两种检测方法在检测G6PD活性中的应用对比

吴 燕

广东省河源市妇幼保健院，广东河源 517000

两种检测方法在检测G6PD活性中的应用对比

吴 燕

广东省河源市妇幼保健院，广东河源 517000

目的通过两种方法对G6PD的活性进行检测，通过对比该两种检测方法的异同性，总结其相关性。方法抽取我院2016年1～3月期间进行G6PD活性检测的100例新生儿进行实验对比研究，分别都用比值测定法和还原试验检测法测定G6PD的活性，分析检测情况。结果还原试验检测法中，100例新生儿53.0%为阴性，47%为阳性。而比值检测法中，有55.0%为阴性，45%为阳性，两种检测方法检测结果比较差异无统计学意义（P＞0.05）。100例新生儿中，通过还原试验检测法与G6PD比值检测法检测结果不同的有2例，均为女性新生儿，该2例通过G6PD比值检测法测定G6PD/6PGD比值处于正常范围内，分别为1.15、1.19，而该2例经过还原试验检测法还原率均异常。结论高铁白红蛋白还原试验检测法与上生化机G6PD比值检测法均存在一定优势，但其二者也存在不足，所幸其不足可相互补充。因此，为了在临床检测中快速获取结果，可将其进行结合共同检测。

G6PD活性；比值测定法；高铁血红蛋白还原试验；新生儿

R722.1

A

2095-0616（2018）01-149-03

Comparison of two detection methods in detection of G6PD activity

WU Yan
Maternal and Child Health Care Institute of Heyuan City,Guangdong Province,Heyuan 517000,China

ObjectiveTo detect the activity of G6PD by two methods,and to sum up its correlation by comparing the similarities and differences of the two methods.MethodsOne hundred newborns with G6PD activity were selected from January to March,2016.The activity of G6PD was detected by ratio test and reduction rate test,and the detection situation was analyzed.ResultsIn the reduction test,53.0% of 100 newborns were negative and 47% were positive.In the ratio test,55.0% were negative and 45% were positive.There was no significant difference between the results of the two detection methods (P＞0.05).Of the 100 newborns,two cases were found to be female newborns by the reduction test and the G6PD ratio test.In the 2 cases,the ratio of G6PD1/6PGD was measured in the normal range by G6PD ratio test,which was 1.15 and 1.19,respectively.The reduction rate of the 2 cases by the reduction test was all abnormal.ConclusionThere are some advantages between the high iron hemoglobin reduction test and the upper biochemical machine G6PD ratio test,but they also have shortcomings,but their shortcomings can complement each other.Therefore,in order to get the results quickly in the clinical test,it can be combined together to detect the results.

G6PD activity;Ratio determination method;High iron hemoglobin reduction test;Newborn

G6PD活性检测是为了筛选出G6PD缺乏的新生儿，G6PD缺乏是一种常见的遗传性酶缺乏病[1]，据统计数据记载，目前的世界人口中约有2亿人检测出G6PD缺乏。而我国是G6PD缺乏的高发区，其患病的概率为0.2% ～ 44.8%。根据地域分布研究发现，长江以南的海南、广东、广西、云南、贵州、四川等省发病率较高[2]。但G6PD缺乏是因G6PD的基因突变，使其酶活性降低，同时其红细胞因不能抵抗外界的氧化损伤而破坏，引起了溶血性贫血[3]。目前，我院对G6PD活性检测的方法有高铁白红蛋白还原试验检测法与上生化机G6PD比值检测法，为了分析这两种检测法中的相关性，本文以2016年1～3月期间进行G6PD活性检测的新生儿进行实验对比研究，分析其检测结果及其相关性[4-5]。现作如下报道。

1 资料与方法

1.1 一般资料

抽取我院2016年1～3月期间进行G6PD活性检测的100例新生儿进行实验对比研究，其中男68例，女32例，且其均为一个月内出生的新生儿。日龄 8h～ 30d，平均（11.8±1.2）d。

1.2 方法

高铁白红蛋白还原试验检测法：a.抗凝全血混匀后，吸取全血细胞200uL加入到加有20μL1.25%亚硝酸钠（北京化工厂北京试剂）-5%葡萄糖（广东西陇化工厂）及0.004mol/L美兰混合液（广州化学试剂厂）（两者等比例混合）试管中，充分混匀，加塞，置于37℃水浴箱3h；b.取出后摇匀，吸取此液100μL，加于0.02mol/L磷酸盐缓冲液（天津市北联精细化学品开发有限公司）10mL中，2min后于波长634nm处比色，测其吸光度S△；c.吸取未加上述试剂但同样保温的血液100μL，加于0.02mol/L磷酸盐缓冲液10mL中，2min后按上法进行比色，测其吸光度为B，再于此液内加入1.25%亚硝酸钠-5%葡萄糖液1滴，摇匀，5min后同样方法测其吸光度为St[6]。

