猪伪狂犬病的净化和防治措施

马 博 卜三平

（巴音郭楞职业技术学院，新疆库尔勒 841000）

伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）是引起猪伪狂犬病（Pseudorabies，PR）的病原，PRV属于疱疹病毒科、α疱疹病毒亚科中猪疱疹病毒Ⅰ型[1]。该病毒具有“噬神经性”，常沿神经干传播，在猪的脊髓和大脑中出现，这与病毒的TK基因有关；常伴有发热、脑脊髓炎、繁殖障碍等典型症状。猪是自然界中PRV的唯一宿主[2]，猪感染PRV后能引起脑脊髓炎症、自身发热，常引起妊娠母猪流产和仔猪死亡，且仔猪死亡率偏高，甚至有发病无一幸免的可怕程度[3]；牛、羊、犬、猫等多种动物感染PRV后，还会出现奇痒症状（猪除外）。PR在全球范围流行，根除难度大[4]，易感动物感染PRV后，会终生带毒，存在“不可逆转性”。世界动物卫生组织（OIE）将之列为B类动物传染病，我国将之列为二类动物传染病[5，6]，是进出口贸易的必检项目之一。

PR最早于1813年在美国被发现，1912年被定为一种独立的疾病。我国最早报道该病是在1947年，20世纪60年代该病毒出现流行，2011年我国曾大面积暴发该病，给养猪业带来巨大经济损失。自20世纪90年代，西方发达国家大多制定并启动了根除PR的计划。欧洲国家和我国均采用猪伪狂犬病病毒gE蛋白抗体ELISA检测法对猪群进行监测，以达到预防PR和净化猪场PRV的目的[7，8]。我国在《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020）》中将PR列为优先防治的动物疫病之一，也是种畜禽净化的重点疫病之一，规划中提出到2020年我国所有种猪场都要达到净化PR标准。

1 猪伪狂犬病的诊断

1.1 临床诊断方法

1.1.1 流行病学方面

中国工程院院士、华中农业大学教授陈焕春说：“科学证明疫苗不能清除病毒，只能阻止临床症状的发生。”PR虽然在各季节均可发生，但冬季多发，潜伏期为1周左右。妊娠母猪感染PRV后，常出现流产、木乃伊胎、弱胎甚至死胎；PRV感染后具有高度隐性的特点，可持续性感染，耐过的母猪可呈潜伏感染，长期带毒，严重影响养猪业发展[9]。2周龄以内的仔猪感染PRV后，可100%致死；断奶仔猪感染PRV后，死亡率可达20%。

病毒可在被感染动物的外周神经定植，常呈现终生潜伏感染，动物免疫力降低或受到刺激时，PR会再次暴发，而温暖季节的PR发病率较低。

1.1.2 临床症状

感染PRV后，公猪常表现为睾丸肿胀、萎缩，或者“一大一小”，严重影响种用价值；后备母猪和空怀母猪常表现返情率明显提高，影响繁殖效率；妊娠母猪常出现配种困难、流产、早产、产死胎、产木乃伊胎、受胎率下降、精神不佳等；日龄较小的仔猪常出现发热（40℃以上）、呕吐、拉稀，严重时出现共济失调、角弓反张、呼吸急促等症状，死亡率最高可达100%；育肥猪常为隐性感染，症状轻微，临床症状不明显[10]；多数发病的猪只伴有呼吸困难、体温升高、食欲不振等症状。

1.1.3 病猪解剖特点

感染PRV的猪群发病的共同特点是脑、脾脏、肠系膜淋巴结和肺组织出现不同程度的水肿，严重者可出现脑膜表面充血和脑颅腔、脊髓腔内积液的现象。肾脏颜色为土黄色，表面有出血点；有的脾脏除水肿外，还伴有针尖状坏死点；解剖发现，病猪也易出现肺脏表面出血和扁桃体坏死的现象。感染PRV的猪群会出现不同程度的呼吸道炎症。采集病猪的脾脏、肺脏和扁桃体等样品，经PCR鉴定PRV的gE基因和TK基因，多呈阳性。

1.1.4 PR鉴别诊断

集约化养殖带来了猪群养殖空间密集和传染病易群发的特点，也是导致猪群发生混合感染的原因之一，单靠以往的临床症状不易进行区分，给PR的诊断和预防带来了更大的困难，需要借助分子生物学技术进行准确判断。PR与猪细小病毒病、猪蓝耳病、布氏杆菌病、乙型脑炎等在流产、木乃伊胎、产死胎症状上相似；与猪肺疫、猪链球菌病、传染性胸膜肺炎、猪瘟、猪蓝耳病、猪圆环病毒病等在呼吸道症状上有相似之处；与猪瘟、仔猪水肿病、链球菌性脑膜炎等在神经症状上相似。

1.2 实验室诊断方法

生物化学实验室技术在现代生物学研究中发挥着重要作用，分子生物学就是其中非常重要的学科，主要利用核酸杂交、PCR等生物学技术进行疾病检测。病毒分离鉴定是诊断PRV最准确的方法，也是诊断方法中的标准方法；PRV的细胞谱较广，用于分离PRV的细胞较多，其中患病猪的脑部的PRV含量较高。血清学试验，如常见的ELISA试验、血清中和试验、乳胶凝集试验、血凝和血凝抑制试验，动物接种试验，如取含PRV的部位制成10%的细胞悬液，冻融几次后离心取上清液，在动物的皮下或者脑部进行接种，上述是实验室鉴定PRV的几种重要方法[11]。其中实验室较常见的是ELISA试验，具有操作简单、结果相对准确、检测样品容易获得和易从整体上评价猪群的免疫情况的特点，PCR试验因具有特异性强、准确度高、用时短的特点而得到广泛应用[12]。研究发现，PRV还可在一定程度上破坏宿主的免疫系统，干扰其机体产生免疫抗体[13]。

