胃癌原发灶和淋巴结转移灶HER2表达的临床意义

杨金凤 江 军 王秋生 马世文 宋玉青

胃癌原发灶和淋巴结转移灶HER2表达的临床意义

杨金凤 江 军 王秋生 马世文 宋玉青

目的观察HER2在胃癌原发灶和淋巴结转移灶中的表达及其临床意义。方法选取胃癌患者140例，其中淋巴结转移94例。采集胃癌患者的原发灶、淋巴结转移灶及癌旁组织，采用免疫组织化学法(Elivision)方法检测3种组织中HER2蛋白表达情况。结果140例胃癌原发灶组织中HER2蛋白阳性表达与胃癌TNM分期、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05)，而与患者性别、年龄和分化程度无关(P>0.05)，癌旁组织中HER2表达与性别、年龄、分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴结转移均无关(P>0.05)；HER2蛋白在胃癌原发灶、淋巴结转移灶中表达水平均高于癌旁组织，差异有统计学意义，而94例淋巴结转移灶和对应的胃癌原发灶中HER2表达的差异无统计学意义；94例有淋巴结转移的患者淋巴结转移灶与原发灶HER2表达一致率为89.4%，两类标本HER2表达状态具有一致性(Z=6.386，P<0.001)。结论胃癌HER2蛋白的阳性表达与胃癌TNM分期、浸润深度及淋巴结转移有关，提示HER2的表达与胃癌的浸润转移有关；胃癌原发灶和淋巴结转移灶HER2的表达具有较好的一致性，患者在不能获取原发病灶的情况下，检测转移灶中HER-2可能为靶向治疗的选择提供依据，为晚期胃癌患者带来希望。

HER2；胃癌原发灶；免疫组织化学法；淋巴结转移灶；临床意义

(ThePracticalJournalofCancer,2017,32:1570～1573)

胃癌是临床上常见的恶性肿瘤，目前我国胃癌的发病率和死亡率均高于全球水平[1]。2010年发表的ToGA实验研究[2]证实采用曲妥珠单抗联合化疗治疗提高了人类表皮生长因子受体2(HER2)阳性的晚期胃癌和胃食管连接部腺癌患者的生存期，为晚期胃癌患者的治疗带来了新的希望，如何检测HER2状态使其从靶向治疗中受益具有重要的临床意义。本研究选取2012年至2015年医院诊治的胃癌患者140例，运用免疫组织化学法(Elivision)方法探讨HER-2在胃癌原发灶和淋巴结转移灶中的表达及临床意义，报告如下。

1 材料与方法

1.1 临床资料

选取2012年至2015年医院收治的胃癌患者140例，所有患者行开腹或腹腔镜手术并经病理科确诊为腺癌，术前均未接受任何化疗、放疗或免疫等治疗，其中140例胃癌原发灶组织、对应的140例癌旁组织及对应的淋巴结转移灶组织94例。140例胃癌患者，男性98例，女性42例；年龄23～83岁，中位年龄65岁；按WHO国际分类标准，高中分化型腺癌74例，低分化型腺癌66例；按照国际抗癌联盟/美国癌症联合委员会(UICC/AJCC)公布的TNM分期标准(2010年，第七版)：Ⅰ～Ⅱ期67例，Ⅲ～Ⅳ期73例，T1～T238例，T3～T4102例，有淋巴结转移94例，无淋巴结转移46例。

1.2 方法

按照2011版《胃癌HER2检测指南》[3]，采用免疫组化Elivision方法，检测3种组织HER2蛋白表达方法：将采集的胃癌原发灶、癌旁组织及淋巴结转移灶蜡块进行切片，60 ℃烤片1 h，脱蜡水化，PBS冲洗3 min×3次。pH 6.0柠檬酸盐缓冲液煮沸热修复，自然冷却至室温，PBS冲洗2 min×2次。滴加3%的过氧化氢室温下孵育10 min，以阻断内源性过氧化物酶活性，PBS冲洗3 min×3次。滴加一抗室温下孵育60 min，PBS冲洗3 min×3次。滴加聚合物增强剂(试剂A)，室温下孵育20 min，PBS冲洗3 min×3次，滴加酶标抗鼠/兔聚合物(试剂B)室温下孵育30 min，PBS冲洗3 min×3次，DAB显色，显微镜下进行3～5 min观察，自来水冲洗，常规苏木精复染，1%HCl分化，自来水冲洗，蓝化，梯度酒精脱水，透明封片，显微镜下观察。

