双虎清肝颗粒对慢性乙型肝炎患者IL-10和TGF-β的影响以及临床疗效研究

祝丽超，毕夏，陈晓杨

(辽宁中医药大学附属第三医院，辽宁 沈阳 110000)

双虎清肝颗粒对慢性乙型肝炎患者IL-10和TGF-β的影响以及临床疗效研究

祝丽超，毕夏，陈晓杨

(辽宁中医药大学附属第三医院，辽宁 沈阳 110000)

目的：观察双虎清肝颗粒对慢性乙型肝炎患者临床疗效及白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响。方法：符合纳入标准的慢性乙型肝炎患者134例，使用信封法随机分为对照组(阿德福韦酯)和观察组(双虎清肝颗粒联合阿德福韦酯)，每组67例。采用ELISA法检测IL-10和TGF-β表达情况。结果：治疗前两组患者丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBiL)、透明质酸酶(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(Ⅲ-PC)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、IL-10和TGF-β无显著性差异(P>0.05)。治疗后观察组对上诉指标的减低幅度显著高于对照组(P<0.05)。治疗结束后观察组转阴率为68.6%(46/67)，显著高于对照组的50.7%(34/67)(P<0.05)。观察组不良反应发生率为10.1%(7/67)，对照组不良反应发生率为9.0%(6/67)，两组不良反应无显著性差异(P>0.05)。结论：双虎清肝颗粒可以减低慢性乙型肝炎患者IL-10和TGF-β因子表达，有利于肝功能的恢复并发挥抗肝纤维化的作用，临床使用安全、有效。

双虎清肝颗粒；慢性乙型肝炎；白细胞介素-10；转化生长因子-β

乙型肝炎病毒感染是全世界范围内主要的健康问题，我国60岁以下人群的乙型肝炎病毒表面抗原携带率为7.2%，大约有20%～40%的携带者会发展为慢性乙型肝炎，成为我国肝硬化的主要原因[1]。双虎清肝颗粒是金银花、虎杖、黄连、白花蛇舌草、蒲公英、丹参、野菊花、紫花地丁、法半夏、甘草、瓜蒌、枳实 12味中药组成的中成药，具有清热利湿，化痰宽中，理气活血之功效，临床上用于慢性乙型肝炎的治疗[2]。阿德福韦酯属单磷酸腺苷磷酸核苷酸类似物，可以发挥抗乙型肝炎病毒的功效，属于临床一线抗乙肝病毒类药物[3]。本研究在阿德福韦酯治疗的基础上加用双虎清肝颗粒，观察患者外周血白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子-β(TGF-β)表达的变化，以及其相关的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2014年6月—2015年7月我院治疗的慢性乙型肝炎患者134例，参照《病毒性肝炎防治方案》[4]诊断。排除酒精性肝病及自身免疫性肝病者，重叠感染甲、丙、丁型以及戊型肝炎者，发展到肝硬化、肝癌者，肾功能严重障碍者，不能坚持长期随访治疗者，孕妇、哺乳期妇女。患者使用信封法随机分为对照组和观察组，每组67例。从表1可见，两组性别、年龄、病程、HBV - DNA 病毒载量之间差异无统计学意义，具有可比性(P>0.05)。所有治疗均经我院伦理学委员会批准后实行，所有患者均知晓本研究并签署知情同意书。

表1 两组患者一般资料比较

1.2 治疗方法

对照组：禁酒，清淡饮食，阿德福韦酯片(四川美大康华康药业有限公司，批准文号：国药准字H20100092，规格：10 mg/片)口服，10 mg，1次/d。观察组：在对照组基础上加用双虎清肝颗粒(北京华神制药有限公司，批准文号：国药准字80Z119081，12 g/袋)口服，1袋/次，2次/d，12个月为1个疗程。

1.3 观察指标

记录治疗前、治疗后患者肝功能指标：丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBiL)；血清肝纤维四项：透明质酸酶(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(Ⅲ-PC)和Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)；HBV-DNA。

使用ELISA法检测IL-10和TGF-β表达，检测试剂盒购自美国eBioscience公司，取患者治疗前、疗程结束后清晨空腹外周静脉血2 ml，1 500 g离心10 min，取上层血清，交由检验科按照试剂盒说明书使用配套试剂操作，制作标准曲线，日立7170全自动生化分析仪检测吸光度值，结合标准曲线得出IL-10和TGF-β表达水平。

1.4 统计学方法

采用SPSS16.0处理数据，计量资料两组间比较采用t检验，多组均数比较使用方差分析，计数资料采用χ2检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者治疗前后肝功能的变化情况比较

由表2可见，治疗前两组患者ALT、AST和TBiL无显著性差异(P>0.05)，治疗后观察组对ALT、AST和TbiL减低的幅度均显著高于对照组(P<0.05)。

表2 两组患者治疗前后肝功能的比较

注：与同组治疗前比较，**P<0.01；与对照组治疗后比较，▲P<0.05。

2.2 两组患者治疗前后肝纤维化指标的变化情况比较

由表3可见，治疗前两组HA、LN、Ⅲ-PC和Ⅳ-C肝纤维化4项指标无显著性差异(P>0.05)，治疗后观察组对HA、LN、Ⅲ-PC和Ⅳ-C减低的幅度均显著高于对照组(P<0.05)。

表3 两组患者治疗前后肝纤维化指标变化情况比较

注：与同组治疗前比较，*P<0.05，**P<0.01；与对照组治疗后比较，▲P<0.05。

2.3 两组患者治疗前后 IL-10和TGF-β表达情况比较

从表4可见，治疗前两组患者IL-10和TGF-β表达无显著性差异(P>0.05)，治疗后观察组对IL-10和TGF-β减低的幅度均显著高于对照组(P<0.05)。