2 净化措施

PRV在猪群中具有一定的潜伏期，潜伏天一般为3～10天，易因应激而在猪群中暴发，且妊娠母猪和新生仔猪易感染，新生仔猪在出生后30天内最为易感，一旦感染，死亡率极高。PR严重威胁养猪业的发展，净化PR是一项意义重大的工作，不容忽视和懈怠。然而，PR在全国各地区的不同猪场中常有暴发，根除净化各猪场中PR具有一定的难度。猪场出现PR临床症状后，全群可进行弱毒苗紧急免疫接种，有望在1～2周内得到有效控制。同时，应在种猪场进行PR的根除计划，发现患病种猪要及时进行淘汰，并实行严格的消毒制度，避免更多猪群感染PRV。

2.1 建立健全行之有效的生物安全体系

生物安全体系是防控PRV进入猪场的第一道屏障，建立一套行之有效的生物安全体系并严格执行具有重要意义。

外来人员和车辆进行严格的消毒后才可进入场区，建议建设参观通道或者电子显示屏，使外来参观人员不进入圈舍就可观察到猪群的实时情况；严禁在猪场饲养其他动物，也要及时有效地驱散驱赶其他野生动物（如老鼠、野猫和犬等，这些动物容易传播PRV），避免动物之间互相传染疾病；出猪台往往是猪场比较容易忽视的地方，要及时对台面和支架进行严格的清洁和消毒工作，避免微生物在出猪台上的进一步滋生；必须建立清洁生产区和隔离生产区，安排人员打扫消毒，禁止员工出现串区的情况，加强消毒意识，减少各区之间疾病的传播；要严格按照相关规定对猪场内的用水进行检测和消毒，避免因水而引起的生物安全问题；在规模化猪场，全进全出和自繁自养是有效防控疾病的重要措施，被称为有效的保护屏障。严禁从疫区引进猪只和精液；从非疫区引进猪只和精液前，要做好严格的检测、消毒和隔离工作，避免携带病毒的外来猪群和生物制品进入。科学严格的消毒程序是另一道防止病原菌进入场区的有效措施，应该严格施行。对于病死的猪只要进行类似深埋的无害化处理，有条件的单位可在高压灭菌柜中高温高压灭菌后再进行处理。

2.2 净化原则和方法

常采用基因缺失苗来免疫猪群，通过检测gE抗体的情况监测某头猪是否被PRV野毒感染，及时淘汰感染的猪群。在进行猪群扩群时，必须选用无PRV感染的种猪。国内常使用的控制和净化PR的基本步骤如下：

先检测待净化PR的猪群，然后筛选出符合要求的猪群，使用PRV-gE基因缺失苗进行免疫；至少每个季度对猪群进行抽样检查或根据猪群大小进行全免，及时淘汰野毒感染PRV的病猪；对检出的健康猪群进行二次检测，提高准确度。

国外多个国家开展了PR根除计划，主要的方案为：检测和清群方案、后代隔离方案、销毁/重建方案[14]。我国也有成功实现净化PR的案例[15，16]。

2.3 种猪和种猪场根除PRV的措施

种猪场是猪场的核心，也是大型规模化养殖场效益好坏的“缩影”，因此种猪场的疾病预防工作更为重要，尤其是种公猪。对未免疫接种的猪群进行gE抗体检测，及时区分阴性个体和阳性个体，并对阴性个体每半年进行1次PRV-gE基因缺失苗免疫，定期进行血清学检测，确定最佳免疫时间，并及时淘汰阳性个体。逐渐淘汰PRV野毒感染的猪群，最终达到根除猪场PR的目的。

疫苗的有效免疫接种是控制和净化PR的有力保障。对已经免疫过的猪群每3～4个月进行1次PRV-gE基因缺失苗免疫（一般采用肌肉注射的方法），保证猪群PRV-gE抗体保持高合格率，起到有效抵御PRV感染的作用；每5～6个月进行1次血清学检测，筛选出PR阳性个体并淘汰；与此同时，也要及时淘汰生产性能不佳、免疫耐受的种猪。对欲留作种用的仔猪，在出生后3个小时进行PRV-gE蛋白检测，淘汰阳性个体。对配种前、产前1个月的种猪（母猪产前也要进行检测，以便侧面评价即将出生的仔猪的情况）要进行PRV-gE基因缺失苗的加强免疫；对仔猪进行全免，以防感染PRV。对于新引进的种猪，要严格执行引种检疫的制度，至少隔离3个月，并作ELISA检测PRV-gE蛋白抗体，确实安全才可合群。一般常检测出生后70～100日龄的猪群，因为仔猪PRV-gE母源抗体在65日龄左右降至最低，以此作为调查猪群野毒感染情况的有利依据。

3 小结

PR的净化不会一蹴而就，需要有步骤、有计划地开展，常根据PRV-gE抗体检测情况设计并实施净化。结合国内外临床经验发现，净化PR的整体思路是“检测—免疫—淘汰”[17，18]，做好监测淘汰。要想做到猪场PR的净化，进行检疫诊断、疫苗免疫、淘汰阳性动物、培养健康动物的综合净化措施是最为行之有效的，如此才能达到集约化高效健康养猪的目的。PR净化是全世界共同的话题和任务，需要互相合作，目前欧洲有些国家已经达到了净化PR的目的。加强猪场的饲养管理，改善饲养环境（如降低猪舍内的氨浓度，保持新鲜的空气，做到既保温又通风，适当降低饲养密度等措施），减少猪群应激，免疫接种PRV-gE基因缺失苗的综合预防措施是非常重要的，要按计划严格实施，以达到推动净化猪场PR的目的，并实现一定的社会效益、经济效益和生态效益。