1.3 免疫组化判断方法

应用修订后HercepTest评分标准[4]进行结果判定：0：无反应或<10% 肿瘤细胞膜染色；1+：≥10% 肿瘤细胞微弱或隐约可见膜染色；仅有部分细胞膜染色；2+：≥10% 肿瘤细胞有弱到中度的基底侧膜、侧膜或完全性染色；3+：≥10% 肿瘤细胞基底侧膜、侧膜或完全性膜强染色。本研究将0与+视为阴性表达，2+与3+视为阳性表达。

1.4 统计分析

应用SPSS 17.0软件处理，计数资料组间比较行χ2检验及Fisher确切概率法，一致性比较采用Kappa检验，P<0.05差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HER2蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系

在140例胃癌原发灶中HER2蛋白阳性表达与胃癌TNM分期、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05)，与胃癌临床病理特征性别、年龄、分化程度无关(P>0.05)；在140例对应的癌旁组织中HER2蛋白阳性表达与胃癌临床特征性别、年龄、分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴结转移均无关，见表1。

2.2 HER2蛋白表达在胃癌不同病变组织中的表达

胃癌原发灶及淋巴结转移灶中HER2蛋白阳性表达在光学显微镜下显示为包膜棕黄色着色。140例胃癌病例中，胃癌原发灶中有23例HER蛋白表达阳性，阳性率为16.4%(23/140)，明显高于癌旁组织的阳性表达率[1.4%(2/140)]，两者差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

94例有淋巴结转移的病例中，14例淋巴结转移灶HER2蛋白表达阳性，阳性率为14.9%，对应的原发灶中有20例表达阳性，阳性率为21.3%，淋巴结转移灶中HER2蛋白阳性表达率稍低于对应的原发灶，但两者差异无统计学意义(P>0.05)；HER2蛋白在淋巴结转移灶中表达率明显高于对应的癌旁组织，两者差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

2.3 HER2蛋白在胃癌原发灶及淋巴结转移灶中的表达情况比较

94例有淋巴结转移的病例中，20例胃癌原发灶HER2表达阳性，14例转移灶表达阳性，两者HER2均阳性表达为12例，均阴性表达72例，一致率为89.4%，经Kappa检验，胃癌原发灶与淋巴结转移灶中HER2表达状态具有一致性(Z=6.386，P<0.001)，见表4。

3 讨论

人类表皮生长因子受体-2 (human epidermal growth factor receptor-2,HER2)基因定位于染色体17q21，编码产物为1种相对分子质量为185kD的单链跨膜糖蛋白(又称为p185蛋白)，是表皮生长因子受体家族成员之一，其结构上由胞外配体结合区，跨膜区和胞内蛋白酪氨酸激酶区3个部分组成[5]。在正常情况下该基因处于非激活状态，当受到体内外因素作用后，其结构或表达调控失常，激活酪氨酸激酶区，引发如Ras/MAPK，PI3P/Akt等一系列的细胞内信号传导级联反应，进而从多个途径影响肿瘤细胞增殖、凋亡、粘附、迁移等生物活动[6-7]。目前研究发现HER2在乳腺癌、结肠癌、肺癌、胃癌等多种恶性肿瘤中存在不同程度的基因扩增和/或蛋白过表达[8]，提示HER2在恶性肿瘤的发生发展中具有重要意义。

表1 HER2蛋白阳性表达与胃癌临床病理特征的关系/例

注：*为Fisher确切概率法。

表2 HER2蛋白在140例胃癌原发灶及癌旁组织中的表达情况(例，%)

表3 HER2蛋白在94例不同胃癌组织中的表达情况(例，%)

表4 HER2蛋白在胃癌原发灶及淋巴结转移灶中的表达(例，%)

