银翘散对炎症小鼠中性粒细胞吞噬力影响的试验研究

2017-11-25薄士儒宋学良王全凯

吉林农业 2017年23期

关键词：银翘散中性吉林

薄士儒，宋学良，王全凯

（1.吉林农业科技学院，吉林吉林132101；2.吉林农业大学中药材学院，吉林长春130000）

银翘散对炎症小鼠中性粒细胞吞噬力影响的试验研究

薄士儒1*，宋学良1，王全凯2

（1.吉林农业科技学院，吉林吉林132101；2.吉林农业大学中药材学院，吉林长春130000）

通过试验研究银翘散汤剂对于细菌感染的小鼠中性粒细胞吞噬力产生的影响，旨在探究银翘散对中性粒细胞吞噬率的影响效果。随着不断给药，用药组小鼠血液中的中性粒细胞吞噬率不断增强，远高于模型对照组，并且高于正常水平。这表明，银翘散可以促进血液中性粒细胞对细菌的吞噬能力，进而改善机体的免疫功能。

银翘散；中性粒细胞；吞噬能力

银翘散是十分著名的传统中药方剂，而作为免疫系统的“先锋官”——中性粒细胞是免疫能力强弱的一个标识，如何促进其功能的增强是一个重要的研究方向。因此，本次试验银翘散为研究对象，研究其对血液中性粒细胞吞噬能力的作用，进而探究银翘散对于机体免疫功能的影响。

1 仪器与材料

分析天平；显微镜；高压蒸汽灭菌器；微量移液器等均为实验常用仪器。

金银花，桔梗，竹叶，连翘，生甘草，薄荷，淡豆豉，荆芥，牛蒡子（均购自吉林市科田大药房）；PBS、肝素钠、淋巴细胞分离液（赛奥克试剂公司）；乙醚、乙醇等试剂均为分析纯。

2 实验方法

2.1 银翘散汤剂的制备

按组方配比称取各药煮沸、过滤，并将所得滤液进行浓缩，使其药液浓度为1g/ml。将所得药液密封，冷却。放入4℃冰箱中备用。

2.2 细菌菌液的制备

培养基及菌液按照文献方法进行制备，并通过预实验确定细菌接种浓度为1×108CFU/ml。

2.3 建立动物模型

将48只健康清洁级小鼠随机分为用药组，健康对照组以及模型对照组。麻醉，接种细菌（注射量为0.2ml/只）。感染细菌后2小时，对用药组小鼠进行灌胃给药（0.4ml/只），并将等量的无菌生理盐水对模型对照组以及健康对照组小鼠进行灌胃。分别于用药前，用药后48小时、用药后72小时通过眼球取血。

2.4 细胞吞噬试验

吸取2ml加入肝素钠的抗凝血，再加2mlPBS进行稀释。将稀释后的混合液注入到装有4ml淋巴细胞分层液的离心管中，使用水平离心机2000rpm/min离心20min，离心后的细胞出现分层现象。吸出上面的三层（血浆，单核细胞层以及分层液）向离心管中加入5倍体积的PBS混合均匀后离心3次（1500rpm/min，离心15min）。取粒细胞加入5ml浓度为（8.3g/L）氯化铵溶液，破坏红细胞后，37℃水浴 10min 之后离心（2000rpm/min，10min），弃去上清液，加入100μlPBS制成细胞悬液,进行推片染色及显微观察中性粒细胞吞噬金黄色葡萄球菌情况，并统计吞噬指数与吞噬率。

吞噬细胞百分率（%）：即100个中性粒细胞中吞噬细菌的细胞数。

吞噬指数：将100个中性粒细胞所吞噬的细菌总数除以100，得到的每个细胞吞噬细菌的平均数。

3 实验结果与分析

3.1 试验数据

应用SPSS软件对试验数据进行分析处理。

3.2 结果分析

通过表1、表2可以看出：在给药前，由于接种了金黄色葡萄球菌的菌液，从而导致健康对照组小鼠血液中的中性粒细胞吞噬率及吞噬指数明显高于用药组与模型对照组，且差异十分明显；而用药组与模型对照组小鼠的细胞吞噬率及吞噬指数基本处于相同的水平。用药后的48小时，模型对照组与健康对照组小鼠血液中的中性粒细胞的吞噬率及吞噬指数基本与用药前相同，用药组小鼠血液中的中性粒细胞的吞噬率及吞噬指数呈明显的上升趋势，且增加的幅度较大；在用药后72小时，用药组小鼠血液中的中性粒细胞的吞噬率及吞噬指数持续呈上升的趋势，并且要略高于健康对照组，而模型对照组与健康对照组基本无变化。