环境温度对急性心肌梗死患者血小板活化的影响

冯天保 李臻 袁百祥 刘宏颖 王宇 高峰

064200 华北理工大学附属遵化市人民医院心内科

·临床研究·

环境温度对急性心肌梗死患者血小板活化的影响

冯天保 李臻 袁百祥 刘宏颖 王宇 高峰

064200 华北理工大学附属遵化市人民医院心内科

目的探讨不同环境温度对急性心肌梗死(AMI)患者血小板活化的影响。方法自2013年1月至2016年1月在华北理工大学附属遵化市人民医院心内科住院的AMI患者，按入院时气温分为两组：在本地最热月份(7月，平均气温25.2 ℃)入选的40例AMI患者为高温组，在本地最冷月份(12月，平均气温-3.2 ℃)入选的40例AMI患者为低温组。应用流式细胞仪分别测定CD62p、GPⅡb/Ⅲa受体复合物表达水平，并计算表达率(%)。结果与低温组相比，高温组AMI患者的CD62p(9.8%±1.4% 比 14.5%±6.2%)和GPⅡb/Ⅲa受体复合物表达率(15.3%±2.5% 比 57.6%±6.8%)差异有统计学意义(均为P<0.05)。在ST段抬高型心肌梗死和非ST段抬高型心肌梗死亚组分析中，高、低温组的CD62p和GPⅡb/Ⅲa受体复合物表达率的差异亦有统计学意义(均为P<0.05)。结论环境温度对AMI患者血小板活化有明显影响，低温明显高于高温。因此，应注意环境温度变化，必要时可调整AMI患者抗血小板药物的剂量。

温度； 急性心肌梗死； CD62p； GPⅡb/Ⅲa受体复合物； 血小板活化

【Keywords】 Temperature； Acute myocardial infarction； CD62p； GPⅡb/Ⅲa receptor complex； Platelet activation

Fundprogram：Research Project of Hebei Provincial Health and Family Planning Commission (20151032)

急性心肌梗死(actute myocardila infarction，AMI)是病残率和死亡率极高的心血管危重症，是以冠状动脉粥样硬化斑块破裂，继发急性血栓形成为病理基础的一组临床综合征，而血小板激活在AMI发病进程中起到至关重要的作用[1]。患者血小板功能出现异常改变，会在一定程度上增加其活性，对AMI患者的病情进展造成严重的影响[2]。在冠状动脉疾病患者体内发现血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa含量升高[3]。此外，在血栓风险级数研究中观察到，血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa表达出从临床稳定到不稳定疾病状态的趋势是增强的[4]。上述发现证实了血小板在动摇斑块方面起关键作用。国内已有多项关于发病季节、气候、气温与AMI关系的研究[5-6]。本研究主要观察不同环境温度对AMI患者血小板活化的影响，为AMI患者根据不同温度调整抗血小板药物剂量提供理论依据。

1 对象和方法

1.1 研究对象

选择2013年1月至2016年1月华北理工大学附属遵化市人民医院心内科住院的AMI患者，在本地最热月份(以本地气象部门公布数据为准)7月(平均气温25.2 ℃)入院的40例AMI患者为高温组，其中ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者18例，非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)患者22例，年龄27～75岁，平均(59.5±16.2)岁，男24例，女16例。在本地最冷月份(以本地气象部门公布数据为准)12月(平均气温-3.2 ℃)入院的40例AMI患者为低温组，其中STEMI患者16例，NSTEMI患者24例，年龄35～75岁，平均(60.5±15.4)岁，男25例，女15例。入选标准：年龄≤75岁，根据临床表现、心电图、心肌损伤标志物明确诊断为AMI，且在入院前未服用任何抗血小板及抗凝药物。排除标准：年龄>75岁，妊娠期女性，具有抗凝禁忌证，合并严重血液系统疾病、感染性疾病如严重肺部感染、胆系感染、泌尿系感染等，以及严重肝肾功能不全、恶性肿瘤者。所有患者均签署知情同意书。

1.2 采血方法

空腹平静状态下、在室温(18～25 ℃)环境中进行采血。采用BD公司生产的真空采血管，抽取静脉血2～3 ml，EDTA-K2抗凝，尽量与采血管规定量一致，采血后立即轻柔颠倒采血管2～3次，使抗凝剂充分混匀。采集后的血样禁止震荡、剧烈混匀。10 min内常温(18～25 ℃)转运至实验室进行检测。

1.3 检测试剂

(1)单克隆抗体，CD62p为藻红蛋白标记的抗P选择素的McAb；CD61PerCP为PeridininchlorophyⅡ Protein标记的血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa的McAb(均购自美国BD公司)；(2)同型对照，Mouseγ1 PE为藻红蛋白标记的鼠IgG(购自美国BD公司)。

1.4 血小板活化标志物测定

采用美国BD公司流式细胞仪检测血小板活化指标CD62p和GPⅡb/Ⅲa受体复合物的表达水平，并计算阳性表达率。CD62p、GPⅡb/Ⅲa受体复合物阳性血小板百分率(%)=测定管CD62p、GPⅡb/Ⅲa受体复合物阳性血小板(%)-对照管CD62p、GPⅡb/Ⅲa受体复合物阳性血小板(%)。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 基线资料

