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应用原位杂交技术定位木薯中的木薯褐条病毒

2018-01-17谢龙莲

世界热带农业信息 2018年11期
关键词:原位杂交染病灵敏

木薯褐条病(CBSD)是由马铃薯Y病毒家族的两种RNA病毒--木薯褐条病毒(CBSV)和乌干达木薯褐条病毒(UCBSV)引起的,分子和血清学方法可用于定量检测和鉴定染病植株中的木薯褐条病毒(CBSV)。但是,还没有可靠的方法精确定位病毒RNA在染病寄主组织中的分布位置。由此,卢旺达科研人员开发了一种可以对植物组织中的CBSV病毒RNA进行灵敏检测和定位的RNAscope(R)原位杂交(ISH)检测方法,该方法最初是在实验宿主黄花烟草(Nicotiana rustica)中开发出来的,而后进一步应用于木薯。在无背景和杂交信号的情况下,在未感染组织切片中实现了CBSV病毒RNA的灵敏和特异性检测,而CBSV病毒RNAs的组织嗜性在烟草和木薯中表现出明显的差异性。该研究为烟草和木薯中的CBSV病毒提供了一种灵敏、稳定的检测方法,还将用于研究不同木薯基因型中CBSV病毒的趋向性,以及单一和混合感染中CBSV病毒与木薯的相互作用。

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