免疫胶体金技术在食品检测中研究进展

李凌慧++李坤++罗鹏宇++程冰晓++韩瑜

疫胶体金技术是继免疫荧光技术、免疫酶技术、放射免疫技术这三大免疫标记技术之后方便快捷被并且广泛应用的免疫标记技术。早在1857年，Michael Faraday首次制备出纳米金溶胶，他的研究为胶体金溶胶的发展与应用提供了基础[1]。1952年，KOLETSKY，S和GUSTAFSON，G提出了胶体金这一概念，研究了放射性胶体金对大鼠肝脏的损害。我国艾克庄在1982年研究多发性硬化症脑脊液蛋白的电泳时用到了胶体金曲线测定法。免疫胶体金技术利用抗原抗体的特异性反应，通过金标示踪物的直观显色变化而确定实验结果。免疫胶体金技术不需要特殊大型设备和试剂、稳定性强、操作简单、成本较低、结果直观，所以在快速检测方面具有极大优势。

民以食为天，恶性食品问题事件频发，越来越多的人开始关注食品安全问题，食品安全的隐患最多就是农兽药残留与食品自身天然存在的有害物质如生物毒素、食源性致病菌等，因此探究出一种快速、经济、准确的食品安全检测技术对人类来说是一个挑战。本文就免疫胶体金技术在检测食品中有害物质的研究应用展开综述。

免疫胶体金技术快速检测食品中抗生素

抗生素如林可霉素、氯霉素、庆大霉素等若引入食品中其残留会通过食物链进入人体中，长期食用含有超标抗生素的食品会对人体健康带来极大的隐患。

刘淑华等用胶体金免疫层析法检测牛奶中新霉素的残留含量，检测结果重复性较好，并且表明牛奶样品不需要进行稀释就可以直接检测，检测时间只有3～5分钟，牛奶中新霉素的检测限为200μg/L。李利芬等用胶体金法定性检测牛奶中林可霉素残留，采用两种方法进行定性检测，方法一林可霉素的检出限为40nk/mL，方法二林可霉素检出限为100nk/mL。陶光灿等用胶体金免疫层析法测定了猪肉、鸡肉等动物组织中氯霉素的残留含量，方法特异性好，与其他抗生素无交叉反应，结果显示，所检测的动物组织中氯霉素的检测限均为0.3μg/kg。杨俊等应用胶体金免疫层析技术建立了快速检测食品中庆大霉素的方法，实验结果表明庆大霉素快速检测试纸条的灵敏度为0.7μg /mL，检测时间为10min，稳定性和特异性均良好。

免疫胶体金技术快速检测食品中农兽药残留

兽药残留愈来愈受到人们的关注，目前使用不当或过度使用农药、兽药的现象时有发生，食品安全问题日益显著，若人类长期食用含有兽药残留的食品，很有可能会致畸形、致基因突变和致癌。免疫胶体金越来越凸显其在兽药残留方面检测的优势，这一检测技术使得整个分析过程变得简便而又快速。

徐锐利用免疫胶体金技术快速检测大菱鲆中恩诺沙星残留量，结果表明：检测卡对恩诺沙星标准品和环丙沙星标准品的最低检测灵敏度分别在1μg/kg～5μg/kg和20μg/kg～50μg/kg 之间。实际样本经本实验方法和高效液相的方法同时检测结果一致，均呈现阴性结果，此方法可用于实际样本的验证。朱爱荣研制了能够快速检测肉制品中氟苯尼考残留的胶体金试纸条，胶体金免疫层析法的检出限为1.0μg/mL，和液相色谱-质谱法相比具有快速简便等优点，更适用于食品中氟苯尼考残留的快速检测。吴巧丽等建立了一种胶体金免疫层析法快速检测动物组织或饲料样品中沙丁胺醇的残留，该方法优化了检测试剂，最低检出限为2 ng/m L，实验所需时间只有3分钟且肉眼可直接观察到结果。吴茂生等利用胶体金免疫层析技术检测鱼、虾中呋喃妥因代谢物的残留，实验中所用试纸条对鱼、虾的呋喃妥因代谢物检出限均为1.0μg/kg，假阳性率不大于5% ，假阴性率为0。霍如林等应用胶体金免疫层析法快速定量检测猪肝中喹乙醇残留，该实验建立了 T/C 比值法进行定量检测猪肝中喹乙醇的残留，实验所制备的试纸条可以在15分钟内完成对喹乙醇的定性和定量检测，当猪肝中喹乙醇质量浓度在 1～200ng/m L 范围内，该试纸条检测的最低检测限为 6.83ng/m L。

免疫胶体金技术快速检测食品中真菌毒素

真菌毒素是一些真菌在生长过程中所产生的次级代谢产物，几乎广泛地存在于所有的食品和饲料中，危害人类的健康安全。目前研究较多、对人类危害较大的真菌毒素包括黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇等，真菌毒素具有毒性强、污染频率高的特点，可致癌、致畸、致突变。据报道，全球每年由于霉变、污染真菌毒素引起的农产品和工业原料的损失达数百亿。据联合国粮食及农业组织统计，全世界每年约有25%的谷物受真菌毒素污染。鉴于真菌毒素给粮油食品产业带来的巨大损失，建立并应用可以批量快速检测真菌毒素的方法至关重要，胶体金免疫层析技术现已经广泛应用于检测真菌毒素。

庞璐等建立了一种用PCR-免疫胶体金试纸条法快速检测食品中肠出血性大肠杆菌O157：H7 的方法，这种方法具有良好的特异性，灵敏度也极高，使用PCR-免疫胶体金试纸条方法的菌液检测敏感度为100 CFU/mL，此法检测结果准确，价格低廉，适用于食源性病原微生物临床检测、农牧业和食品工业、海关检验检疫、环境检测等领域。罗晓琴等应用胶体金免疫层析技术建立了一种可以快速检测牛奶中黄曲霉毒素M1的方法，实验中所研制的黄曲霉毒素M1快速检测试纸条的检测限为0.3μg/L，检测时间为10 min，假阳性率和假阴性率均为0，這种方法适合现场快速检测牛奶中残留的黄曲霉毒素M1。庞璐等建立了PCR-免疫胶体金试纸条法可以快速检测食品中单核增生李斯特氏菌，实验共采集乳品样品131份， 阳性样品1份， 检出率1.53%； 肉制品224份， 阳性样品4份， 检测率1.79%。王俊双以多克隆抗体和胶体金合成标记技术为基础，根据免疫层析的原理，建立了食品中 DON 胶体金免疫快速检测方法，目测检出限1mg/kg，检测时间为10～15 min，此方法的重复性良好。

综上所述，免疫胶体金技术在快速检测抗生素、兽药残留、真菌毒素方面已经有很纯熟的方法，食品安全问题不容小觑，快速定性检测大批量食品中可能对人体健康造成危害的物质对人类来说是一个挑战，免疫胶体金技术具有成本低，检测速度快等优点，在未来仍然有很大的发展空间。

展望

免疫胶体金技术操作方便，检测速度快，开发成本低，结果判定不需要复杂的仪器，仍然是现阶段一种经济实用的快速检测技术。但是同侧流免疫层析检测相比定量难，灵敏度不高，因此在不损害其本身优点的基础上提高重现性、灵敏度和定量准确性的意义重大。endprint