α，增强巨噬细胞杀伤肿瘤细胞的作用[30]。

2.2诱导肿瘤相关巨噬细胞向M1型巨噬细胞分化 Daldrup-Link实验室的研究人员将ferumoxytol(纳米氧化铁)与肿瘤细胞同时注射给乳腺癌模型小鼠后，发现与只接种肿瘤细胞的对照组小鼠相比，注射ferumoxytol组小鼠的肿瘤细胞生长速度受到明显抑制。进一步研究发现，ferumoxytol和肿瘤细胞对巨噬细胞的募集有加和效应，此外，ferumoxytol可以促进巨噬细胞产生ROS，最令人兴奋的是ferumoxytol可以促进巨噬细胞向M1型极化，M1型巨噬细胞可以产生过氧化氢，与铁离子发生氧化反应后会产生高毒性的羟基基团，从而杀伤肿瘤细胞[31]。

临床前研究发现，对荷载人神经胶质母细胞瘤的小鼠异种移植模型进行BZL945(一种小分子CSF-1R抑制剂)治疗后，小鼠生存期限延长，肿瘤体积缩小并且生长速度减慢，同时由于使用CSF-1R抑制剂使得神经胶质瘤细胞产生粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony stimulating factor，GM-CSF)和干扰素γ(Interferon-γ，IFN-γ)促进了TAM的生存，使TAM表面M2型标志表达减少，巨噬细胞的表型由促肿瘤的M2型向抗肿瘤的M1型转变[32]。

许多针对CSF-1-CSF-1R通路的小分子药物和抗体拮抗剂已经进入临床前试验中，例如emactuzumab(RG7155)，与CSF-1R结合后使受体无法形成二聚体，从而不能活化信号通路。研究显示，应用emactuzumab治疗可以减少TAMs的数量并且提高CD8+∶CD4+T细胞在肿瘤中所占的比例。此外，Pexidartinib(PLX339)是一种可以口服的CSF-1R抑制剂，其临床第二阶段的实验结果显示该药物可以使腱鞘巨细胞瘤患者的病情得到缓解[33]。

2.3增强巨噬细胞提呈抗原能力，促进其他细胞抗肿瘤效应 Cai和Ma的团队设计了一种对氧化还原反应和pH双重应答的复合纳米多肽载体。该载体的核心是由PLL-PLC[n-butylamine-poly(L-lysine)-b-poly(L-cysteine)]连接半乳糖组成Gal-PLL-PLC(GLC)，带正电的PLL通过静电吸引将miR155包裹其中，PLC通过巯基自身发生交联形成氧化还原反应性二硫键增加纳米颗粒的稳定性，半乳糖则可以提高TAM对纳米颗粒的摄取能力，最后由连接DCA可卸载的PEG-PLL(sPEG)多聚物包裹形成sPEG/GLC纳米颗粒。sPEG具有电荷可逆性，在生理pH条件下保护阳离子核心不受外界侵扰，但在肿瘤微环境的酸性条件下，则会暴露颗粒核心并释放miR155。靶向TAM的miR155促使M2型巨噬细胞向M1型转化，上调M1型巨噬细胞标志(如IL-12、iNOS、MHCⅡ)并下调M2型标志(如Msr2、ArgⅠ)的表达，此外还能促进T细胞和NK细胞的活化，从而发挥抗肿瘤效应[34]。

经过基因改造可大量产生IL-21的巨噬细胞通过增强NK细胞和T细胞的增殖以及杀伤活性，提高其抗肿瘤的作用[28]。Th1细胞在巨噬细胞抗肿瘤过程中起着重要作用，Th1细胞产生的细胞因子可以刺激巨噬细胞成为潜在杀伤肿瘤的效应细胞。研究显示，在荷瘤小鼠局部注射或过继传输低剂量辐照后的巨噬细胞，可以促进iNOS+M1巨噬细胞分化，使内皮细胞活化并产生Th1相关细胞因子，进而募集细胞毒性T细胞并通过iNOS杀伤实体肿瘤细胞[35]。

3 总结与展望

将TAM作为恶性肿瘤靶向治疗目标的基础研究和临床前实验在全球如火如荼地进行，一些结果显示靶向巨噬细胞治疗肿瘤确实具有莫大的应用潜力。但是在这一研究进程中，仍有如下需要解决的问题：(1)目前对于体内TAM发挥活性的分子机制尚不清楚，人类TAM自身的异质性加之肿瘤微环境的作用使得不同表型的TAM具有不同的功能，无疑增加了研究的难度。现阶段的研究主要基于动物模型，实验结果在人体中能否重复尚属未知。

(2)将巨噬细胞作为抗击肿瘤的效应细胞在治疗过程中会伴随很多副反应的发生。针对CD47分子利用mAbs发挥巨噬细胞ADCC/ADCP活性的前期研究中，CD47分子的封闭常会导致贫血的发生，此外，在红细胞表面的CD47分子可以产生一个“抗原储存库”，这些抗原很容易与治疗抗体结合，使治疗抗体耗竭不能达到预期疗效[22]。

