新生犊牛口蹄疫免疫效果观察及免疫程序建立

仇普斌，周娟，郝东升，白娜仁吐雅，李敏，潘振亮

（1.嘉立荷畜牧有限公司，天津 300402；2.天津市畜牧兽医研究所，天津 300381）

★奶牛保健

新生犊牛口蹄疫免疫效果观察及免疫程序建立

仇普斌1，周娟1，郝东升1，白娜仁吐雅1，李敏1，潘振亮2

（1.嘉立荷畜牧有限公司，天津 300402；2.天津市畜牧兽医研究所，天津 300381）

本试验观察研究了新生犊牛免疫不同口蹄疫三价疫苗后的抗体变化规律，试验结果表明，经过两次免疫的新生犊牛口蹄疫O型和亚洲Ⅰ型的抗体效价和保护率相对较高，A型抗体效价和保护率较低，在满6月龄时需要进行第三次免疫。本试验为新生犊牛口蹄疫疫苗免疫程序的建立提供依据。

犊牛；口蹄疫；免疫；疫苗

口蹄疫（foot and mouth disease，FMD）是以牛、猪和绵羊等偶蹄的家畜及野生动物为主要感染对象的高度接触性病毒传染病，因其传播速度快、发病率高，并可造成巨大的经济损失而在世界范围内引起高度重视[1,2]。世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类烈性动物传染病，我国将其列为一类动物传染病[3]。口蹄疫病毒共有7个血清型，型间没有交叉免疫反应[4]，极易变异，在我国流行的口蹄疫毒株仅有O型、亚洲Ⅰ型、A型。

目前，扑杀是欧、美、日、韩等发达国家防控口蹄疫的唯一方法。我国采取免疫预防加扑杀相结合的防制措施。在疫苗质量可靠的基础上，加强疫苗免疫效果监测工作，合理制定免疫程序，能够更好地提升疫苗的免疫效果，有效预防和控制口蹄疫，减少养殖业损失。对新生犊牛仅进行口蹄疫疫苗首次免疫不能防止口蹄疫病毒感染，业界已有共识，首次免疫一月后再次进行加强免疫这一免疫程序也得到了奶牛养殖行业的认可，但有效抗体水平能维持多久的研究报道较少。本试验选择健康犊牛，不同来源口蹄疫免疫疫苗后，对口蹄疫免疫抗体效价消长规律进行了观察研究，旨在为犊牛口蹄疫免疫程序的制定提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物

随机挑选嘉立荷示范奶牛场新生健康犊牛95头，60日龄断奶，自由采食饮水，与非试验牛群混合饲养。

1.2 试验用疫苗及免疫方法

两种口蹄疫A型、O型、亚洲Ⅰ型三联苗，来自国内不同生物制品公司，命名为疫苗A和疫苗B，二者均在有效期内，首次免疫和加强免疫均采用1mL臀部注射，加强免疫于首次免疫后30d进行。

1.3 试验动物分组

95头健康犊牛分为两批进行重复试验。49头注射疫苗A，称为A组；其余46头注射疫苗B，称为B组。

1.4 样品采集

首次免疫前对95头犊牛进行尾静脉采血并分离血清，检测口蹄疫A型、O型和亚洲Ⅰ型抗体效价。分别于首次免疫后30d及加强免疫后30d、60d、90d检测口蹄疫A型、O型和亚洲Ⅰ型抗体效价。

1.5 检测方法

采用兰州兽医研究所生产的液相阻断ELISA试验试剂盒检测口蹄疫A型、O型、亚洲Ⅰ型抗体效价，抗体效价≥1:128为免疫合格[5,6]。

2 结果与分析

2.1 犊牛免疫后保护率变化规律及不同疫苗差异比较

从表1、图1可以看出，90日龄新生犊牛如果没有进行口蹄疫疫苗免疫，A型、O型和亚洲Ⅰ型三个血清型的抗体效价水平都很低，A和B两组能达到抵抗感染（≥1:128）的比例均低于10%，其中A组A型和亚洲Ⅰ型的比例均为0，两组共同表现为O型≥1:128的比例较高，说明口蹄疫O型的母源抗体更高。

首次免疫后30d，A组口蹄疫A型、O型和亚洲Ⅰ型三个血清型的抗体效价合格率分别为16.03%、33.82%、31.90%，B组为0、11.19%、40.42%。试验结果证明，新生犊牛首次免疫的抗体效价合格率很难达到90%以上，所以加强免疫是必不可少的环节。

加强免疫后30d，A组口蹄疫A型、O型和亚洲Ⅰ型三个血清型的抗体效价合格率分别为82.98%、93.57%、85.33%，B组为49.88%、95.46%、94.74%。试验结果证明，加强免疫后，抗体效价合格率大幅增加，接近或超过了90%，但B组的A型抗体效价合格率与A组有较大差异，因此，疫苗的选择对于免疫效果至关重要。

