AD患者血清Hcy 叶酸及维生素B12与认知功能减退的关系研究

王 聪 张杰文

郑州大学人民医院，河南 郑州 450003

AD患者血清Hcy 叶酸及维生素B12与认知功能减退的关系研究

王 聪 张杰文△

郑州大学人民医院，河南 郑州 450003

目的研究维生素B12和叶酸水平以及同型半胱氨酸是否对阿尔茨海默症(AD)患者存在潜在影响。方法运用美国国立神经病学、语言障碍和卒中-阿尔茨海默病和相关疾病学会(NINCDS-ADRDA)标准严格筛选AD患者95例。从体检中心选取年龄、性别及受教育程度匹配的无脑血管病、无认知障碍的健康对照组76例。采用化学发光微粒子免疫分析法检测171例年龄≥50岁的老年痴呆患者血清维生素B12和叶酸水平。采用肝素抗凝的血浆进行循环酶法Hcy测定。探讨血清低水平维生素B12和叶酸以及高水平同型半胱氨酸是否是老年痴呆发生的危险因素。认知功能的评价采用目前通用的神经心理测试：中文版简易精神状态检查表(MMSE)。采用Logistic回归分析评估血清维生素B12、叶酸以及同型半胱氨酸与老年痴呆患病风险的关系。结果171例中153例叶酸正常，其中对照组79例(51.63%)，实验组74例(43.27%)；124例维生素B12正常，其中对照组60例(48.39%)，实验组64例(51.61%)；101例同型半胱氨酸正常，其中对照组51例(50.50%)，实验组50例(49.50%)。作各协变量调整后，AD患者血清维生素B12及叶酸水平以及同型半胱氨酸与CMMES评分无相关性(P>0.05)。但低血清维生素B12水平以及低叶酸水平与AD患病风险相关。结论血清维生素B12和叶酸水平以及同型半胱氨酸水平与AD患者认知功能之间无明显关联。低水平维生素B12以及低水平叶酸可能通过某种机制增加AD患病风险，低水平同型半胱氨酸可能通过某种机制降低AD患病风险。

维生素B12；叶酸；同型半胱氨酸；阿尔茨海默症；认知功能障碍

阿尔茨海默病是发生于老年和老年前期、以进行性认知功能障碍和行为损害为特征的中枢神经系统退行性病变。临床上表现为记忆障碍、失语、失用、失认、视空间能力损害、抽象思维和计算力损害、人格和行为改变等。流行病学调查显示，65岁以上老年人AD患者患病率在发达国家为4%～8%，我国为3%～7%，女性高于男性[1]。阿尔茨海默病的危险因素有低教育程度、膳食因素、吸烟、女性雌激素水平降低、高血糖、高胆固醇、高同型半胱氨酸和血管病因素等。同型半胱氨酸又称高半胱氨酸(homocysteine，Hcy)，是甲硫氨酸的中间代谢产物，在体内由甲硫氨酸转甲基后生成，有两种去路，一是Hcy可在胱硫醚缩合酶(CBS)和胱硫醚酶的催化下生成半胱氨酸，需维生素B6的参与，或经巯基氧化结合生成高胱氨酸；另外，Hcy还可在叶酸和维生素B12的辅助作用下再甲基化重新合成甲硫氨酸，此过程需甲硫氨酸合成酶(MS)的催化，且必须有N5-甲基四氢叶酸作为甲基的供体，后者是四氢叶酸经5，10-甲烯四氢叶酸还原酶(MTHFR)催化而产生。Shen等[2]用Meta分析研究68项AD与Hcy关系的文献发现，Hcy含量增多可能增加AD的发病风险；低水平的维生素B12或叶酸会增加患老年痴呆的患病风险[3-4]。本研究探讨叶酸、维生素B12以及同型半胱氨酸与认知损害关系。

1 对象与方法

1．1研究对象AD组：选择2015-10—2017-01郑州大学人民医院神经内科门诊及住院患者，均符合 NINCDS-ADRDA的可能诊断标准。男40例，女55例，年龄47～90岁。对照组：同期选择76例无临床脑血管病史、无认知功能障碍的志愿者为对照组。男40例，女36例，年龄45～89岁。所有研究对象均排除急慢性肾功能不全或严重的肝功能异常、恶性肿瘤、甲状腺功能障碍、近期有心肌梗死史、近期有感染征象、2周内有服用B族维生素史、目前正在使用抗精神病药或抗焦虑药物和其他可能导致维生素B12和叶酸水平变化的治疗药物。

