胶束荧光分光光度法测定盐酸小檗碱片中小檗碱的含量

2017-11-06陈鹏郑彦慧

化工管理 2017年31期

关键词：小檗光度法分光

陈鹏郑彦慧

(1.石家庄生产力促进中心，河北石家庄 050091;2.石家庄财经职业学院,河北石家庄 050061)

胶束荧光分光光度法测定盐酸小檗碱片中小檗碱的含量

陈鹏1郑彦慧2

(1.石家庄生产力促进中心，河北石家庄 050091;2.石家庄财经职业学院,河北石家庄 050061)

用乙醇提取盐酸小檗碱片中小檗碱，加入十二烷基硫酸钠(SDS)，用胶束荧光分光光度法测定小檗碱含量。荧光检测波长,Ex=345nm,Em=530nm,工作曲线线性范围0.16μg.mL-1～1.8μg.mL-1，检出限6.67ng.mL-1，回收率为100.38%(RSD=0.83%)，测得盐酸小檗碱片中每片含0.109g盐酸小檗碱，与规定值0.1g/片相近。本方法简单、无毒、准确，具有一定的参考价值。

小檗碱；十二烷基硫酸钠；胶束荧光分光光度法

对于小檗碱含量的测定已经有多种方法，如高效液相色谱法[1]，薄层色谱-荧光分光光度法[2]，酸性染料比色法[3]，荧光分光光度法[4]，紫外分光光度法[5]等。荧光分光光度法灵敏度高，检出限低，但盐酸小檗碱本身的荧光强度很弱[6]，荧光量子产率只有0.008，本文采用胶束荧光分光光度法，用无水乙醇浸泡盐酸小檗碱片溶出盐酸小檗碱，加入十二烷基硫酸钠(SDS)提高灵敏度，测量盐酸小檗碱片中盐酸小檗碱的含量。实验结果表明：胶束荧光分光光度法具有设备简单，操作方便，测定的小檗碱含量准确，可用于药品中小檗碱的质量控制。

1 仪器与试剂

1.1 仪器

F-4500荧光分光光度计(Hitachi)； 868型PH/ISE测试仪(Orion)。

1.2 试剂

盐酸小檗碱(Berberine Hydrochloride Berb编号:110713-200208，中国药品生物制品检定所)；盐酸小檗碱片(东北制药总厂，每片0.15g含0.1g盐酸小檗碱)，十二烷基硫酸钠(SDS分析纯)，三酸(磷酸、硼酸和乙酸)与氢氧化钠溶液。

2 方法与结果

2.1 试液的制备

(1)对照品溶液的制备。精密称定干燥至恒重的盐酸小檗碱纯品4.00mg，用乙醇溶解并定容于100mL容量瓶中,得40.00μg﹒mL-1的贮备液。(2)供试品溶液的制备。盐酸小檗碱片,研磨成粉末,分别精密称取适量粉末3份于3个锥形瓶中，用乙醇浸泡24小时后，过滤，用乙醇定容于100ml容量瓶中，即得供试品溶液。(3)SDS溶液的制备。精密称定7.20gSDS,用纯净水溶解，定容于250ml容量瓶中，得0.10mol﹒L-1的SDS溶液。

2.2 测定条件的确定

(1)SDS的影响。SDS为表面活性剂，能形成胶束，胶束的存在,大大降低了荧光分子的非辐射过程速率,而辐射速率常数改变不大，因此,量子效率增加,激发光寿命增长,客体分子穿入、吸附和包络于胶束内外,使其行动受到限制,客体分子有效吸光面积、摩尔吸光系数增加,其激发态也不易被溶液中荧光熄灭体碰撞而获得保护,从而荧光增强[6]。

加入SDS后，小檗碱的荧光量子产率提高，提高了灵敏度，用荧光分光光度计扫描，盐酸小檗碱的最大激发波长为345nm，最大发射波长为530nm，SDS在此处无荧光，当盐酸小檗碱加入SDS后，此处荧光强度增强，未见红移和紫移现象，且当达到SDS的临界浓度0.008mol﹒L-1后，SDS形成稳定的胶束，盐酸小檗碱的荧光强度几乎不变。

(2)pH的影响。固定盐酸小檗碱的浓度，固定SDS的浓度为0.01mol ﹒L-1，改变pH 值，见图1。

图1 盐酸小檗碱在不同pH下的荧光光谱(左)和530nm处荧光强度随PH变化曲线(右)

盐酸小檗碱的荧光性质稳定，荧光强度随PH变化稳定，测盐酸小檗碱片中盐酸小檗碱的含量时，加入SDS，选择中性条件下，固定激发波长345nm，发射波长530nm进行测定。

2.3 实验方法

(1)工作曲线的绘制。分别吸取浓度为40.00μg﹒mL-1的盐酸小檗碱纯品溶液0.04，0.05，0.08，0.1，0.15，0.2，0.25，0.35,0.45ml于10ml容量瓶中，再分别加入5.00ml 0.10mol﹒L-1的SDS溶液，用纯净水定容于10ml，摇匀，在Ex=345nm、Em=530nm波长处扫描荧光光谱，见图2。以荧光强度为纵坐标，含量为横坐标作工作曲线，见图3。盐酸小檗碱含量在0.16～1.80μg﹒mL-1范围内线性关系良好，回归方程为： Y＝42.45026 ＋335.66581X ，r=0.99934。