榆生离褶伞生物学特性测定

王 琴，栾庆书*，姜 旭，邱 红，白慧敏，姜 韬，赫 亮

（1.辽宁省林业科学研究院，辽宁沈阳 110032；2.辽宁省生态实验林场，辽宁朝阳 122000；3.辽宁省林业调查规划院，辽宁沈阳 110122）

榆生离褶伞生物学特性测定

王 琴1，栾庆书1*，姜 旭1，邱 红2，白慧敏3，姜 韬3，赫 亮1

（1.辽宁省林业科学研究院，辽宁沈阳 110032；2.辽宁省生态实验林场，辽宁朝阳 122000；3.辽宁省林业调查规划院，辽宁沈阳 110122）

该文对采自沈阳棋盘山油松林榆生离褶伞Lyophyllum ulmarium进行生物学特性和扩繁基质的研究，结果表明：榆生离褶伞菌丝最适生长温度在20～25℃，在pH值5～6的偏酸培养基上生长较好；10种供试碳源中，菌丝在蔗糖、麦芽糖为碳源的培养基上生长良好，能利用半乳糖，不能利用甘油、甘露醇；10种供试氮源中，菌丝在酵母汁、牛肉膏为氮源的培养基上生长最好，能够利用供试铵态氮，但对硝态氮利用不是很好；在腐熟木屑80%+麦麸20%上培养60 d能产生子实体原基。

榆生离褶伞；生物学特性；扩繁

榆生离褶伞Lyophyllum ulmarium，别名榆干离褶伞、榆干侧耳、大榆蘑榆、榆干玉蕈、对子蘑等，菌肉肥厚，香味浓郁，营养丰富，味道鲜美，是一种珍贵的野生食用菌。研究还表明榆生离褶伞具有抗氧化[1]、保肝[2]、溶栓作用[3]和保护血管内皮细胞[4]功效，具有极高的药用价值。榆生离褶伞主要分布在河北、辽宁、黑龙江和吉林等地，夏秋季生于阔叶林或混交林中，因味道鲜美、营养丰富、药食兼用，可作为筛选驯化栽培的食用菌考虑。目前，榆生离褶伞主要靠野生采集食用，资源有限。本文研究榆生离褶伞的生物学特性和扩繁基质，为此菌的人工驯化提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

榆生离褶伞子实体采自沈阳棋盘山油松林下，经金若忠研究员根据形态特征及显微结构鉴定为榆生离褶伞。通过组织分离后获得菌种。供试菌株在基础培养基平板上25℃下培养10 d，用于生物学特性测定。

1.2 培养基质

1.2.1 基础培养基

葡萄糖20 g，牛肉膏2 g，MgSO40.5 g，KH2PO40.5 g，K2HPO40.5 g，VB110 mg，琼脂20 g，蒸镏水1 000 mL。

1.2.2 固体扩繁培养基

在果酱瓶内，分别装上①玉米粒；②小米；③小麦粒；④多年腐熟的木屑80%和20%麸子；⑤草炭78%+麦麸20%，拌好料后装入罐头瓶内高压灭菌，晾凉待用。

1.3 温度对菌丝生长的影响

将菌饼（直径0.5 cm）接入基础培养基平板正中，分别置于5℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃的恒温培养箱中培养，每处理重复3次。每隔24 h用十字交叉法测量菌落直径，计算平均生长速度，并观察菌落形态、菌丝长势和菌丝生长速度。

1.4 pH值对菌丝生长的影响

用1 N的NaOH和1 N的HCl调节基础培养基pH值分别为4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0共7个梯度。将菌饼接入不同pH梯度的培养基平板中。接种、培养、测量方法同1.3。

1.5 碳源对菌丝生长的影响

分别以20 g的葡萄糖、蔗糖、乳糖、半乳糖、淀粉、麦芽糖、甘露醇、甘油、蜂蜜、果糖代替基础培养基中的葡萄糖作为碳源，并设无碳对照。接种、培养、测量方法同1.3。

1.6 对氮源利用的测定

分别以2 g的蛋白胨、硝酸钠、硝酸钾、硝酸铵、氯化铵、硫酸铵、尿素、营养肉汤、牛肉膏和酵母汁代替基础培养基中的牛肉膏作为氮源，并设缺氮对照。接种、培养、测量方法同1.3。

1.7 固体扩繁培养

拌好的固体扩繁培养料，装入500 mL的玻璃瓶内高压灭菌，凉后接入已备好的相同大小的供试菌苔，每菌种装10瓶，置25℃下培养，观察菌丝定殖及生长速度。

2 结果与分析

2.1 不同温度的影响

不同温度对榆生离褶伞菌丝生长的影响见表1，表1数据表明榆生离褶伞菌丝在5～25℃均可生长，30℃停止生长。最适生长温度范围20～25℃，最适生长温度是20℃。5～15℃低温下生长较慢，易被污染。