上生化机G6PD比值检测法：抗凝全血混匀后，吸取全血细胞20μL加入到1mL样品处理液中约1 ～ 2min后充分混匀上机测定，待测定时间不得超过25min[7]。

1.3 仪器及试剂

日立7180、723N可见分光光度计、广州科方G6PD测定试剂盒（比值法）、0.004mol/L美兰工作液、1.25%亚硝酸钠-5%葡萄糖液、0.02mol/L磷酸盐缓冲液、黄色ACD抗凝管[8]。

1.4 观察指标

记录受体G6PD活性检测的精确度，以及两种检测方法的相关性。

1.5 统计学处理

采用统计学软件SPSS19.0版对数据进行统计分析，计量资料采用（x±s）表示，采用t检验，计数资料采用百分数（%）表示，采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两种检测方法检测结果分析

还原试验检测法中，100例新生儿53.0%为阴性，47%为阳性。而比值检测法中，有56.0%为阴性，47%为阳性，两种检测方法检测结果比较差异无统计学意义（χ2=0.184，P＞ 0.05）。见表 1。

表1 两种检测方法检测结果分析[n（%）]

2.2 两种检测方法不相符情况分析

100例新生儿中，通过还原试验检测法与G6PD比值检测法检测结果不同的有2例，均为女性新生儿，该2例通过G6PD比值检测法测定G6PD/6PGD比值处于正常范围内，分别为1.15、1.19，而该2例经过还原试验检测法还原率均异常。

3 讨论

G6PD缺乏的临床症状与普通溶血性贫血的临床症状大致相同，该病在临床表现的症状不同，女性杂合子患者处于不发病时期时，其无明显自觉症状，但部分患者会出现慢性的溶血性贫血症状，如果在此期间有食用蚕豆、或服用、接触某些药物会诱发血红蛋白尿、黄疸、贫血等急性溶血反应[9-10]。同时，因G6PD缺乏可诱发严重急性溶血性贫血，若得不到及时处理，会引起患者肝、肾、或心功能衰竭，严重时甚至会导致死亡[11]。例如，广东兴宁地区60年代时曾爆发G6PD缺乏症，该病症的流行是因其当地处于蚕豆收获的季节，该诱因导致了许多G6PD缺乏患者死亡[12]。此外，G6PD缺乏还是新生儿病理性黄疸的主要诱因，据统计表明，患有G6PD缺乏症的新生儿中，约有50%的患儿出现新生儿黄疸，其中约12%可发展为核黄疸，导致脑部损害，引起智力低下[13]。

还原试验检测法中，100例新生儿53.0%为阴性（还原率正常），47%为阳性（还原率为30%～70%）。而比值检测法中，有55.0%为阴性（比值＞1.10），45%为阳性，两种检测方法检测结果比较差异无统计学意义（P＞0.05）。说明以上两种检测方法在G6PD活性检测中效能基本相同，均可作为临床检测G6PD活性的手段。通过对两种检测方法不相符情况分析，两种检测方法存在不符情况的受检者均为女性新生儿，G6PD比值处在临界范围，分别1.15、1.19，出现这一结果可能与女性杂合子有关，也可能是试剂本身检测时存在误差所致。因此在新生儿G6PD活性检测中，女性新生儿通过G6PD比值检测法测定后比值在临界范围内，应进一步进行高铁白红蛋白还原试验检测法检测，若还出现不相符情况，应对其进一步进行基因诊断，以确保检测结果的准确性，避免出现漏诊、误诊的检测结果，从而有利于对G6PD缺失的新生儿作进一步防治护理[14-15]。同时，在G6PD缺乏症高发的地区做好检测筛查工作，对提高新生儿健康水平及治疗效果具有重要的社会及经济价值。因此，可将两种检测方法相结合应用，以防出现漏误诊情况。

综上所述，比值法与还原试验法相比，比值法在检测G6PD缺乏症的结果中，具有更高的准确率。同时，还可以缩短G6PD活性的检测时间，具有更好的检测价值，值得在G6PD活性临床检测中推广。高铁白红蛋白还原试验检测法与上生化机G6PD比值检测法均存在一定优势，为了在临床检测中快速获取结果，可将其进行结合共同检测。两种在检测G6PD活性中的检测方法的结合成为临床G6PD活性检测的发展趋势。

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2017-11-13）