溃疡性结肠炎不同中医证型血清细胞因子相关研究

陈 亮，杨 芳，景 姗

（南京中医药大学附属南通市中医院脾胃病科，江苏 南通 226001）

论 著

溃疡性结肠炎不同中医证型血清细胞因子相关研究

陈 亮，杨 芳，景 姗

（南京中医药大学附属南通市中医院脾胃病科，江苏 南通 226001）

R256.347.462

B

1004-2814（2017）12-1348-03

南通市卫计委青年基金（WQ2014057）

景 姗

目的：观察溃疡性结肠炎不同中医证型血清中细胞因子的变化，探讨其内在相关性。方法： 77例不同中医证型溃疡性结肠炎辨证分型为大肠湿热证18例，脾虚湿热证17例，肝郁脾虚证20例，脾肾阳虚证12例，寒热错杂证10例，正常组20例，观察血沉（ESR）、疾病活动指数（DAI）的变化，酶联免疫法（ELISA）检测血清血管活性肠肽（VIP）、表皮生长因子（EGF）、血管内皮生长因子（VEGF）的水平。结果：与正常组比较，各证型组血沉、DAI均升高（P＜0.05）；血清中VIP在大肠湿热证、脾肾阳虚证中均降低（P＜0.05），脾虚湿热证、寒热错杂证升高（P＜0.05）；血清EGF、VEGF在各组均升高（P＜0.05），以大肠湿热证、脾虚湿热证升高显著。结论：溃疡性结肠炎不同中医分型与VIP、EGF、VEGF的表达具有一定相关性。

溃疡性结肠炎；中医证型；VIP；EGF；VEGF

Objective：To observe the changes of cytokine in serum of different TCM syndromes of ulcerative colitis and study their inherent relevance. Method: 77 cases of different TCM syndromes of ulcerative colitis patients were divided into 18 cases of large intestine damp-heat syndrome group, 17 cases of spleen- deficiency damp-heat syndrome group, 20 cases of liverstagnation group and spleen-deficiency syndrome group, 12 cases of Yang deficiency of spleen and kidney group, 10 cases of cold-heat complex syndrome group and 20 cases of normal group. The changes of ESR and DAI were observed. The level of VIP,EGF and VEGF was examined by ELISA method. Result: Compared with that of the normal group, the ESR and DAI of the other groups all increased （P＜0.05）. VIP in serum of large intestine damp-heat syndrome group and Yang deficiency of spleen and kidney group decreased（P＜0.05）while that of spleen- deficiency damp-heat syndrome group and cold-heat complex syndrome group increased （P＜0.05）. EGF and VEGF in serum of each group increased （P＜0.05）. Among them, the increase of large intestine damp-heat syndrome group and spleen- deficiency damp-heat syndrome group was the most significant. Conclusion:Different TCM syndromes of ulcerative colitis have certain relevance to the expression of VIP, EGF and VEGF.

ulcerative colitis；TCM syndrome；VIP; EGF；VEGF

溃疡性结肠炎（UC）是肠道的慢性非特异性炎症性疾病，是以侵及结肠黏膜且以溃疡为主的慢性非特异性炎症性肠病［1］。本研究观察血清中部分细胞因子在不同中医证型中的表达变化，以期提高中医证型分类的准确性，进一步建立更加完善的中医疗效评价体系。

1 临床资料

共77例，均为2014年7月至2016年3月我院脾胃病科门诊及住院部收治的不同中医证型的溃疡性结肠炎患者。大肠湿热证18例，男10例、女8例，平均年龄（46.3±8.2）岁；脾虚湿热证17例，男8例、女9例，平均年龄（47.1±9.3）岁；肝郁脾虚证20例，男10例、女10例，平均年龄（47.5±8.6）岁；脾肾阳虚证12例，男5例、女7例，平均年龄（46.6±8.3）岁；寒热错杂证10例，男6例、女4例，平均年龄（47.3±7.4）岁。疾病严重程度为轻度49例，中度28例。对照组为健康人群20例，男10例、女10例，平均年龄（46.9±7.3）岁。

中医诊断标准：参照2009年中华中医药学会脾胃病分会“溃疡性结肠炎中医诊疗共识意见”［2］。辨证分为大肠湿热证、脾虚湿热证、肝郁脾虚证、脾肾阳虚证、寒热错杂证。

西医诊断标准：参照《对我国炎症性肠病诊断治疗规范的共识意见》（中华医学会消化病学分会炎症性肠病协作，2007年）［3］。

纳入标准：参照“国家中医药管理局‘十一五’重点专科协作组久痢（溃疡性结肠炎）诊疗方案”和2009年中华中医药学会脾胃病分会“溃疡性结肠炎中医诊疗共识意见”。①诊断明确，第1诊断为痢疾（溃疡性结肠炎）；②患者愿意配合相关检查；③疾病分度属于轻、中度。

排除标准：合并严重心、肝、肾疾病或者妊娠、哺乳期，1个月内已应用磺胺吡啶类、糖皮质激素类和免疫抑制剂治疗，凝血功能异常或有出血倾向，伴有糖尿病、高血压病、冠心病、自身免疫性疾病、肿瘤。

2 观察方法

血沉（ESR）检测：采集空腹血样进行全血检测。

疾病活动指数（DAI）：根据Sutherland疾病活动指数表进行计算评分。小于2分为症状缓解，3～5分为轻度活动，6～10分为中度活动，11～12分为重度活动。

血清VIP、EGF、VEGF水平检测：收集患者及健康人群清晨空腹的外周静脉血5～6mL，2500r/min离心10min，分离血清，取其上清液，并置于-80℃冰箱中保存，ELISA法统一检测（试剂盒均由深圳晶美生物工程公司提供）。

