江苏省扬州地区儿童呼吸道感染病毒病原学调查分析

程文国, 陈 剑, 刘 艳, 朱新林, 诸 俊

(扬州大学附属医院 扬州市妇幼保健院 检验科, 江苏 扬州, 225002)

江苏省扬州地区儿童呼吸道感染病毒病原学调查分析

程文国, 陈 剑, 刘 艳, 朱新林, 诸 俊

(扬州大学附属医院 扬州市妇幼保健院 检验科, 江苏 扬州, 225002)

目的分析扬州地区儿童呼吸道感染病毒病原体的感染情况。方法应用直接免疫荧光法检测2011年1月—2016年12月扬州地区17 691例呼吸道感染儿童鼻咽分泌物呼吸道腺病毒(ADV)、合胞病毒(RSV)、副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(PIV Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)、流感病毒A/B(IFA/B)病毒抗原并分析其流行病学特征。结果在17 691例标本中，共检出病毒阳性标本1 991例，检出率11.25%(1 991/17 691); 在1 991例阳性标本中, RSV占60.12%(1 197/1 991), 其他依次为PIV Ⅲ 14.27%(284/1 991)、ADV 8.04%(160/1 991)、PIV Ⅰ 5.42%(108/1 991)、IFA 5.27%(105/1 991)、IFB 4.07%(81/1 991)、PIV Ⅱ 2.81%(56/1 991)。RSV检出率存在性别差异。1月～<1岁组呼吸道病毒检出病例占总检出率的59.81%(1 191/1 991); 单项病毒检出率在4组人群中均居首位。冬季是检出病毒阳性占比最高的季节，为51.88%(1 033/1 991); 夏季检出率最低，为10.35%(206/1 991)。结论扬州地区呼吸道病毒感染受年龄、季节和性别的影响, RSV感染最多见，以1月～<1岁婴幼儿为主，冬季好发，并且男性较女性更易感。

呼吸道感染; 儿童; 病毒; 直接免疫荧光法

儿童免疫系统未发育成熟，比成年人更容易成为细菌、病毒等病原体侵袭的目标。病毒是引

起儿童呼吸道感染的主要病原体之一，其中呼吸道腺病毒(ADV)、合胞病毒(RSV)、副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(PIV Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)、流感病毒A/B(IFA/B)最为常见。本研究纳入2011—2016年因呼吸道感染来本院就诊的儿童17 691例进行鼻咽拭子7项病毒检测，对其阳性病例进行病原学特征分析，了解本地区常见病毒引起儿童呼吸道感染流行特征，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2011年1月—2016年12月因呼吸道感染就诊患儿17 691例，男10 631例，女7 060例，年龄3 d～10岁。

1.2 标本采集与处理

使用一次性植绒拭子于清晨采集患儿鼻咽部分泌物，置于有PBS缓冲液的标本采样管中立即送检。将采样管剧烈涡旋震荡15 s, 500 g离心10 min后弃上清液，再加入PBS缓冲液5 mL, 重复上述步骤3遍，最后加入0.5～1 mL PBS缓冲液，反复吹吸以形成轻微雾状细胞悬液。

1.3 仪器与试剂

DM500荧光显微镜(德国Leica); ADV、RSV、IFA/B、PIV Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ检测试剂盒(上海贝西生物科技有限公司)。

1.4 检测方法

采用直接免疫荧光法检测病毒抗原。采用标记有荧光素的各种呼吸道病毒特异性抗体分别与固定在玻片上的分泌物细胞携带的病毒结合，用荧光显微镜观察，病毒感染的细胞被染上绿色荧光。

1.5 统计学分析

采用SPSS 13.0统计学软件进行处理，计数资料用百分比(%)表示病毒检出情况，采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 呼吸道病毒检出情况

在17 691例标本中，共检出病毒阳性标本1 991例，检出率11.25%; 阳性标本中RSV占60.12%(1 197/1 991), 其他依次为PIV Ⅲ占14.27%(284/1 991), ADV占8.04%(160/1 991), PIVⅠ占5.42%(108/1 991), IFA占5.27%(105/1 991), IFB占4.07%(81/1 991), PIV Ⅱ占2.81%(56/1 991)。