加强免疫后60d，A组的抗体效价合格率与加强免疫后30d相比无变化，B组则下降显著，进一步证明疫苗A的稳定性要优于疫苗B。加强免疫后90d，A、B两组的口蹄疫A型、亚洲Ⅰ型抗体效价合格率显著下降，尤其在A型，两组均下降到50%以下。相反，两组O型抗体效价并无显著下降。

表1 新生犊牛免疫后抗体效价合格（≥1:128）比例 单位：%

图1 新生犊牛免疫前后保护率变化趋势图

2.2 犊牛免疫后抗体效价变化规律

疫苗免疫后，牛群平均抗体效价水平也能很好体现免疫效果好坏。图2显示，补免90d后口蹄疫O型平均抗体效价最高，A、B两组分别为353和328；亚洲Ⅰ型次之，分别为155和222；A型最低，仅为100和69。

图2 新生犊牛免疫前后保护率变化趋势图

3 讨论

新生犊牛首次免疫口蹄疫疫苗的日龄尚存争议，研究认为，牛接种口蹄疫疫苗的免疫应答能力随着牛年龄的增大而增强，而其他研究人员通过试验证明6月龄初次接种口蹄疫疫苗的无母源抗体犊牛的免疫应答能力，与初次接种口蹄疫疫苗的18月龄的成年牛一样，甚至还优于成年牛[7]。两个试验结果虽然大相径庭，但前提条件都是试验动物为无母源抗体干扰的犊牛，说明母源抗体的干扰远远超过犊牛年龄的应答能力。徐春志等[8]通过试验证明，新生犊牛的母源抗体水平远低于饲喂初乳后的抗体水平，该试验饲喂初乳犊牛在7日龄时母源抗体达到高峰，至60日龄维持在较高水平，此后口蹄疫抗体迅速降低，至90日龄回落近临界值。这是由于规模化奶牛场通常在60日龄停吃母乳，所以断乳后母源抗体迅速下降，说明母乳是犊牛获得高质量母源抗体的主要途径。

首次免疫后抗体效价有所提高但保护率和整体效价水平依然较低，经过加强免疫后迅速上升，这是由于首次免疫后所产生的抗体以IgM为主，在体内维持时间较IgG短。加强免疫后60d内，试验A组的保护率和牛群的平均效价均无显著下降，这一结果与贾泽颖等[9]的研究结论一致。

本试验结果显示，口蹄疫三联苗的A型免疫效果不佳，在首次免疫30d时，A型的保护率和效价水平都与O型、亚洲Ⅰ型有很大差距，补免后虽然能达到有效水平，但保护率和效价下降迅速。据付程雄等[10]报道，免疫工作较好的试验场，犊牛的A型口蹄疫初免的免疫抗体水平非常低，即使补免也未达到有效保护率。因此，提高新生犊牛口蹄疫免疫效果尤为重要，若免疫效果不佳，需及时修改免疫程序，在犊牛出生后6月龄进行第二次加强免疫。

[1]董献策. 奶牛口蹄疫流行特点及有效防控措施[J]. 北方牧业,2012,14:23.

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[4]刘耀方,何孔旺,张德坤,等. 利用多重 RT－PCR 对口蹄疫病毒分型[J]. 江苏农业科学,2007,5:136-139．

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[7]李华春.牛年龄对口蹄疫免疫应答的影响[J].云南畜牧兽医,1986,3:43.

[8]徐春志,蔺俐仲,方英,等.奶牛口蹄疫母源抗体测定及三价灭活疫苗免疫效果评价[J].贵州畜牧兽医,2015,39(2):1-3.

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[10]付程雄,李阳,赵海楠. 北京市密云地区奶牛A型口蹄疫免疫抗体分析[J]. 北京农业,2011,S1:23-25.

Observation of Immune Effect and Immune Program Established on Newborn Calves

QIU Pu-bin1, ZHOU Juan1, HAO Dong-sheng1, Bainarentuya1, LI Min1, PAN Zhen-liang2
(1.Tianjin Jialihe Livestock Co., Ltd., Tianjin 300402; 2.Tianjin Animal Science and Veterinary Research Institute,Tianjin 300381)

To establish FMD immune program about newborn calves, this study monitored the antibody level which was vaccinated results. Experiment results showed that antibody level and protection rate was high in O and Asia1,which was vaccinated twice, but antibody level and protection rate of A was lower than O and Asia1. The third vaccine was indispensable for the new immune program about newborn calves.

Newborn calves; Foot and mouth disease; Immune; Vaccine

S858.23

A

1004-4264（2017）10-0024-03

10.19305/j.cnki.11-3009/s.2017.10.006

2017-01-19

优质后备奶牛培育关键营养及管理技术转化与示范（15YFXQN00020）。

仇普斌，男，硕士，主要从事奶牛养殖工作。

潘振亮，男，硕士，长期从事奶牛营养、标准化养殖等方面研究工作。