1．2血清维生素B12和叶酸水平以及同型半胱氨酸测定符合入组标准的研究对象，经知情同意后，采用ABBOTT Architect i2000SR全自动免疫检测系统(美国Abbott公司)及配套试剂[化学发光微粒子免疫分析法(chemiluminescence microparticle immunoassay，CMIA)]测定血清维生素B12和叶酸。使用北京九强公司的循环酶法试剂盒由生化全自动分析仪测血浆同型半胱氨酸水平。

1．3认知功能测定简明精神状态量表(MMSE)涵盖了时间和空间定向力、即刻记忆、注意和计算力、语言复述、视空间能力。评分者不知受试者的血清维生素B12和叶酸水平。

2 结果

2．1正常对照组和AD组比较对171例研究对象人口学特征、认知功能评估及血清维生素B12、叶酸水平以及同型半胱氨酸进行分析显示，正常对照组和AD组MMSE评分、血清维生素B12水平、叶酸水平及同型半胱氨酸水平差异均有统计学意义(P<0.05)，而2组年龄、性别、受教育年限差异均无统计学意义(P>0.05)。两两比较显示，AD组血清维生素B12水平明显低于正常对照组(P<0.05)。正常对照组MMSE评分高于AD组(P<0.05)。AD组中血清维生素B12水平、同型半胱氨酸水平与MMSE得分呈正相关，见表1。171例中153例叶酸正常，对照组79例(51.63%)，实验组74例(43.27%)；124例B12正常，对照组60例(48.39%)，实验组64例(51.61%)；101例Hcy正常，对照组51例(50.50%)，实验组50例(49.50%)。所有研究对象的人口学特征和临床特征见表2。

表1 正常对照组和AD组基线特征分析

表2 正常对照组和AD组基线特征

2．2血清维生素B12和叶酸水平与认知功能的相关性分析采用Pearson相关分析评估各组认知功能测试评分与维生素B12、叶酸、年龄、受教育年限的相关性。作年龄、性别、受教育年限的调整后，AD患者血清维生素B12水平、同型半胱氨酸水平以及叶酸与认知功能测试评分无相关性(P>0.05)。正常对照组血清维生素B12水平同型半胱氨酸水平以及叶酸与认知功能测试评分无相关性(P>0.05)。见表3、表4。

表3 实验组MMSE评分与年龄、BMI及血清维生素B12、叶酸的相关性

表4 正常对照组MMSE评分与年龄、血清维生素B12、叶酸以及同型半胱氨酸的相关性

2．3血清维生素B12、叶酸以及同型半胱氨酸与老年痴呆患病风险的关系采用Logistic回归分析评价血清维生素B12、叶酸以及同型半胱氨酸与AD的相关性，所有线性回归模型均进行年龄、性别、受教育年限调整，AD患者中的结果显示，1/2/3组的叶酸可作为发病的危险因素(OR>1)，2/3组维生素B12可作为危险因素(OR>1)，2组Hcy(极低含量)可作为保护因素(OR=0.245<1)。见表5、表6。

