乳腺癌组织甲状腺激素受体β1表达及其临床意义

李英，李宗龙

(青海红十字医院，西宁810000)

乳腺癌组织甲状腺激素受体β1表达及其临床意义

李英，李宗龙

(青海红十字医院，西宁810000)

目的探讨乳腺癌组织中甲状腺激素受体β1(TRβ1)蛋白表达变化及其临床意义。方法择取120例乳腺癌患者手术切除的乳腺癌组织标本及其癌旁组织标本。采用免疫组化SP法检测TRβ1蛋白表达。分析癌组织TRβ1蛋白表达与患者年龄、肿瘤直径、病理分级、临床分期、淋巴结转移及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人类表皮生长因子受体2(HER-2)表达的关系。结果癌组织及癌旁组织TRβ1蛋白阳性表达率分别为38.33%(46/120)、99.17%(119/120)，二者比较P<0.05。癌组织TRβ1表达与患者临床分期和淋巴结转移有关(P均<0.05)，与患者年龄、肿瘤直径、病理分级及ER、PR、HER-2表达情况无关(P均>0.05)。结论乳腺癌组织中TRβ1蛋白表达上调，检测乳腺癌组织中TRβ1蛋白表达有助于判断患者临床分期及预测淋巴结转移。

乳腺癌；甲状腺激素受体β1；临床分期；淋巴结转移

甲状腺激素受体(TR)在人类正常乳腺组织内广泛表达，并与细胞的分化有一定联系。TR有TRα1、TRα2、TRβ1三种较为常见的亚型。研究发现，TRβ1由人体3号染色体中的THRB基因编码，与乳腺癌的形成及进展关系密切[1，2]，但乳腺癌组织TRβ1蛋白表达与患者临床病理因素之间的关系尚不明确[2，3]。本研究观察了乳腺癌组织TRβ1蛋白表达变化，现分析结果并探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2015年9月～2017年3月于我院行手术治疗的乳腺癌患者120例，均为女性，年龄26～72(49.74±2.11)岁。入选标准：①符合WHO乳腺癌的相关诊断标准；②有手术指征，均接受乳腺癌根治术治疗；③术前并未接受放化疗或内分泌治疗等措施；④术前KPS评分>85分。排除标准：①合并其他种类肿瘤；②病历资料缺失；③合并甲状腺疾病者。肿瘤直径≤2 cm者42例，>2 cm者78例。病理分级Ⅰ级24例，Ⅱ级57例，Ⅲ级39例。临床分期Ⅰ～Ⅱ期71例，Ⅲ～Ⅳ期49例。有淋巴结转移55例，无淋巴结转移65例。肿瘤组织雌激素受体(ER)表达阳性89例，阴性31例；孕激素受体(PR)表达阳性58例，阴性62例；人类表皮生长因子受体2(HER-2)表达阳性54例，阴性66例。本研究通过我院医学伦理委员会批准，入选者均签署知情同意书。

1.2 癌组织及癌旁组织TRβ1表达检测 取120例患者手术切除癌组织标本及其癌旁组织标本(距肿瘤距离>5 cm，且经病理检查确定为正常组织)。采用免疫组化SP法检测TRβ1表达。鼠抗人TRβ1抗体(一抗)购自Santa Cruz 公司，工作浓度1∶70，免疫组化SP试剂盒购自深圳晶美公司，操作按试剂盒说明书进行。以已知阳性切片为阳性对照，PBS代替一抗为阴性对照。染色后光镜下观察，细胞内出现黄色或棕黄色颗粒为TRβ1阳性。每张切片随机提取10个高倍镜视野(×400)，计数400个细胞。切片染色强度评分[4]：无色计0分，浅黄色计1分，棕黄色计2分，棕褐色计3分。TRβ1阳性细胞百分比(TRβ1阳性细胞数/400×100%)评分：TRβ1阳性细胞百分比为0计0分，>0～10%计1分，>10%～50%计2分，>50%～75%计3分，>75%计4分。两项评分相乘，结果≥2为TRβ1表达阳性，否则为阴性。

1.3 癌组织TRβ1表达与患者临床病理参数关系的分析 收集患者年龄、肿瘤直径、病理分级、临床分期、淋巴结转移及ER、PR、HER-2表达等临床病理资料，分析TRβ1阳性表达与上述指标的关系。

1.4 统计学方法 采用SPSS21.0统计软件。计数资料比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