两组AMI患者基线资料比较，差异均无统计学意义(均为P>0.05)，见表1。

2.2 血小板活化指标

低温组AMI患者CD62p和GPⅡb/Ⅲa受体复合物表达率明显高于高温组，差异有统计学意义(均为P<0.05)，见表2。此外，STEMI患者中低温组CD62p和GPⅡb/Ⅲa受体复合物表达率亦明显高于高温组，差异有统计学意义(P<0.05)；NSTEMI患者中低温组CD62p和GPⅡb/Ⅲa受体复合物表达率亦显著升高，差异有统计学意义(均为P<0.05)，见表3。

表1 两组患者基线临床资料比较

注：LDL-C：低密度脂蛋白胆固醇；CK-MB：磷酸肌酸激酶-心肌型；LVEF：左心室射血分数

表2 不同环境温度AMI患者血小板活化指标的比较(%)

注：PAC-1：GPⅡb/Ⅲa复合物

表3 不同环境温度STEMI 和NSTEMI患者的血小板活化指标比较

注：PAC-1：GPⅡb/Ⅲa复合物

3 讨论

冠心病的发病与多种因素有关，目前认为其发生和发展与血小板活化有密切关系[7]。在AMI时，不稳定的动脉粥样硬化斑块破裂使其内容物暴露于血液，促进血小板激活和聚集，凝血酶生成，最后形成血栓，导致冠状动脉管腔严重狭窄甚至闭塞[8]。因此，血小板活化是AMI发生发展的重要步骤。近来研究认为，CD62P和GPⅡb/Ⅲa受体是目前最具有特征性的血小板活化分子标记物。在血栓性疾病时血小板膜上的P选择素水平明显增高，故监测血小板膜上的P选择素可以了解血小板活化程度，CD62P是血小板激活的重要分子标志物，是血小板活化最具有特异性的标志物[9]。无论何种激活剂激活血小板，最终共同通道是激活血小板糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体，从而形成活化血小板聚集而形成大量富含血小板的血栓，因此血小板糖蛋白GPⅡb/Ⅲa的表达可直接反映血小板的活化状态[10]。故本研究选择测定CD62p、GPⅡb/Ⅲa受体复合物作为血小板活化的指标。血小板活化受很多因素影响，如高血脂、高血压、吸烟、药物、情绪等[9-10]，体内许多细胞因子、炎症因子等也可引起血小板活化，血小板活化因子是迄今为止体内最强的血小板活化刺激因子[11]。本研究主要观察了环境温度对AMI患者血小板活化的影响。研究结果提示，低温组与高温组的CD62p、GPⅡb/Ⅲa受体复合物表达水平差异均有统计学意义，表明环境温度对AMI患者血小板活化指标有显著影响，不同环境温度下STEMI和NSTEMI患者的血小板活化指标比较，差异亦有统计学意义，表明AMI患者粥样斑块不稳定，血小板活化程度明显增高，提示血小板活化参与ACS的病理过程。

外界环境温度与血小板活化之间的关系尚未完全阐明。有研究指出环境温度降低可引起机体交感神经兴奋，血浆儿茶酚胺浓度升高，促使脾脏中聚集的血小板释放入血，从而增加血小板计数，而血小板增加可促进凝血因子与其他止血因子结合，目前已知冬季血清中纤维蛋白原、组织型纤溶酶原激活剂和VW因子浓度明显增高[12-14]。试验证明，儿茶酚胺不仅增加血小板数量，还诱导血小板聚集，增强由低浓度诱聚剂(ADP和凝血酶等)诱导的血小板聚集，同时抑制ATC系统(抗血小板聚集药)，增大GPⅡb/Ⅲa的纤维蛋白原结合区[15]。以上可部分解释AMI在冬天寒冷季节多发，另一方面应根据不同环境温度条件，相应调整AMI患者抗血小板药物剂量，以提高疗效，减少出血并发症。

利益冲突：无

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Effectofenvironmenttemperatureonplateletactivationinpatientswithacutemyocardialinfarction

FengTianbao，LiZhen，YuanBaixiang，LiuHongying，WangYu，GaoFeng

DepartmentofCardiology，People′sHospitalofZunhua，AffiliatedtoNorthChinaUniversityofScienceandTechnology，Zunhua064200，China

LiZhen，Email：lizhenshandong68@163.com

ObjectiveTo explore the effect of environment temperature on platelet activation in patients with acute myocardial infarction (AMI).MethodsEighty patients with AMI hospitalized in the department of cardiology，People′s Hospital of Zunhua，Affiliated to North China University of Science and Technology from January 2013 to January 2016 were divided into high temperature group (40 cases hospitalized in July which was local the hottest month with the average temperature of 25.2 ℃) and low temperature group (40 cases hospitalized in December which was local the coldest month with the average temperature of -3.2 ℃).The expression of CD62p and GPⅡb/Ⅲa receptor complex were detected by flow cytometer，and then the expression rate were calculated.ResultsThe expression rates of CD62p (9.8%±1.4%vs.14.5%±6.2%)，GPⅡb/Ⅲa receptor complex[(15.3%±2.5%)vs.(57.6%±6.8%)]in high temperature group were significantly lower than those in low temperature group (bothP<0.05).Meanwhile，high temperature group was also associated with markedly lower expression rates of CD62p and GPⅡb/Ⅲa receptor complex in the subgroups of patients with ST elevated AMI and Non-ST elevated AMI (bothP<0.05).ConclusionsThe effect of low temperature on platelet activation is significantly higher than that in patients with AMI.Therefore，Dosage of anti-platelet drug should be adjusted according to the change of environment temperature.

李臻，电子信箱：lizhenshandong68@163.com

10.3969/j.issn.1007-5410.2017.05.007

河北省卫计委科研课题(20151032)

2017-08-08)

(本文编辑：谭潇)