表5 AD组Logistic回归分析

表6 AD组3个因素Logistic回归分析结果

3 讨论

AD是最常见的老年痴呆之一，全球有240万AD患者[5]。流行病学调查显示，65岁以上老年人AD患者患病率在发达国家为4%～8%，我国为3%～7%，女性高于男性。老年痴呆成为加重国家的养老负担，纵使世界很多研究所在研究针对性的治疗药物，但至今仍无特效药物。因此，及时检测以及预防成为重中之重。有研究表明[6-7]，叶酸、维生素B12、维生素B6对于认知功能是必不可少的[8-9]。叶酸、维生素B12与同型半胱氨酸代谢含量呈负相关。研究表明，同型半胱氨酸的增加可能会引起认知功能障碍[10-11]。同型半胱氨酸在体内的代谢途径有3条，其中1条是同型半胱氨酸在蛋氨酸合成酶(methionine synthase，MS)及辅酶维生素B12参与下，与5-甲基四氢叶酸合成蛋氨酸和四氢叶酸，而5-甲基四氢叶酸是在亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR)催化下还原而来。由于维生素B12是蛋氨酸合成酶的辅酶，叶酸是体内甲基的供体，当两者缺乏时可导致MTHFR及CBS活性的降低，阻碍蛋氨酸的再生成，从而造成Hcy在体内的蓄积。血清叶酸和维生素B12水平与血浆Hcy水平呈负相关，叶酸和维生素B12水平越低，血浆Hcy水平越高。由于老年人胃酸分泌逐渐减少，吸收维生素B12的能力也逐渐降低，加上其他原因，营养状况较差也较为常见，且有大量数据显示维生素B12随着年龄的增长而减少[12]。因此，有相当比例的老年痴呆患者血清维生素B12水平较低。 本研究显示，171例对象中7例(4.1%)血清叶酸降低，而AD患者血清叶酸平最低(P<0.05)，171例对象中30例(17.5%)血清维生素B12降低，而AD患者血清维生素B12水平最低(P<0.05)。将线性回归模型进行年龄、性别、受教育年限和BMI调整，结果显示，血清维生素B12以及叶酸可作为AD发生的危险因素。本研究结果表明，血清维生素B12和叶酸水平以及同型半胱氨酸与AD的认知功能无明显相关性，但低水平维生素B12以及低水平叶酸可能会增加老年人群患AD的风险。研究还显示，维持较低水平同型半胱氨酸水平对延缓认知功能的减退有可能有益。原因可能是由于Hcy的神经毒性作用或是减少了SAM(s-腺苷甲硫氨酸合成酶)的可用性导致大脑组织的低甲基化作用。因此可以适当补充叶酸、维生素B12。叶酸可以从绿叶蔬菜(如花椰菜、甘蓝、菠菜)、大豆、豌豆、柑橘类水果和香瓜中摄取。成年人叶酸推荐摄人量(RDA)为400 μg/d，相当于一碗强化早餐。维生素B12可以服用维生素B12补充剂或摄人维生素B12强化食品(包括植物乳或麦片)可补充维生素B12。成年人每天需要维生素B122.4 μg。维生素B12还可以从奶及肉制品中获取，但由于老年吸收的较少，因此，美国政府推荐，所有50岁以上的中老年人都要服用维生素B12补充剂，素食者或有维生素B12吸收障碍者，不分年龄，都应该服用维生素B12补充剂。然而，由于本研究结果只是回顾性病例对照研究，并不能说明叶酸、维生素B12及同型半胱氨酸与痴呆因果关系，只能说明低剂量叶酸、维生素B12是痴呆发生的危险因素，以及体内较低含量的同型半胱氨酸对于延缓痴呆的进展有可能有用，因此还需更多的前瞻性研究予以证实。

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(收稿 2017-06-27)

责任编辑：夏保军

CorrelationofcognitiveimpairmentwithvitaminB12andfolicacidandHomocysteineinelderlydementiapatients

WangCong，ZhangJiewen

ThePeople’sHospitalofZhengzhouUniversity，Zhengzhou450003，China

ObjectiveTo investigate the correlations of vitamin B12and folic acid and homocysteine with Alzheimer’s disease (AD)．MethodsSerum vitamin B12and folic acid levels were determined by chemiluminescence microparticle immunoassay in 95 elderly dementia patients ≥ 50 years old and 76 cognitive normal subjects (normal control group)．The low levels of vitamin B12and folic acid and homocysteine as high-risk factors for AD were analyzed．Cognitive function was evaluated with comprehensive neuropsychological tests，such as Chinese Version of Mini Mental State Examination (CMMSE)．Pearson’s correlation analysis was performed to evaluate the relationship among serum vitamin B12，folic acid，homocysteine，age，education year，and cognitive function in all groups．Logistic regression was used to evaluate the association of vitamin B12，folic acid and homocysteine with AD．ResultsA total 96 patients with AD were determined．There were 153 cases of folic acid in the 171 cases，including 79 in normal group (51.63%)and 74 cases in the experimental group (43.27%)．The normal number of vitamin B12was found in 124 cases，including 60 in normal group (48.39%)，and 64 cases in the experimental group (51.61%)．101 homocysteine was normal．Among them，51 cases (50.50%)and 50 cases (49.50%)were normal．Vitamin B12，folic acid or homocysteine level had no correlation with CMMSE scores after covariates’ adjustments (P>0.05)．Low vitamin B12level and folic acid was correlated with the risk of AD．ConclusionVitamin B12，folic acid and homocysteine are not correlated with cognitive impairment．However，low vitamin B12level and folic acid may be correlated with an increased risk for AD；Low levels of homocysteine may reduce AD risk by some mechanism．

Vitamin B12；Folic acid；Homocysteine；Alzheimer’s disease；Cognitive impairment

R749.1+6

A

1673-5110(2017)19-0043-05

10.3969/j.issn.1673-5110.2017.19.010

△通信作者：张杰文(1965—)，男，教授，主任医师，硕士、博士生导师。研究方向：痴呆与认知障碍。Email：2864048621@qq.com