48%苯·苄·硝草酮可湿性粉剂高效液相色谱分析

易芬远，杨淑兰，罗家琪，马就庆，梁唐敏，李 略，王 超，柯 敏

（1.广西化工研究院，广西 南宁 530001；2.中国农业大学理学院，北京 100000；3.广西三晶化工科技有限公司，广西 南宁 530001）

48%苯·苄·硝草酮可湿性粉剂高效液相色谱分析

易芬远1，杨淑兰1，罗家琪2，马就庆1，梁唐敏1，李 略1，王 超1，柯 敏3

（1.广西化工研究院，广西 南宁 530001；2.中国农业大学理学院，北京 100000；3.广西三晶化工科技有限公司，广西 南宁 530001）

建立了48%苯·苄·硝草酮可湿性粉剂的高效液相色谱分析方法。使用ODS-C18柱和可变波长紫外检测器，以乙腈-水（体积比50∶50，pH=3）的混合溶剂为流动相，在流速1.0mL·min-1和230nm波长下，用外标法对48%苯·苄·硝草酮可湿性粉剂中3种有效成分同柱定量分析。结果表明，苯噻酰草胺、苄嘧磺隆和硝磺草酮的测定线性关系系数分别为0.9988、0.9981和0.9991，标准偏差分别为0.192、0.060和0.036，变异系数分别为0.458%、2.013%和1.204%，平均回收率分别为98.72%、99.95%和99.52%。该方法简便、精确度高、重复性好。

苯噻酰草胺；苄嘧磺隆；硝磺草酮；高效液相色谱；定量分析

苯噻酰草胺是选择性内吸传导型酰苯胺类除草剂，是细胞生长和分裂抑制剂，对幼原母细胞的分裂有特别强的抑制作用，可有效防除禾本科杂草，对稗草在萌芽至2叶期有特效，对千金子、牛毛毡、泽漆、鸭舌草、节节菜、异形莎草、扁莎草、碎米莎草及多年水生莎草也有一定的防效[1]。苄嘧磺隆多用于防除水稻田一年生及多年生阔叶杂草及莎草，在作物芽后、杂草芽前及芽后施药，对鸭舌草、节节菜、眼子菜、矮慈姑以及莎草科杂草防除效果良好，该药剂的有效成分在水中扩散迅速，保水时使用效果好，其对水稻、小麦等作物安全[2]。硝磺草酮是一种能够抑制羟基苯基丙酮酸酯双氧化酶（HPPD）的芽前和苗后广谱选择性除草剂，可有效防治主要的阔叶草和一些禾本科杂草。作者前期研究表明，将三者混合制成48%苯·苄·硝草酮可湿性粉剂，用于防除水稻田杂草，除草效果较单剂、二元复配制剂提高，杀草谱广，且对环境安全，符合农药低毒、高效的发展趋势。近年来有关苯噻酰草胺、苄嘧磺隆和硝磺草酮检测方法的报道不少，如王清竹[3]建立了50%苯噻酰草胺·吡嘧磺隆可湿性粉剂高效液相色谱分析方法；褚明杰[4]建立了测定除草剂苄嘧磺隆的高效液相色谱法；罗璇等[5]采用高效液相色谱仪研究了5%硝磺草酮-50%莠去津悬浮剂中硝磺草酮和莠去津同时测定的检测方法。但苯噻酰草胺、苄嘧磺隆和硝磺草酮混配制剂中3种有效成分同时测定的方法尚未见研究报道。作者经过反复实验，采用高效液相色谱法，优化色谱条件，一次进样可同时定量分析苯噻酰草胺·苄嘧磺隆·硝磺草酮可湿性粉剂复配制剂中的3种有效成分，方法简单、高效、准确，灵敏度高，重复性好。

1 实验部分

1.1 仪器与药剂

Ultimate 3000高效液相色谱仪，色谱工作站，可变波长紫外检测器（色谱柱 ODS-C18，5μm，250mm×4.6mm），超声波清洗器，过滤器（过滤膜孔径 0.45μm）。

