化学发光免疫法在甲胎蛋白患者中的检测效果及对结果的影响研究

钟燕

（上海市普陀区曹杨街道社区卫生服务中心检验科，上海 200062）

化学发光免疫法在甲胎蛋白患者中的检测效果及对结果的影响研究

钟燕

（上海市普陀区曹杨街道社区卫生服务中心检验科，上海 200062）

目的探究化学发光免疫法在甲胎蛋白患者中的检测效果及对结果的影响。方法使用化学免疫自动分析仪器对含有甲胎蛋白的血清进行检测，此过程中要开展测量范围验证与最大可允许稀释度两项实验，建立科学的可报告范围，服务于临床检测工作。结果测量范围为每毫升0.00 mg-912 mg，最大允许稀释度为1:50，实验测量值均值基本上符合分析仪灵敏度说明的数据。结论临床检验医师采用化学发光免疫法检测甲胎蛋白，可准确测定甲胎蛋白的测定范围及最大可允许的稀释度，为建立临床报告范围提供参考。

化学发光免疫法；甲胎蛋白；检测效果

近几年化学发光免疫分析技术飞速发展，因其简便、快速、无污染、自动化水平高等特点被广泛应用于社区卫生服务中心。肿瘤标志物的最小浓度具有十分重要的意义，严重影响着临床病情的判断[1]，本文以甲胎蛋白为例，以社区卫生服务中心的就诊患者的具体情况对化学发光免疫法在甲胎蛋白（AFP）患者中的检测效果及对结果的影响进行研究分析，对厂家声明的全自动发光仪的检验底限（LLD），进行验证并建立对定量报告具有重要意义的生物检测（BLD）及功能灵敏度（FS），现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 该实验研究所用的检验仪器为贝克曼ACCESS II全自动化学发光仪，此外还包括配套校准物质、AFP试剂和质控产品。将AFP配套稀释液作为空白样品，低浓度校准品作为原始样品。用空白样品对原始样品做系列稀释（浓度依次为1.06 ng/mL、1.32 ng/mL、1.76 ng/mL、2.65 ng/mL、3.53 ng/mL、5.29 ng/mL），若检测结果显示低浓度样品比预期检测限度低，则将这些系列样品做为检测全自动化学发光仪灵敏度的实验样品。

1.2 方法 实验操作前先按作业指示书对仪器进行维护保养、校检和质量监控。并完成样品准备，空白样品批内重复测定10次；稀释后的系列浓度实验样品日间重复测定10次。

开展测量范围验证时，首先将制备好的空白样品置于发光仪上，实施测定并重复4次，确保每一次的实际测得值都能被准确读取并记录，实验结束后将其与预期值进行比较，分析测量范围[2]。在测量最大稀释度时，将预先准备好的实验样品置于发光仪上进行检测，实时记录监测数据，并将其与稀释后的预期值比较。

1.3 观察指标 LDL是指样品单次检测达标时对映的分析物量。按照国际纯粹和应用化学联合会的规定，测量值平均水平为99.7%时，可按照规定的公式计算其检测底限。BLD确定所采用的方式为LDL加3倍检测底限样本标准差，确定检测系统可定量报告分析物的最低浓度。在系列的浓度测定时，以AFP、LLD的光强度值（RLUs）为界，将某浓度下所测的光强度值均值减去三倍，并将样品标准差的光强度值仍然大于并和LLD的光量值最接近的对应浓度定为该浓度的BLD。

1.4 统计学方法 应用SPSS 18.0进行数据统计分析，计数资料采用率（%）表示，组间比较采用χ2检验；计量资料采用均数±标准差（Mean±SD）表示，组间比较采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

测量范围为每毫升0.00 mg-912 mg，最大允许稀释度为1:50，实验测量值均值临床医师可以此为根据设置AFP的报告范围。基本上符合分析仪灵敏度说明的数据。结果见表1。

表1 AFP定量分析灵敏度实验结果

3 讨论

AFP属于糖蛋白，主要在卵黄囊、胚胎肝、胎儿胃肠道等部位合成。它在血浆蛋白总量中占据比例会在胎儿发育到13周时达到1/3，在妊娠30周时达到最大值，此后呈逐渐降低趋势，周岁时即可达到成人的水平。化学发光的原理是激发态分子恢复到基态时，以光的形式释放而产生的发光现象[3]。用发光剂直接标记抗体的免疫分析法的主要操作是利用化学发光系统作为抗原抗体反应的指示系统，标记所选用的试剂具有稳定和无毒性的特点，不仅不会污染环境，也不会损害到工作人员的身体健康。实验过程中使用的全自动化学发光仪，可以直接处理并检测样品，检验不受时间、空间的限制，出结果所需的时间大大缩短，显著提高了工作效率，能充分满足临床的需求[4]。

综上所述，化学发光免疫法灵敏度高，有效期长，对环境和工作人员负面影响十分轻微。临床检验医师采用化学发光免疫法检测AFP，可准确测定AFP的测定范围及最大可允许的稀释度，为建立临床报告范围提供参考，临床推广运用是大势所趋。

[1] 廖妮. 基于自增强Ru(II)复合物构建的新型电致化学发光免疫传感器检测甲胎蛋白[J]. 分析测试学报, 2016, 35(7):832-838.

[2] 郭俊美. 磁微粒化学发光法测定甲胎蛋白[J]. 科研, 2016(5):00269.

[3] 钞雪鹏, 袁姗. 不同免疫分析法检测甲胎蛋白在原发性肝癌诊断中的临床意义分析[J]. 医学理论与实践, 2017, 30(5):742-743.

[4] 肖俐霞, 林冠峰, 陈少琅, 等. 人附睾分泌蛋白4光激化学发光免疫分析法的建立[J]. 热带医学杂志, 2015, 15(5):592-595.