HER2蛋白在胃癌中过表达是在1986年由Sakai等首次报道[9]，随着分子靶向研究的不断深入，针对HER2阳性的靶向抗体在临床上得到应用。2010年发表的由24个国家参与的ToGA实验研究[2]证实采用曲妥珠单抗联合化疗治疗能提高HER2阳性的晚期胃癌和胃食管连接部腺癌患者的生存期。在该研究入组阶段，运用免疫组织化学(Immunohistochemistry，IHC)和荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)方法筛查了3803例胃癌标本，结果显示，胃癌HER2阳性(IHC 2+/FISH阳性或IHC 3+)所占比例为16.6%[10]。本研究按照2011版《胃癌HER2检测指南》推荐的检测流程，运用免疫组织化学法(Elivision)方法检测HER2蛋白在胃癌中的阳性率为16.4%，明显高于癌旁组织中的阳性表达率，提示HER2蛋白可能在胃癌发生中起到重要作用。

国内外研究发现，HER2在胃癌中的表达率不尽相同，而且与胃癌的临床病理特征之间关系亦无统一的结论。Bǎdescu等[11]研究表明，HER2表达与Lauren分型、肿瘤分化程度和肿瘤分期有关，裴波等[12]研究认为HER2表达还与有无淋巴结转移和发病的年龄有关。Aoyama等研究结果表明[13]，HER2过表达与肿瘤分化程度、 Lauren分型、淋巴结转移、静脉浸润和淋巴管浸润有关，它与肿瘤大小、浸润深度和肿瘤分期无相关性。然而有学者[14]报道HER2表达与胃癌的临床病理特征之间无明显相关性。本研究中，HER2蛋白阳性表达与胃癌临床病理体征中性别、年龄、分化程度等差异无统计学意义(P>0.05)，HER2蛋白阳性表达与胃癌TNM分期、浸润程度及淋巴结转移关系密切(P<0.05)，提示：HER2蛋白在胃癌的发展及浸润转移中发挥了重要的作用，能作为判断胃癌预后的重要指标之一。

在本研究的94例伴淋巴结转移的病例中，淋巴结转移灶与对应的原发病灶中HER2表达一致率为89.4%，两类组织中HER2表达状态具有一致性(P<0.001)。关于胃癌原发灶和淋巴结转移灶中HER2状态的比较中，有研究发现原发灶与淋巴结转移灶中的HER2的状态具有较高的一致性[15-16]，由此看出：淋巴结转移灶对原发灶的参考价值较大，当进展期胃癌患者失去手术机会或复发转移，无法获得原发灶标本时，淋巴结转移灶中的HER2表达检测结果具有一定的参考价值。

综上所述，胃癌HER2蛋白的阳性表达与胃癌TNM分期、浸润深度及淋巴结转移有关，提示HER2的表达与胃癌的浸润转移有关；胃癌原发灶和淋巴结转移灶HER2的表达具有较好的一致性，患者在不能获取原发病灶的情况下，检测转移灶中HER2可能为靶向治疗的选择提供依据，为晚期胃癌患者带来希望。

[1] Ferlay J,Soerjomataram I,Dikshit R,et al.Cancer inciden-

ce and mortality worldwide:sources,methods and major patterns in GLOBOCAN 2012〔J〕.Int J Cancer,2015,136(5):E359-E386.

[2] Bang YJ,Van Cutsem E,Feyereislova A,et al.Trastuzumab in combination with chemotherapy versus chemotherapy alone for treatment of HER2-positive advanced gastric or gastro-oesophageal junction cancer(ToGA):A phase 3,open-label,randomised controlled trial〔J〕.Lancet,2010,376(9742):687-697.

[3] 胃癌HER2检测指南编写组.胃癌HER2检测指南〔J〕.中华病理学杂志,2011,40(8),553-557.

[4] Hofmann M,Stoss O,Shi D,et al.Assessment of a HER2 scoring system for gastric cancer:results from a validation study〔J〕.Histopathology,2008,52(7):797-805.

[5] Stern DF,Heffernan PA,Weinberg RA.P185,a product of the neu proto-oncogene,is a receptorlike protein associated with tyrosine kinase activity〔J〕.Mol Cell Biol,1986,6(5),1729-1740.

[6] Sukawa Y,Yamamoto H,Nosho K,et al.Her-2 expression and PI3K-Akt pathway alternation in gastric cancer〔J〕.Digestion,2014,89(1):12-17.

[7] Zheng L,Ren JQ,Zhang L,et al.Overexpression of HER2/neu downregulates wild p53 protein expression via PI3K and Ras/Raf/MEK/ERK pathways in human breast cancer cells〔J〕.Zhonghua Bing Li Xue Za Zhi,2004,33(4):358-362.

