秦岭野板栗壳棕色素提取物的分离与纯化研究

王转莉　赵春宝　徐雄雄　张定

【摘 要】本文以秦岭野板栗壳为原料，采用浸取法提取色素，利用硅胶色谱柱对其进行分离纯化，并通过紫外可见分光光度计对色素进行表征。结果表明：该色素分离提纯最佳洗脱液为8：2乙醇—氯仿溶液。

【关键词】秦岭野板栗壳；棕色色素；提纯

中图分类号： TQ 047 文献标识码： A

板栗是山毛榉科栗属中的乔木或灌木的总称，约有7～9种。板栗壳棕色素是一种从板栗壳中提取出的具有优良的天然抗氧化性和自由基清除性的黄酮类化合物[1]。该色素水溶性好，色价高，性质稳定， 其水溶液对酵母菌、大肠杆菌、霉菌、枯草杆菌、青霉、痢疾杆菌等均有抑制和杀灭作用[2]，可以作为天然色素应用于饮食品行业，具有很高的研究价值和应用前景。

1 板栗壳色素提取

1.1 仪器与材料

紫外可见分光光度计（北京普析），板栗壳（秦岭山区），95%乙醇（分析纯）。

1.2 原材料预处理

将板栗壳在水中浸泡搅拌3分钟后，捞出在日光下晾晒2天，置于60℃下真空干燥2 h，然后粉碎、30目分样筛筛分后备用。

1.3 棕色素提取

称取板栗壳粉末于150 mL圆底烧瓶中，以液料比为1：15加入40%乙醇，80℃水浴加热6h，冷却至室温，抽滤、旋蒸、真空干燥后得到深棕色固体。

2 洗脱剂的选择

2.1 乙酸乙酯—氯仿展开剂

称取粗提取物0.10g，溶于10.00mL无水乙醇中，剪取1cm宽硅胶色谱板5块，将其分别放入乙酸乙酯—氯仿体积比为：9：1、8：2、5：5、2：8、1：9的溶液中，待其展开一定距离后，取出晾干，用9%的氯化铁溶液显色，放在紫外灯下观察，计算其Rf值。从表3.6可以看出，利用乙酸乙酯—氯仿展开剂，不可以将板栗壳棕色素分离开来。

2.2 乙醇—氯仿展开剂

实验步骤2.1，从表3.7可以看出，利用乙醇—氯仿展开剂，选择乙醇—氯仿体积比为8：2的洗脱剂对板栗壳棕色素进行分离。

2.3 甲醇—氯仿展开剂

实验步骤2.1，从表3.8可以看出， 利用甲醇—氯仿展开剂，可选择甲醇—氯仿体积比为8：2的洗脱剂对板栗壳棕色素进行分离。

3 硅胶色谱柱分离棕色素

运用湿法装柱法，填装高度为20cm的硅胶柱，120℃活化2h。干法上样，采用8：2乙醇—氯仿洗脱溶液进行洗脱后，转蒸洗脱液、真空干燥得亮棕色固体。

4 紫外光谱分析

图4.1为提取纯化后色素紫外光谱图，从图中可以看出：分离后板栗壳色素在250nm～310nm和350nm～400nm有两个主要的吸收峰，分别为A-环苯酰系统和B-环肉桂酰系统吸收峰，说明该色素为类黄酮化合物，与文献一致[4]。

5 结论

以秦岭野板栗壳为原料，采用浸取法提取色素，利用硅胶色谱柱对其进行分离纯化，并通过紫外可见分光光度计对色素进行表征。结果表明：该色素分离提纯最佳洗脱液为8：2乙醇—氯仿溶液，这一工作为秦岭野板栗色素提取、应用提供一些参考。

【参考文献】

[1]肖迪，孙瑾凯，许芳.板栗球苞壳棕色素提取及性能研究[J].河南化工，2009，（04）：22-24.

[2]金黎明，陈苛蒙，王宁，候熙彦，王茹，吴渊，岳玉莲.板栗壳棕色素的提取及性质研究[J].食品研究与开发，2016，18（06）：50-54.

[3]王转莉，方振华，尙雨洁，何亚萍.秦岭山核桃壳中天然棕色素的提取研究[J].应用化工，2017，45（05）：891-892

[4]唐浩国.黄酮类化合物研究[M].北京：科學出版社，2001：95-100.endprint