2.2 性别与呼吸道病毒检出率的关系

男性标本病毒检出率为11.65%(1 239/10 631); 女性标本病毒检出率为10.65%(752/7 060)。二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。不同性别患儿7种呼吸道病毒检出率仅RSV有显著差异(P<0.05)。见表1。

表1 不同性别呼吸道病毒检出情况[n(%)]

与女性比较, *P<0.05。

2.3 年龄与呼吸道病毒检出率情况的关系

将1 991例阳性病例按患儿年龄<1月、1月～<1岁、1～3岁、>3岁分组。7种病毒检出数在各年龄组间均有显著差异(P<0.01)。1月～<1岁组检出数占总阳性例数的59.81%(1 191/1 991), 1～3岁组为20.04%(399/1 991), >3岁组为11.25%(224/1 991), <1月新生儿组为8.90%(177/1 991)。见表2。

表2 不同年龄组患儿7项病毒检出情况[n(%)]

2.4 气候因素与呼吸道病毒检出情况

将1 991份阳性标本按扬州地区气候变化以春(3～5月)、夏(6～8月)、秋(9～11月)、冬(12月～次年2月)分组，各病毒在不同季节的检出情况见表3。

表3 不同季节各呼吸道病毒检出情况[n(%)]

3 讨 论

由于儿童正处于生长发育阶段，对外界病原体入侵抵抗力较弱，容易诱发各种感染性疾病，病毒是儿童呼吸道感染最常见的病原体之一[1]。目前，检测呼吸道病毒主要有PCR法、免疫荧光法检测抗原、免疫荧光法检测抗体等多种方法，国内报道的检出率差异较大，高源等[2]报道为26.86%, 刘小乖等[3]报道达68.68%。本研究采用免疫荧光法检测7种呼吸道病毒抗原，其总阳性率为11.25%(1 991/17 691), 低于国内相关报道，差异可能与采用的检测方法、检测病毒的种类、病人的选择及标本采集的部位等不一致有关。本研究采用同一种方法、同一种试剂连续6年检测，其结果比较真实地反映了本地区呼吸道感染儿童7项呼吸道病毒检出率。本研究结果显示男孩7项呼吸道病毒检出率为11.25%(1 239/10 631), 高于同期女孩检出率10.65%(752/7 060), 差异有统计学意义(P<0.05), 与崔小健等[4]报道所得结论并不一致。就单种病原体看: RSV位居7种病原体检出率首位，占检出病毒数的60.12%(1 197/1 991), 与国外有关RSV是婴幼儿急性下呼吸道病毒性感染主要病原体的报道一致[5], 应引起重视。

本研究分析不同年龄呼吸道感染儿童病毒检出率发现, <1月的新生儿组检出率最低，为8.90%(177/1 991), 1月～<1岁组是呼吸道病毒主要检出人群，占总检出率的59.81%(1 191/1 991); 分单项病毒分析, 1月～<1岁年龄组各项病毒检出率在4组人群中均居首位，国内外有关报道[3, 6]显示在呼吸道感染儿童中年龄3岁以下婴幼儿病毒检测阳性率最高，与本研究结果一致，这可能与新生儿与外界环境接触少且体内含有母体带来的免疫抗体，病毒感染的几率相对较少有关, 1月～<1岁组婴幼儿随着母体免疫抗体的消失而自身免疫器官处于生长发育阶段，对于外源性病原体的抵抗力较差，容易导致病毒感染，随着年龄的增长，免疫器官逐渐发育成熟，机体的抵抗力逐渐增强，病毒的感染率也逐渐下降。

扬州地区为亚热带季风气候区，夏季炎热、冬季寒冷、气候湿润。本研究根据其气候特点，将全年按12月～次年2月为冬季、3～5月为春季、6～8月为夏季、9～11月为秋季分组，检出病毒阳性占比最高的季节是冬季，为51.88%(1 033/1 991), 其次为春季和秋季，夏季检出率最低，占10.35%(206/1 991), 呼吸道病毒的流行和检出率受气候影响明显，与国内外报道一致[7, 8]。按具体病毒看: RSV在冬季的检出数显著超过其他季节检出数，占有绝对优势，为67.25%(805/1 197), 夏季少有病例检出，检出率仅为0.75%(9/1 197), 气温越高，检出率越低，表明气温是RSV流行传播的敏感因素。ADV、IFB检出率最高的季节均为冬季和春季, IFA是冬季和夏季, PIVⅢ为春季和夏季, PIVⅡ则以春季为主，而PIVⅠ各季节检出率无显著差异(P>0.05), 说明气候因素对不同种属的呼吸道病毒流行传播的影响存在显著差异。