表1 不同温度对菌丝生长速度的影响

2.2 不同pH值的影响

供试的菌株菌丝在pH值4～10均可生长，pH值5～6时生长速度较快且浓密、粗壮，最适pH值为5（表2）。

表2 培养基pH值对菌丝生长的影响

2.3 对碳源的利用

榆生离褶伞在10种供试碳源培养基上生长情况不同（表3）。从菌丝生长速度上看，该菌株在半乳糖、麦芽糖和蔗糖培养基上生长速度最快，其中在蔗糖和麦芽糖培养基上，菌丝更为浓密、健壮，菌落较厚。菌丝在甘油、甘露醇培养基上的生长速度及菌落形态与无碳对照接近，均为菌丝稀疏、菌落稀薄。

2.4 对氮源的利用

榆生离褶伞在酵母汁、牛肉膏培养基上生长最好，表现为菌丝健壮、长速快、长势好，菌落均匀、厚密、边缘整齐（表4）；其次在硫酸铵、氯化铵、硝酸铵、营养肉汤培养基上，菌丝生长较快。从长势上看，在3种铵盐上菌株菌落较厚密，比在营养肉汤上长势好；在硝酸钠、蛋白胨上长势与无氮对照基本相同；在尿素和硝酸钾培养基上基本不长。

表3 碳源对菌丝生长的影响

表4 榆生离褶伞在不同氮源上的生长情况

2.5 固体扩繁培养

供试的基质中，腐熟木屑80%+麦麸20%是最适合的固体扩繁培养基质，经过2个月培养，榆生离褶伞菌丝可长满玻璃瓶，甚至出现子实体原基（图1）。其次为草炭78%+麦麸20%基质，菌丝可以长满玻璃瓶。在纯玉米、纯小米基质上，菌丝能生长，2个月长满瓶口表面，吃料速度慢。在纯小麦培养基上，菌丝不能定殖、生长，最终接入的菌块干缩死亡。

图1 榆生离褶伞子实体原基

3 小结

本试验测试了来自沈阳棋盘山油松林下1株榆生离褶伞菌株的生物学特性。榆生离褶伞菌丝最适生长温度范围20～25℃，在pH值5～6的偏酸培养基上生长较好；在蔗糖、麦芽糖为碳源的培养基上生长良好，能够利用半乳糖，不能利用甘油、甘露醇；在酵母汁、牛肉膏为氮源的培养基上生长最好；能够利用铵态氮，但对硝态氮利用不是很好；在腐熟木屑80%+麦麸20%上培养60 d能产生子实体原基。

［1］孙权，沈玉秀，沈明花.榆干离褶伞发酵液体外抗氧化性能研究[J].食品科技，2010(1):223-225，229.

［2］金梅花，沈玉秀，沈明花.榆干离褶伞发酵液对急性肝损伤的保护作用[J].食品科技，2010(4):78-80.

［3］沈明花，彭瀛，宋晓琳.榆干离褶伞发酵液的溶栓与降血脂作用[J].食品与发酵工业，2011(10):28-30.

［4］彭瀛，周广亮，沈明花.榆干离褶伞发酵液对血管内皮细胞的保护作用[J].食品与生物技术学报，2014(2):177-180.

Studies on biological characteristic of Lyophyllum ulmarium

WANG Qin1,LUAN Qingshu1*,JIANG Xu1,QIU Hong2,BAI Huimin3,JIANG Tao3,HE Liang1
（1.Liaoning Academy of Forestry Science,Shenyang 110032,China;2.Liaoning Ecological Experimental Forest Farm,Chaoyang 122000,China;3.LiaoningForestryInvestigationandPlanningInstitute,Shenyang110122,China）

A strain ofLyophyllum ulmariumwas collected underPinus tabulaeformisforest in the Qipan Mountain of Shenyang City and biological characteristics of the strain were studied.The results indicated:Lyophyllum ulmariummycelium grew well between 20～25℃,and at pH value ranging from 5 to 6;sucrose and maltose were suitable carbon sources for mycelium growth,lactose and honey were not suitable carbon sources for mycelium growth.Lyophyllum ulmariummycelium could make good use of organic nitrogen(yeast juice,nutrient broth,beef paste)and ammonium nitrogen,but could not use of nitrate nitrogen.Fruit body primordium occurred 60 d after the mycelium cultivated in substrate composed of rotten sawdust 80%+wheat bran 20%.

Lyophyllum ulmarium;biological characteristics;expanding propagation

S759.81

A

1001-1714（2017）06-0006-03

2017-05-11

辽宁省博士启动基金（2011143）。

王琴（1981-），女，高级工程师，主要从事森林病害和食用菌栽培研究。E-mail:wqdora@163.com。*通讯作者：栾庆书（1963-），女，教授级高级工程师，主要从事森林保护工作。E-mail:luanqingshu@163.com。

苑 辉)