解脲支原体、沙眼衣原体单独及合并感染对男性不育症患者精液参数的影响

邓国明++徐鹏++李广植

【摘要】目的探究解脲支原体（UU）、沙眼衣原体（CT）单独及合并感染对男性精液参数及精子功能的影响。

方法通过CTDNA、UUDNA荧光定量PCR检测精液CT、UU感染情况，根据检测结果分为CT阳性组、UU阳性组、CT+UU阳性组和阴性对照组。以精子活力、前向运动（a+b）%、精子浓度、精液量、精子的正常形态百分比、肿胀存活率、圆细胞数为观察指标，比较各组精液质量和精子功能的差异。

结果UU阳性组、CT阳性组、UU+CT阳性组的精液参数优于阴性对照组，差异有统计学意义（P<0.05），UU+CT阳性组的精子活力、前向运动、肿胀存活率与UU阳性组、CT阳性组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。

结论UU、CT单独及合并感染对男性精液参数及精子功能有影响，CT合并UU感染对精液质量的影响可能存在叠加作用。

【关键词】 解脲支原体；沙眼衣原体；精液参数

中图分类号：R698.2 文献标识码：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2017.05.013

Influence of UU and CT alone and combined infection on semenparameters in male infertility patients

[HJ2][HJ]

DENG Guoming，XU Peng，LI Guangzhi

（Department of Laboratory，Liuzhou Peoples Hospital，Liuzhou 545006，China）

[HJ2][HJ]

【Abstract】ObjectiveTo investigate the effects of Ureaplasma urealyticum（UU）and Chlamydia trachomatis（CT）alone and combined infection on semen parameters and sperm function in male.

MethodsThe infection of CT and UU was detected by CTDNA and UUDNA quantitative PCR，and patients were divided into CT positive group，UU positive group，CT+UU positive group and negative control group according to the test results.Sperm motility，forward movement（a+b）%，sperm concentration，semen volume，percentage of normal morphology of sperm，swelling survival rate，and the number of oval cells were taken as observation indexes to compare semen quality and sperm function between the two groups.

ResultsSemen parameters among the CT positive group，the UU positive group and the CT+UU positive group were better than those of the negative control group，difference was statistically significant（P<0.05）.The difference of sperm motility，forward movement and swelling survival rate between the UU positive group，the CT+UU positive group and the negative control group was statistically significant（P<0.05）.

ConclusionCT and UU alone and combined infection may have influence on male semen parameters and sperm function，and the effect of CT and UU infection on semen quality may be superimposed.

【Key words】UU；CT；semen parameters

非淋菌性尿道炎的病原体主要为沙眼衣原体（CT）和解脲支原体（UU）。本病目前在欧美国家已超过淋病跃居性传播疾病之首位，在我国的病例也日渐增多，成为最常见的性传播疾病之一。CT和UU引起的临床症状具有一定相似性。临床上存在大量CT合并UU感染的患者，本研究旨在探讨CT、UU单独及合并感染与精液质量和精子功能的关系，为临床男性不育症患者的诊疗提供依据。

1资料与方法

1.1病例选择

600例不育症精液标本来自2015年～2017年本院生殖医学中心就诊的男性不育症患者，年龄18～40岁。不育时间1～10年，平均4年。不育症诊断标准：夫妻同居12个月以上，正常性生活，未采取任何避孕措施，未使女方受孕者[1]。无外伤及遗传性疾病家族史，无性功能障碍史，检查未发现明显的睾丸、附睾及输精管结构异常。无精症患者被排除在外。排除女方不孕及其他影响受孕的相关疾病。根据CTDNA、UUDNA 检测结果分为CT阳性组、UU阳性组、CT+UU阳性组和阴性对照组，各组年龄、不育时间等比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。endprint

1.2标本采集

要求受试者禁欲3～7天，取精前排空尿液，消毒阴茎及双手，采用手淫法采集精液于无菌杯中。采样后，即刻放于37℃水浴保温，待充分液化后进行精液常规检测。同时用无菌管留取精液标本进行CTDNA、UUDNA检测。

1.3试剂

CTDNA、UUDNA检测试剂盒由中山达安基因公司提供，严格按照说明书操作。

1.4检测方法

精液常规检验：采用计算机辅助精液分析（CASA）系统，所有操作按照第五版《WHO人类精液及精子-宫颈黏液相互作用实验室检验手册》要求进行。CTDNA和UUDNA采用荧光定量PCR法检测（拷贝数大于103copy/ml判定为阳性）。

1.5统计学方法

应用SPSS 19.0软件进行统计分析，计量资料采用均数±标准差（±s）表示，多组间比较采用方差分析，两两组间比较用LSDt检验，检验水准：α=0.05，双侧检验。

2结果

2.1精子活力、前向运动、肿胀存活率比较

CT阳性组、UU阳性组、CT+UU阳性组的精子活力、前向运动、肿胀存活率与阴性对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。CT+UU阳性组的精子活力、前向运动、肿胀存活率与CT阳性组、UU阳性组比较差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2精液量、精子浓度、精子正常形态百分率、圆细胞数比较