(3)研究中的一个重要手段就是通过基因改造的方式增强巨噬细胞功能。这种方式虽然可以额外赋予巨噬细胞多种功能，但是插入外源基因后可能会增加巨噬细胞致瘤的风险，改造后的巨噬细胞由于功能增强还会产生细胞因子风暴，造成机体严重损伤。

(4)巨噬细胞由于受自身特性限制，输注到体内后无法扩增，所以也限制其未来在临床中的广泛应用。Nico等选择使用慢病毒载体将染色质开放组件(cbx3-UCOE)以及锌指核酸酶介导的靶向表达盒插入人腺相关病毒整合位点1，从而使得诱导型多能干细胞(induced pluripotent stem cell，iPS)即使在成熟的CD14+单核细胞和CD11b+巨噬细胞中都能稳定持续地进行转基因表达[36]。Senju等[37]用针对Amyloidβ和CD20分子的单链抗体修饰iPS-MP，分别与含有靶分子的细胞作用，观察发现经单链抗体修饰后的iPS-MP能够与靶分子特异性结合并发挥更强的吞噬作用。这一研究成果为体外扩增巨噬细胞开辟了新的道路。

(5)肿瘤相关巨噬细胞与肿瘤相关炎症反应之间的关系同样需要引起关注。除了巨噬细胞自身所形成的炎性反应环境外，肿瘤微环境中还存在其他细胞及活性物质造成的炎性反应，在这一微环境中，除了M1/M2极化型巨噬细胞外，还存在功能表型并不确定的肿瘤相关巨噬细胞，这些巨噬细胞的产生机制及生理功能等都需要进一步的深入探索[38]。

综上所述，利用巨噬细胞抗肿瘤的研究已经取得了突破性进展，标志着与T细胞分属于不同免疫体系的巨噬细胞将成为恶性肿瘤免疫治疗新的研究对象和发展方向。

[1] Wynn TA,Chawla A,Pollard JW.Macrophage biology in development,homeostasis and disease[J].Nature,2013,496(7446):445-455.

[2] Mantovani A,Marchesi F,Malesci A,etal.Tumour-associated macrophages as treatment targets in oncology[J].Nat Rev Clin Oncol,2017,14(7):399-416.

[3] Lewis CE,Pollard JW.Distinct role of macrophages in different tumor microenvironments[J].Cancer Res,2006,66(2):605-612.

[4] Putoczki TL,Thiem S,Loving A,etal.Interleukin-11 is the dominant IL-6 family cytokine during gastrointestinal tumorigenesis and can be targeted therapeutically[J].Cancer Cell,2013,24(2):257-271.

[5] Ostuni R,Kratochvill F,Murray PJ,etal.Macrophages and cancer:from mechanisms to therapeutic implications[J].Trends Immunol,2015,36(4):229-239.

[6] Stanley ER,Chitu V.CSF-1 receptor signaling in myeloid cells[J].Cold Spring Harb Perspect Biol,2014,6(6):pii:a021857.

[7] Knutsdottir H,Condeelis JS,Palsson E.3-D individual cell based computational modeling of tumor cell-macrophage paracrine signaling mediated by EGF and CSF-1 gradients[J].Integr Biol (Camb),2016,8(1):104-119.

[8] Denardo DG,Brennan DJ,Rexhepaj E,etal.Leukocyte complexity predicts breast cancer survival and functionally regulates response to chemotherapy[J].Cancer Discov,2011,1(1):54-67.

[9] Mohamed MM,El-ghonaimy EA,Nouh MA,etal.Cytokines secreted by macrophages isolated from tumor microenvironment of inflammatory breast cancer patients possess chemotactic properties[J].Int J Biochem Cell Biol,2014,46:138-147.

[10] Noman MZ,Desantis G,Janji B,etal.PD-L1 is a novel direct target of HIF-1alpha,and its blockade under hypoxia enhanced MDSC-mediated T cell activation[J].J Exp Med,2014,211(5):781-790.

[11] Riboldi E,Porta C,Morlacchi S,etal.Hypoxia-mediated regulation of macrophage functions in pathophysiology[J].Int Immunol,2013,25(2):67-75.

[12] Barnett FH,Rosenfeld M,Wood M,etal.Macrophages form functional vascular mimicry channels in vivo[J].Sci Rep,2016,6:36659.

[13] Barton WA,Dalton AC,Seegar TC,etal.Tie2 and Eph receptor tyrosine kinase activation and signaling[J].Cold Spring Harb Perspect Biol,2014,6(3):pii:a009142.

[14] De Palma M,Naldini L.Angiopoietin-2 TIEs up macrophages in tumor angiogenesis[J].Clin Cancer Res,2011,17(16):5226-5232.

[15] Lewis CE,Harney AS,Pollard JW.The multifaceted role of perivascular macrophages in tumors[J].Cancer Cell,2016,30(1):18-25.