表4 两组治疗前后IL-10和TGF-β表达的比较

注：与同组治疗前比较，*P<0.05，**P<0.01；与对照组治疗后比较，▲P<0.01。

2.4 两组患者治疗前后HBV-DNA转阴率比较

治疗结束后观察组HBV-DNA转阴46例，转阴率为68.6%(46/67)，显著高于对照组的50.7%(34/67)(P<0.05)。

2.5 安全性评估

观察组腹泻2例、头痛1例、恶心2例、腹胀2例，不良反应发生率为10.1%(7/67)，对照组腹泻1例、咽痛1例、恶心1例、乏力1例、腹痛1例、腹胀1例，不良反应发生率为9.0%(6/67)，两组不良反应发生率无显著性差异(P>0.05)。上述不良反应均自行缓解，患者可以坚持治疗，未停药。

3 讨论

乙型肝炎病毒引起的肝脏细胞损伤是一种免疫病理反应，机体免疫细胞对病毒清除的同时会伴随肝细胞的破坏，因此在抗病毒治疗的同时也要兼顾患者免疫紊乱的调节[5]。中医药治疗对慢性乙型肝炎的免疫调节作用报道逐渐增多[6]。双虎清肝颗粒方中金银花和虎杖为君药，清热解毒、散瘀定痛、利湿退黄;黄连和白花蛇舌草为臣药，清热利湿;紫花地丁、丹参和枳实为佐药，活血止痛、化痰散结;余药整体调和，共奏清热利湿，化痰宽中，理气活血之功[7]。现代药理研究认为,方中的黄连可调整患者免疫功能，丹参活血化瘀的功效可以改善肝脏微循环，甘草能够有效抑制肝脏炎性反应，都可以起到促进损伤肝细胞的修复作用[8]。本研究观察到疗程结束后观察组肝功能指标显著低于对照组，说明了双虎清肝颗粒有利于损伤肝细胞的修复。近年来慢性肝炎的抗肝纤维化治疗越来越受到重视，HA、LN、Ⅲ-PC和Ⅳ-C是临床上常用的评价肝纤维化程度的指标，本研究观察到疗程结束后观察组肝纤维化4项指标显著低于对照组，说明了双虎清肝颗粒可以阻止慢性肝炎的纤维化进展，有利于肝硬化的预防。调节性B细胞(regulatory B cells，Breg)是IL-10和TGF-β来源的主要分泌细胞[9]，IL-10起到负面调节免疫反应的作用，例如：减少MHCⅡ分子和肿瘤坏死因子的表达，阻止调节DC细胞、T细胞及巨噬细胞的活化[10]，苏然等[11]的研究也观察到慢性HBV感染者Breg细胞和IL-10因子均表达升高，并且慢性HBV感染者体内的IL-10因子主要是由Breg细胞分泌。本研究显示,观察组治疗后IL-10显著低于对照组，说明了双虎清肝颗粒可以发挥免疫调节，临床分析也显示双虎清肝颗粒显著增加了阿德福韦酯治疗的转阴率。TGF-β在慢性肝炎患者体内高表达，高表达的TGF-β可以激活肝脏间质枯否氏细胞参与到肝脏的肝纤维化进程中[12]。本研究显示观察组治疗后TGF-β显著低于对照组，提示双虎清肝颗粒抗肝纤维化的作用可能与此相关。

阿德福韦酯属于临床一线抗乙肝病毒类药物，本研究在联合应用双虎清肝颗粒治疗慢性乙型肝炎病毒肝炎的过程中，未发现严重的临床不良反应，说明了两药合用的安全性，两药治疗期间都未观察到肾脏损害的发生，所发现的临床不良反应均可自行缓解，不影响继续用药治疗。

综上所述，本研究显示双虎清肝颗粒可以减低慢性乙型肝炎病毒肝炎患者IL-10和TGF-β因子表达，有利于肝功能的恢复并发挥抗肝纤维化的作用，临床使用安全、有效。

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InfluenceandEfficacyofShuanghuQingganGranulesonIL-10andTGF-βinPatientswithChronicHepatitisB

ZHU Li-chao, BI Xia, CHEN Xiao-yang

(TheThirdAffiliatedHospitalofLiaoningUniversityofTCM,Shenyang110000,China)

Objective: To observe the effects of Shuanghu Qinggan granules on IL-10 and TGF-β in patients with chronic hepatitis B and its curative efficacy. Methods: 134 patients were randomly divided into the control group(n=67) and the observation group(n=67); the control group was treated with Adefovir Dipivoxil tablets, on which basis, the observation group was also given Shuanghu Qinggan granules. The levels of IL-10 and TGF-β were detected by ELISA method. Results: There was no significant difference in terms of ALT, AST, TBiL, HA, LN, Ⅲ-PC, Ⅳ-C, IL-10, and TGF-β between the two groups before treatment(P>0.05). After treatment, they all became significantly lower in the observation group than those in the control group(P<0.05); the negative conversion rate in the observation group was 68.6%(46/67), which was significantly higher than 50.7%(34/67) in the control group(P<0.05); the incidence of adverse reactions was 10.1%(7/67) in the observation group and 9%(6/67) in the control group, but there was no significant difference between the two groups(P>0.05). Conclusion: The therapy of Shuanghu Qinggan granules can reduce the expressions of IL-10 and TGF-β in patients with chronic hepatitis B, which was conducive to the recovery of liver function and it plays a role in anti-fibrosis, with its safety and effectiveness in clinic.

Shuanghu Qinggan granules; Chronic hepatitis B; IL-10; TGF-β

R285.6

A

1002-2406(2017)06-0074-03

祝丽超(1978-)，女，主管中药师,主要研究方向：临床药学。

2016-11-14

修回日期：2016-12-10