CT阳性组、UU阳性组、CT+UU阳性组的精液量、精子浓度、精子正常形态百分率、圆细胞数与阴性对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）。但CT+UU阳性组的精液量、精子浓度、精子正常形态百分率与CT阳性组、UU阳性组比较无统计学意义（P>0.05），仅CT+UU阳性组的圆细胞与UU阳性组比较有统计学意义（P<0.05）。见表2。

3讨论

流行病学调查显示，男性不育人群日益增多，男性泌尿系感染是导致男性不育的主要原因之一。生殖道感染可导致患者精液量、精子密度、精子活力、存活率明显下降，使精子畸形率明显增高。

本研究观察了600例不育患者，按照精液CTDNA和UUDNA的荧光定量PCR检测结果分为CT阳性组、UU阳性组、CT+UU阳性组和阴性对照组。对各组的精液常规参数进行比较，结果显示，在男性不育患者中，CT阳性组、UU阳性组、CT+UU阳性组与阴性对照组相比存在明显差异，提示CT、UU感染可导致男性精液质量下降。

支原体是一种原核细胞微生物，在人体中属于条件致病菌。UU属于支原体科原体属，是人类泌尿生殖道诸多支原体感染中为最常见的种类。UUDNA检测被用作男性生殖道感染和男性不育病因诊断中的一个常规检查项目。目前关于UU引起男性不育的机理尚未完全明确，有学者采用扫描和透射电子显微镜观察UU感染对精子和生精细胞的影响，发现UU感染后，可以黏附在生精细胞表面或侵入生精细胞，引起精母细胞的细胞膜破损和结构改变，更有可能侵犯曲细精管内生精上皮，干扰精子产生与成熟，从而引起不育症。此外，UU还可通过吸附于精子[2]，减弱精子穿透卵细胞的能力，产生神经氨酶样物质干扰精子与卵子接触从而影响受精。UU感染精子后，常常附着在精子的头部和尾部，使整个精子布满大小不等的附着物，致使精子游动无力，互相缠绕，导致不育。有报道显示，男性不育患者精液UU阳性率高达40.5%～48.9%[3]。UU感染导致精子畸形率增加，可高达80%[4]。UU感染还可引起曲细精管内出现多核巨细胞，生精细胞严重退变、脱落，许多精母细胞内出现空泡化的线粒体，胞质中出现许多小泡状结构[5]。此外，人精子和精子膜蛋白存在交叉免疫反应，不仅产生自身抗体，且UU感染后可吸附于精子细胞表面，诱导T细胞活化，通过细胞免疫杀伤精子细胞[6]。但支原体感染对男性生育影响与否，一直存在较大争议。临床上既存在大量UU感染的不育症患者，同时也有无症状UU携带者，这给男性不育症的临床诊疗带来困难。目前倾向于认为和UU不同血清型的感染有关[7]。

CT是一类专性细胞内生长、有独特发育周期的原核型微生物，与UU存在大量的正常带菌者不同，CT很少在正常男性的尿道分泌物中检测出来。有报道生殖道CT感染可导致精子凋亡增加，损伤精子顶体膜，引起顶体消失，从而造成精子穿透能力减弱[8]，还有可能引起自身免疫，产生抗精子抗体[9]。Eley等的研究表明男性泌尿生殖道CT感染会影响精子成熟，从而导致活精数量减少[10]。Spadafora等研究发现CT感染后，生精细胞可通过CD4分子介导免疫反应，从而获得自发获取外源性DNA的能力，精子与外源DNA相互作用可诱导内源核酸剪切降解，导致类似凋亡的细胞死亡过程[11]。CT寄生于宿主细胞内，可抑制宿主细胞代谢，使细胞溶解、破坏而导致溶酶体内水解酶的释放，导致生殖道炎症而影响生育[12]。

另外，本研究还显示CT+UU阳性组相比CT或UU单独感染组，精子活力、前向运动、肿胀存活率显著降低。CT+UU阳性组相比UU阳性组圆细胞显著升高。以往报道尚未提及CT和UU合并感染对精液质量影响存在协同作用。笔者认为，一方面，CT和UU对精子影响的机制不同，CT感染主要破坏精子的正常结构，造成精子死亡，而UU主要通过吸附影响精子的运动能力，因此，在CT感染造成精子细胞大量损伤死亡的同时，UU进一步限制了精子的运动能力，协同导致CT+UU阳性组精子活力、前向运动、肿胀存活率显著降低。圆细胞是泌尿生殖道的上皮细胞、前列腺细胞、生精细胞和白细胞等非精子细胞成分，和炎症反应有关，CT感染不仅破坏精子和生精细胞，干扰精子成熟，也会引发泌尿生殖道一系列炎症反应，从而引起圆细胞增多。另一方面，目前认为UU为条件致病菌，在CT感染的前提下，泌尿道出现损害，精液内环境和精子遭受破坏，此时UU亦会发生致病作用，可能出现协同作用，因而CT+UU阳性组相比UU阳性组圆细胞显著升高，提示感染加重，严重影响精子质量。endprint

参考文献

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（收稿日期：2017-04-09修回日期：2017-05-26）

（编辑：梁明佩）endprint