[16] Kurahara H,Takao S,Maemura K,etal.M2-polarized tumor-associated macrophage infiltration of regional lymph nodes is associated with nodal lymphangiogenesis and occult nodal involvement in pN0 pancreatic cancer[J].Pancreas,2013,42(1):155-159.

[17] Caux C,Ramos RN,Prendergast GC,etal.A milestone review on how macrophages affect tumor growth[J].Cancer Res,2016,76(22):6439-6442.

[18] Headley MB,Bins A,Nip A,etal.Visualization of immediate immune responses to pioneer metastatic cells in the lung[J].Nature,2016,531(7595):513-517.

[19] Ruffell B,Coussens LM.Macrophages and therapeutic resistance in cancer[J].Cancer Cell,2015,27(4):462-472.

[20] Biswas SK,Allavena P,Mantovani A.Tumor-associated macroph-ages:functional diversity,clinical significance,and open questions[J].Semin Immunopathol,2013,35(5):585-600.

[21] Soto-pantoja DR,Kaur S,Roberts DD.CD47 signaling pathways controlling cellular differentiation and responses to stress[J].Crit Rev Biochem Mol Biol,2015,50(3):212-230.

[22] Morrison C.Immuno-oncologists eye up macrophage targets[J].Nat Rev Drug Discov,2016,15(6):373-374.

[23] Wang Y,Xu Z,Guo S,etal.Intravenous delivery of siRNA targeting CD47 effectively inhibits melanoma tumor growth and lung metastasis[J].Mol Ther,2013,21(10):1919-1929.

[24] Feng M,Chen JY,Weissman-tsukamoto R,etal.Macrophages eat cancer cells using their own calreticulin as a guide:roles of TLR and Btk[J].Proc Natl Acad Sci U S A,2015,112(7):2145-2150.

[25] Overdijk MB,Verploegen S,Bogels M,etal.Antibody-mediated phagocytosis contributes to the anti-tumor activity of the therapeutic antibody daratumumab in lymphoma and multiple myeloma[J].MAbs,2015,7(2):311-321.

[26] Xu M,Liu M,Du X,etal.Intratumoral delivery of IL-21 overcomes anti-Her2/Neu resistance through shifting tumor-associated macrophages from M2 to M1 phenotype[J].J Immunol,2015,194(10):4997-5006.

[27] Wang H,Zhang L,Yang L,etal.Targeting macrophage anti-tumor activity to suppress melanoma progression[J].Oncotarget,2017,8(11):18486-18496.

[28] Moyes KW,Lieberman NA,Kreuser SA,etal.Genetically engineered macrophages:a potential platform for cancer immunotherapy[J].Hum Gene Ther,2017,28(2):200-215.

[29] Redelman-sidi G,Glickman MS,Bochner BH.The mechanism of action of BCG therapy for bladder cancer--a current perspective[J].Nat Rev Urol,2014,11(3):153-162.

[30] Severino PF,Silva M,Carrascal M,etal.Expression of sialyl-Tn sugar antigen in bladder cancer cells affects response to Bacillus Calmette Guerin (BCG) and to oxidative damage[J].Oncotarget,2017,8(33):54506-54517.

[31] Zanganeh S,Hutter G,Spitler R,etal.Iron oxide nanoparticles inhibit tumour growth by inducing pro-inflammatory macrophage polarization in tumour tissues[J].Nat Nanotechnol,2016,11(11):986-994.

[32] Pyonteck SM,Akkari L,Schuhmacher AJ,etal.CSF-1R inhibition alters macrophage polarization and blocks glioma progression[J].Nat Med,2013,19(10):1264-1272.

[33] Ries CH,Cannarile MA,Hoves S,etal.Targeting tumor-associated macrophages with anti-CSF-1R antibody reveals a strategy for cancer therapy[J].Cancer Cell,2014,25(6):846-859.

[34] Liu L,Yi H,He H,etal.Tumor associated macrophage-targeted microRNA delivery with dual-responsive polypeptide nanovectors for anti-cancer therapy[J].Biomaterials,2017,134:166-179.

[35] Klug F,Prakash H,Huber PE,etal.Low-dose irradiation programs macrophage differentiation to an iNOS(+)/M1 phenotype that orchestrates effective T cell immunotherapy[J].Cancer Cell,2013,24(5):589-602.

[36] Ackermann M,Kuhn A,Kunkiel J,etal.Ex vivo Generation of genetically modified macrophages from human induced pluripotent stem cells[J].Transfus Med Hemother,2017,44(3):135-142.

[37] Senju S,Haruta M,Matsumura K,etal.Generation of dendritic cells and macrophages from human induced pluripotent stem cells aiming at cell therapy[J].Gene Ther,2011,18(9):874-883.

[38] Biswas SK,Mantovani A.Macrophage plasticity and interaction with lymphocyte subsets:cancer as a paradigm[J].Nat Immunol,2010,11(10):889-896.