乙腈（色谱纯级，用前经滤膜过滤），磷酸（分析纯），苯噻酰草胺标准品（已知质量分数≥98%），苄嘧磺隆标准品（已知质量分数≥98%），硝磺草酮标准品（已知质量分数≥99%，标样购买于沈阳化工研究院），双蒸水，48% 苯·苄·硝草酮可湿性粉剂（广西壮族自治区化工研究院）。

1.2 色谱条件

流动相：乙腈∶水=50∶50（用磷酸调pH=3），经过滤器过滤并脱气。流速1.0 mL·min-1，柱温为室温，检测波长230nm，进样量20μL。保留时间：硝磺草酮约4.5min，苄嘧磺隆约5.7min，苯噻酰草胺约7.8min。

1.3 测定步骤

1.3.1 标准溶液的配制

分别称取苯噻酰草胺、苄嘧磺隆、硝磺草酮标准品0.1g（精确至0.0002g）各加入100mL容量瓶中，量取95mL乙腈加入容量瓶，将容量瓶于超声波容器中超声至完全溶解，待恢复至25℃，定容至刻度，摇匀，即得苯噻酰草胺标液a、苄嘧磺隆标液b、硝磺草酮标液c。将标液a分别稀释为50、100、200、300、400mg·L-1，将标液 b 分别稀释为 10、20、30、40、50mg·L-1，将标液 c 分别稀释为 10、20、30、40、50mg·L-1。用移液管分别移取14mL标液a、1mL标液b、1mL标液c 至50mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，摇匀，即得苯噻酰草胺·苄嘧磺隆·硝磺草酮混合标准溶液，备用。

1.3.2 试样溶液的配制

精确称取样品 0.12g（精确至 0.0002g）加入50mL 容量瓶中，量取45mL乙腈加入容量瓶，将容量瓶于超声波容器中超声至完全溶解，待恢复至25℃，定容至刻度，摇匀。用移液管移取上述溶液14mL至50mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，摇匀，即得苯·苄·硝草酮可湿性粉剂溶液试样，再经0.45μm 孔径滤膜过滤，备用。

1.3.3 样品测定

在上述色谱条件下，待基线稳定后，先注入数针标样溶液，计算各针相对响应值，直至相邻的2针峰面积比值变化小于1.5%时，按标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。标样和样品的色谱图分别见图1、2。

图1 苯噻酰草胺、苄嘧磺隆和硝磺草酮混合标准溶液的液相色谱图

1.3.4 计算

将测得的2针试样溶液及试样前后2针标样溶液中苯噻酰草胺、苄嘧磺隆或硝磺草酮的峰面积进行平均。以质量分数表示的苯噻酰草胺、苄嘧磺隆或硝磺草酮的含量X（%）按下式计算：

式中：A1为标样溶液中苯噻酰草胺（苄嘧磺隆或硝磺草酮）峰面积平均值；A2为试样溶液中苯噻酰草胺（苄嘧磺隆或硝磺草酮）峰面积平均值；m1为标样的质量，g；m2为试样的质量，g；w为标样中苯噻酰草胺（苄嘧磺隆或硝磺草酮）的质量分数，%；f苯噻酰草胺=1；f苄嘧磺隆=14；f硝磺草酮=14。

2 结果与讨论

2.1 检测波长的选择

对苯噻酰草胺、苄嘧磺隆和硝磺草酮标样溶液分别进行紫外全波长扫描，得到其相应的吸收波长与响应值的紫外吸收光谱图。苯噻酰草胺的最大吸收波长在220nm左右，苄嘧磺隆的最大吸收波长在238nm左右，硝磺草酮的最大吸收波长在270nm左右。当选用230nm时，苯噻酰草胺、苄嘧磺隆和硝磺草酮均有较强吸收峰，流动相无吸收，因此最终选择 230nm作为检测波长。

2.2 流动相的选择

通过分析一系列不同流动相的试验结果后，得到流动相为乙腈-水（体积比50∶50，pH=3），流速在1mL·min-1的条件下，有效成分与杂质能较好地分离，峰形对称，保留时间适当。