癌组织及其癌旁组织TRβ1蛋白阳性表达率分别为38.33%(46/120)、99.17%(119/120)，二者比较P<0.05。乳腺癌组织TRβ1表达与患者临床分期和淋巴结转移有关(P均<0.05)，与患者年龄、肿瘤直径、病理分级及ER、PR、HER-2表达情况无关(P均>0.05)。见表1。

表1 乳腺癌组织TRβ1表达与患者临床病理参数的关系

3 讨论

近年来随着分子生物学相关技术的迅猛发展，乳腺癌的临床诊断以及治疗均取得了较大的突破，然而依旧存在较多尚未完全解决的难题[6，7]。乳腺癌具有较强的异质性，寻找与乳腺癌临床病理参数有密切关系的肿瘤标志物对乳腺癌的早期诊断及治疗有重要意义。

临床工作中经常能遇到乳腺和甲状腺同时或者先后罹患肿瘤，或者乳腺癌合并甲状腺功能障碍的病例。查阅文献我们发现，甲状腺功能异常与乳腺癌的发生发展有明显的相关性。乳腺和甲状腺都是内分泌器官，其功能都受到垂体分泌的激素的调控。乳腺癌患者常伴有内分泌系统的紊乱，这会对患者垂体功能进行影响，继而影响患者甲状腺功能。甲状腺功能主要是通过甲状腺素来体现。甲状腺素在全身与TR结合，通过调节下游通路调节相应功能细胞的增殖和功能水平。TR包括17号染色体上的THRA基因编码的TRα1和TRα2以及3号染色体上的THRB基因编码的TRβ1三种亚型。TRβ1在乳腺组织中广泛表达。本研究结果显示，乳腺癌组织内TRβ1蛋白阳性表达率明显低于癌旁组织，与贲勇等[10，11]的报道相符，提示TRβ1蛋白在乳腺癌组织内的表达明显下调。有研究对70例乳腺癌患者肿瘤及相应正常组织标本进行比较，发现大部分乳腺癌标本伴有TRα1、TRβ1在 DNA、RNA及蛋白质水平的表达下降，且<50岁的年轻乳腺癌患者更易伴有TRβ1基因的表达下降[12]。有研究[13]发现，TRβ基因正常表达的小鼠乳腺增生发生率约为33%，TRβ一个等位基因变异的小鼠乳腺增生发生率可达60%，TRβ两个等位基因变异的小鼠乳腺增生率可达 77%。乳腺增生被认为是乳腺癌的高危因素之一，因此提示TRβ表达缺失可能促进乳腺癌发生。转染TRβ1可以抑制肿瘤组织CX-CR4、c-Met和 MMP等高侵袭性肿瘤标志物的表达，抑制肿瘤细胞MAPK和PI3K/AKT等通路的活化。上述说明TR表达缺失会促进乳腺癌的发生发展，但具体作用机制还有待更加深入的研究。

TRβ1属配体依赖型转录因子，广泛存在于机体各组织内，在机体代谢、组织分化及生长发育等方面具有重要作用。在受到外因或者内因的作用后TRβ1基因可发生突变，致使原有活性消失，并使基因的某一个区域构象发生改变，进而影响细胞有关信号通路的正常传导，促进乳腺癌的发生和发展[14]。本研究结果显示，乳腺癌组织TRβ1蛋白阳性率低于癌旁组织， TRβ1蛋白阳性表达与乳腺癌临床分期及淋巴结转移情有关；提示检测乳腺癌组织TRβ1表达有助于判断乳腺癌患者病情以及预测淋巴结转移情况。令亚琴等[15，16]报道证实，TRβ1基因在乳腺癌中有可能发挥的是抑癌基因作用，能够在较大程度上抑制乳腺癌细胞向四周脉管不断侵袭与转移。吴万敏等[17，18]认为，TRβ1对于乳腺癌细胞产生的抑制作用可能与JAK-STAT-cyclinD通路有关，但具体机制尚不明确。

本研究结果显示，乳腺癌组织TRβ1蛋白阳性表达情况与乳腺癌患者年龄、肿瘤直径、病理分级及ER、PR、HER-2表达情况无关，与文献[12，14，15，17]报道不符，可能与本研究和上述研究样本量均较小有关，后续研究需要进一步扩大样本量，进行多中心的随机对照研究，进一步明确乳腺癌组织中TRβ1蛋白阳性表达情况的临床意义。

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李宗龙(E-mail: 736723100@qq.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.40.028

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1002-266X(2017)40-0084-03

2017-06-23)