本研究结果表明, 1月～<1岁婴幼儿是扬州地区呼吸道病毒感染的高发人群，男性较女性更容易感染病毒，气候变化明显影响呼吸道病毒感染流行，但气候差异对不同病毒检出率的影响并不一致，温度、湿度等气候因数对呼吸道病毒感染流行的影响还有待探讨。

[1] 季伟, 陈正荣, 周卫芳, 等. 2005—2011年苏州地区急性呼吸道感染住院儿童病原体研究[J]. 中华预防医学杂志, 2013, 47(6): 497-503.

[2] 高源, 彭韶. 618例儿童呼吸道感染的病毒病原学分析[J]. 国际儿科学杂志, 2016, 43(4): 326-329

[3] 刘小乖, 李亚绒, 孙欣荣, 等. 小儿急性下呼吸道感染961例病毒检测与临床特点分析[J]. 陕西医学杂志2012, 41(9): 1132-1134.

[4] 崔小健, 张嘉懿, 沈永明, 等. 14 379例患儿呼吸道感染病原体的检测结果分析[J]. 国际检验医学杂志, 2016, 37(19): 2663-2666.

[5] Collins P L, Chanock R M, Murphy B R. Respiratory syncytial virus[M]. Fields virology. 4th ed. Philadelphia: Lippincott Williams&Wilkins, 2001: 1443-1485.

[6] Carroll K N, Hartert T V. The impact of respiratory viral infection on wheezing illnesses and asthma exacerbations[J]. Immunol Allergy Clin North Am, 2008, 28(3): 539-561.

[7] 季伟, 陈正荣, 郭红波, 等. 苏州儿童医院住院儿童呼吸道病毒的流行特点及与气候因素的相关性研究[J]. 中华预防医学杂志, 2011, 45(3): 205-210.

[8] Centers for Disease Control and Prevention(CDC). Respiratory syncytil virus-United States. July 2007-June 2011[J]. MMWR Morb Mortal Wkly Rep, 2011, 60(35): 1203-1206.

DetectionofmultipleviralantigensinpediatricpatientswithrespiratoryinfectioninYangzhou

CHENGWenguo,CHENJian,LIUYan,ZHUXinlin,ZHUJun

(LaboratoryDepartment,AffiliatedHospitalofYangzhouUniversity,YangzhouMaternalandChildHealthCareHospital,Yangzhou,Jiangsu, 225002)

ObjectiveTo investigate multiple viral antigens in pediatric patients with respiratory infection in Yangzhou.MethodsA total of 17 691 children with respiratory infection admitted in our hospital between January 2011 and December 2011 were tested with direct immunof-luorescence method. A total of 7 kinds of virus antigens were detected, including adenovirus (ADV), respiratory syncytial virus (RSV), parainfluenza virusⅠ, Ⅱ, Ⅲ(PIV Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ), influenza virus A/B(IFA/B). Its epidemiological characteristics was analyzed.ResultsThere were altogether 1 991 positive cases, the detection rate was 11.25%(1 991/17 691), in which the proportion of RSV was 60.12% (1 197/1991), followed by PIV Ⅲ 14.27% (284/1 991), ADV 8.04%(160/1 991), PIVⅠ5.42% (108/1 991), IFA5.27% (105/1 991), IFB 4.07% (81/1 991), PIVⅡ 2.81% (56/1 991). There was significant difference between male and female in the detection rate of respiratory virus. Respiratory virus detected rate in 1 month to<1 year old was 59.81% (1 191/1 991), single virus detection rate was the highest. The detection rate of virus for positive was the highest in winter, accounting for 51.88%(1 033/1 991), and the lowest in summer for 10.35%(206/1 991).ConclusionRespiratory virus infection in Yangzhou is influenced by age, season and gender, with infants and young children aged 1 month to 1 year in high-risk infection, and RSV infection occurs mostly, and the male are most likely to be infected in winter.

respiratory tract infections; children; viruses; direct immunofluorescence assay

R 373.1

A

1672-2353(2017)19-087-04

10.7619/jcmp.201719025

2017-04-11