2.3 线性相关性试验结果

在上述色谱条件下进样，分别测定50、100、200、300、400mg·L-1苯噻酰草胺标准溶液，10、20、30、40、50mg·L-1苄嘧磺隆标准溶液和 10、20、30、40、50mg·L-1硝磺草酮标准溶液，以质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，苯噻酰草胺、苄嘧磺隆和硝磺草酮均有很好的线性关系。拟合的线性回归方程分别为：

2.4 准确度的测定

在已知含量的48%苯·苄·硝草酮可湿性粉剂样品中，分别加入一定量的苯噻酰草胺、苄嘧磺隆和硝磺草酮标样，在上述色谱条件下分析其含量，计算得到的平均回收率分别为98.72%、99.95%和99.52%（表1），回收率较高，表明测量结果与被测量值真值之间的一致程度高，准确度较高。

2.5 精密度的测定

为了测定分析方法的精密度，将样品在上述色谱条件下平行测定5次。经统计，苯噻酰草胺、苄嘧磺隆和硝磺草酮的含量平均值分别为41.89%、2.95%和2.99%，标准偏差分别为0.192、0.060和0.036，变异系数分别为0.458%、2.013%和1.204%（表2）。表明方法的精密度良好，多次重复测定同一量时，各测定值之间彼此相符合的程度较高，随机误差较小。

表1 回收率测定结果

表2 精密度测定结果

3 结论

采用高效液相色谱法，使用ODS-C18柱和可变波长紫外检测器，以乙腈-水（体积比50∶50，pH=3）为流动相，同柱定量分析48%苯·苄·硝草酮可湿性粉剂中的3种有效成分，准确度和精密度较高，线性关系好，具有简单快速、准确及分离效果好等优点，可用于苯噻酰草胺、苄嘧磺隆和硝磺草酮复配产品的质量检测和控制。

[1] 屈双婷，金晨钟，李四军，等.三元复配除草剂对稗草和鳢肠的室内药效研究[J].湖南农业科学，2009(11)：73-74.

[2] 虞轶俊，施德.农药应用大全[M].北京：中国农业出版社，2008：265-266.

[3] 王清竹. 50%苯噻酰草胺·吡嘧磺隆可湿性粉剂高效液相色谱法分析[J].化学工程师，2012(10)：31-32.

[4] 褚明杰.高效液相色谱法测定除草剂苄嘧磺隆含量研究[J].安徽农业科学，2011，39(32)：20301-20302.

[5] 罗璇，杨菁，李秀平. 5%硝磺草酮-50%莠去津悬浮剂高效液相色谱分析[J].现代农业科技，2013(23)：141.

Analysis of Mefenacet·Bensulfuron-methyl·Mesotrione 48% WP by HPLC

YI Fenyuan1, YANG Shulan1, LUO Jiaqi2, MA Jiuqing1, LIANG Tangmin1, LI Lue1, WANG Chao1
(1.Guangxi Research Institute of Chemical industry, Nanning 530001, China；2.College of Science, China Agriculture University,Beijing 100000, China)

HPLC analysis method for the mefenacet·bensulfuron-methyl·mesotrione 48% WP was established. Quantitative analysis of active ingredient was conducted using a ODS-C18column, a variable wavelength UV detector at UV 230 nm, CH3CN :H2O=50:50(by vol, pH=3) as the mobile phase with the fl ow rate of 1.0 mL/min, and an external standard. Results showed that the linear correlations of mefenacet, bensulfuron-methyl and mesotrione were 0.9988, 0.9981, 0.9991 respectively, standard deviations were 0.192, 0.060, 0.036, coeff i cients of variation were 0.458%, 2.013%, 1.204%, and average recovery ratios were 98.72%, 99.95%,99.52%. This method was simple with high accuracy and good repeatability.

mefenace; bensulfuron-methyl; mesotrione; HPLC; quantitative analysis

TQ 457；O 657.7+2

A

1671-9905(2017)10-0045-03

广西科学研究与技术开发计划项目（桂科AB16380125；桂科AA16380006）

易芬远（1988-），女，广西合浦人，硕士，工程师，E-mail：1150756003@qq.com。

柯敏（1977-），女，广东廉江人，高级工程师，主要从事农药产品的开发研究，E-mail：Velaney.k@163.com

2017-07-17