用SPSS19.0进行统计分析，计量资料用（±s）表示、采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

3 检 测

各组ESR及DAI比较见表1。

表1 各组ESR及DAI比较 （±s）

表1 各组ESR及DAI比较 （±s）

注：与对照组比较，*P＜0.05。

组别 例 ESR（mm/h） DAI（分）大肠湿热证 18 16.24±6.32** 8.4±3.3**脾虚湿热证 17 14.18±6.45** 6.0±3.1**肝郁脾虚证 20 11.82±4.23* 4.6±2.5**脾肾阳虚证 12 10.10±3.24* 3.9±1.9*寒热错杂证 10 11.44±4.87* 4.7±2.5*对照组 20 6.61±3.12* 1.4±0.6

各组EGF、VEGF、VIP指标比较见表2。

表2 各组EGF、VEGF、VIP指标比较 （ng/L，±s）

表2 各组EGF、VEGF、VIP指标比较 （ng/L，±s）

注：与对照组比较，*P＜0.05；与大肠湿热证比较，#P＜0.05；与脾虚湿热证比较，△P＜0.05。

组别 例 EGF VEGF VIP大肠湿热证 18 396.37±149.42* 579.67±157.94* 23.06±14.53*△脾虚湿热证 17 248.18±115.18*# 437.23±127.46* 54.18±23.87*#肝郁脾虚证 20 83.95±63.89#△ 279.74±157.89#△ 33.8±24.24△脾肾阳虚证 12 54.02±25.55#△ 220.93±78.34#△ 15.84±4.9*△寒热错杂证 10 70±29.57#△ 236.82±74.01#△ 56.27±18.67*#对照组 20 36.84±11.34#△ 123.07±80.32#△ 39.97±12.93#△

4 讨 论

溃疡性结肠炎主要表现为腹痛、腹泻、黏液脓血便、里急后重等症状，属中医“痢疾”。症状不典型者仅表现为腹泻，大便次数多，粪质清稀，属中医“泄泻”范畴［4］。病因病机为湿热或饮食所伤、情志不畅、劳倦过度致脾气受损。湿从内生，湿滞日久，多从热化，湿热熏蒸，壅滞肠间，传导失司，与气血相搏结，损伤血络，气凝血滞，血败肉腐，内溃成疡，日久正虚邪恋。所以湿邪内蕴，气血壅滞，脾气亏虚乃发病的关键。湿邪内蕴为其标实，脾气亏虚为其本虚，二者互为因果［5］。致理因素较多，中医证型各异。研究发现，大肠湿热证、脾虚湿热证ESR表达及DAI评分较其他证型高，证明主要致病因素是湿邪内蕴，郁而化热。

EGF存在于很多组织中，特别是在胃肠道肠道组织中含量最高，EGF是一种有丝分裂刺激原，它可以促进上皮细胞、成纤维细胞等多种细胞的分裂增殖，同时可阻止氧化剂诱导的肠黏膜损伤或功能降低，对维持肠黏膜的完整性及其功能具有重要作用［6］。研究表明，UC患者在病理状态下EGF会明显升高，这是机体黏膜自身修复能力的体现，研究发现各证型组EGF均显著升高，尤以大肠湿热证与脾虚湿热证明显，可以推测两证型在UC病情进展中往往炎症较明显，反馈性地促进肠黏膜的修复［7-8］。

VEGF早期亦称作血管通透因子，是血管内皮细胞特异性的肝素结合生长因子，可在体内诱导血管新生，能直接作用于血管内皮细胞促进血管内皮细胞增殖，增加血管通透性［9］，其在正常的肠黏膜组织中几乎不表达，而在活动性UC组织的上皮细胞和炎性细胞中表达明显增加，VEGF可能在UC中发挥着重要的调节作用［10］。本研究发现，UC血清中VEGF的表达显著高于正常组，推测VEGF的表达增强可以加速血管及内皮细胞的新生，微血栓大量形成，加重肠道黏膜损伤，进一步加重病情。研究发现，大肠湿热证与脾虚湿热证VEGF升高尤其明显，与病情及ESR、DAI的表达也表现出较强的一致性。

VIP在胃肠道主要分布在黏膜固有层和肌层神经纤维，可作为神经递质、免疫调节剂及炎症介质参与多种肠道生理及病理过程［11］。主要分布于黏膜固有层和肌层神经纤维，有血管舒张、抗炎作用、免疫抑制、激素分泌和平滑肌舒张等作用。在抗原刺激作用下，VIP主要由Th2细胞产生，VIP促进Th2型反应，抑制Thl型反应， UC患者的结直肠中VIP的含量与对照组比较明显下降，而且VIP的下降与黏膜炎症程度有相关性，表明VIP在黏膜含量的降低能够反映局部的炎症程度和疾病的活动度［12］。本研究发现，大肠湿热证、脾肾阳虚证血清中VIP表达水平明显低于其他各证，脾虚湿热证、寒热错杂证患者血清中VIP表达水平明显高于其他各证，具有明显的证型相关性，其表达的高低可能与正气和外邪之间的平衡有关。

综上所述，大肠湿热证与脾虚湿热证UC患者血清中EGF及VEGF 蛋白水平明显高于其他组与正常人群，大肠湿热证、脾肾阳虚证血清中的VIP表达水平明显低于其他各证，脾虚湿热证血清中VIP表达水平明显高于其他各证，具有明显的相关性。检测UC患者血清中VIP、EGF及VEGF的表达水平，可作为判断UC病情轻重及临床症候类型的依据。VIP作为结肠活性肠肽在UC中具有双重作用，炎症刺激使其减少，但经过正反馈表达又会明显增加，而在正虚为主的患者血清中表达又明显减少，故VIP表达水平可作为判断正邪偏盛的一个指标。

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2017-08-12