[8] Yan M,Schwaederle M,Arguello D,et al.HER2 expression status in diverse cancers:review of results from 37,992 patients〔J〕.Cancer Metastasis Rev,2015,34(1):157-164.

[9] Sakai K,Mori S,Kawamoto T,et al.Expression of epidermal growth factor receptors on normal human gastric epithelia and gastric carcinoma〔J〕.J Natl Cancer Inst,1986,77(5):1047-1052.

[10] Van Cutsem E,Bang YJ,Feng-Yi F,et al.HER2 screening data from ToGA:targeting HER2 in gastric and gastroesophageal junction cancer〔J〕.Gastric Cancer,2015,18(3)：476-484.

[11] Bǎdescu A,Georgescu CV,Vere CC,et al.Correlations between Her2 oncoprotein,VEGF expression,MVD and clinicopathological parameters in gastric cancer〔J〕.Rom J Morphol Embryol,2012,53(4):997-1005.

[12] 裴 波，寸英丽，查 勇，等.胃癌组织HER-2表达预后意义分析〔J〕.中华肿瘤防治杂志,2015,22(5):359-362.

[13] Aoyama T,Hayashi T,Fujikawa H,et al.Clinical significa-

nce of the human epidermal growth factor receptor 2(HER2) in patients with recurrent gastric cancer who received S-1 adjuvant chemotherapy〔J〕.Gan To Kagaku Ryoho,2013,40(12):1647-1649.

[14] García I,Vizoso F,Martín A,et al.Clinical significance of the epidermal growth factor receptor and HER2 receptor in resectable gastric cancer〔J〕.Ann Surg Oncol,2003,10(3):234-241.

[15] Bozzetti C,Negri FV,Lagrasta CA,et al.Comparison of H-

ER2 status in primary and paired metastatic sites of gastric cacinoma〔J〕.Br J Cancer,2011,104(9):1372-1376.

[16] Kochi M,Fujii M,Masuda S,et al.Differing deregulation of HER2 in primary gastric cancer and synchronous related metastatic lymph nodes〔J〕.Diagn Pathol,2013,8(21):191.

ClinicalSignificanceofHER2ExpressioninPrimaryGastricCancerandLymphNodeMetastasis

YANGJinfeng,JIANGJun,WANGQiusheng,etal.

AnqingHospital,Anqing,246003

ObjectiveTo investigate the expression of HER2 in primary gastric carcinoma and lymph node metastasis and its clinical significance.Methods140 patients with gastric cancer,including 94 cases of lymph node metastasis,were selected.The primary foci,lymph node metastasis and adjacent tissues of gastric cancer patients were collected.The expression of HER2 protein in 3 tissues was detected by immunohistochemistry(Elivision).Results140 cases of primary gastric cancer tissues,the positive expression of HER2 protein was related with TNM staging,depth of invasion and lymph node metastasis(P<0.05),but not with gender,age and degree of differentiation(P>0.05),paracancerous tissue HER2 expression was not related with gender,age,degree of differentiation,TNM stage,invasion depth and lymph node metastasis(P>0.05);the expression of HER2 protein in primary gastric carcinoma and metastatic lymph nodes in level were higher than the adjacent tissues,the difference was statistically significant,and 94 cases of gastric cancer,lymph node metastasis and corresponding primary foci of HER2 expression difference was statistically significant;94 cases with lymph node node metastasis node metastasis and primary tumor HER2 expression rate was 89.4%,the 2 tissues were consistent with the expression of HER2(Z=6.386,P<0.001).ConclusionThe positive expression of HER2 protein in gastric cancer is related with TNM staging,depth of invasion and lymph node metastasis,suggesting that HER2 expression is related with invasion and metastasis of gastric cancer;expression of primary tumor and lymph node metastasis of HER2 have good consistency,the patients obtain primary lesions in the case of not detecting metastases HER-2 may provide the basis for targeted treatment of choice,and hope for patients with advanced gastric cancer.

HER2 protein;Primary gastric cancer;Immunohistochemistry;Lymph node metastases;Clinical Significance

246003 海军安庆医院

10.3969/j.issn.1001-5930.2017.10.002

R735.2

A

1001-5930(2017)10-1570-04

2016-09-22

2017-05-23)

(编辑吴小红)