大球盖菇菌种及培养基的筛选

程远

(五常市宝龙店种子林场，黑龙江 哈尔滨 150200)

大球盖菇菌种及培养基的筛选

程远

(五常市宝龙店种子林场，黑龙江 哈尔滨 150200)

通过实验室现有的5种大球盖菇(Strophariarugoso-annulata)菌种在PDA培养基上的生长速度及生长势的比较分析试验，结果表明：3号菌种(培养基配方为：马铃薯200 g，蔗糖20 g，琼脂20 g，水1 000 mL，蛋白胨3 g，酵母膏2 g，KH2PO43 g，MgSO42 g)生长速度最快，且菌丝浓白、粗壮，所以3号菌种为实验室现有最优菌株。进一步比较最优菌株的菌落形态、菌丝的颜色和密度以及菌丝长势，得出最优培养基配方为：马铃薯200 g·L-1，蔗糖20 g·L-1，蛋白胨2 g·L-1，酵母膏1 g·L-1，玉米粉10 g·L-1，维生素B 1片·L-1，稻草15 g·L-1。

大球盖菇；菌种；培养基

AbstractThe growth rate & growth potential of five kinds ofStrophariarugoso-annulatastrains on the PDA medium were analyzed.Result shows that the growth rate of No. 3 strain(the medium is : potato 200 g, sucrose 20 g, agar 20 g, water 1 000 mL, peptone 3 g, yeast extract 2 g, KH2PO43 g, MgSO42 g is fastest, and hyphae are thick,white and stout, so No. 3 strain for the laboratory is the optimum.The colony morphology, mycelial color and density, and mycelial growth were compared.The optimum culture medium is as follows: potato 200 g ·L-1, sucrose 20 g ·L-1, peptone 2 g ·L-1, yeast extract 1 g·L-1, corn flour 10 g·L-1, vitamin B1 tablets·L-1, straw 15 g ·L-1.

KeywordsStrophariarugoso-annulata; strain;culture medium

大球盖菇(Strophariarugoso-annulata)，又名皱环盖菇，隶属于担子菌门(Basidomycota)，层菌纲(Hymenomycetes) ,伞菌目(Agaricales)，球盖菇科(Strophariaceae)，球盖菇属(Stropharia)[1]，是国际菇类交易市场上的十大菇类之一，也是联合国粮农组织向发展中国家推荐栽培的食用菌之一[2,3]。在我国，野生大球盖菇多产于云南、四川、西藏、吉林等地。

单个的大球盖菇菇团可达数公斤重，具有近半球形的菌盖，湿润时表面微黏。初期子实体呈白色，随着子实体逐渐长大其颜色会逐渐加深至灰褐色，菌肉白且肥厚，圆柱形菌柄长5～20 cm，柄粗0.5～4 cm[4,5]。大球盖菇可生于林中、草地、路旁、园地、垃圾场或牧场的牛马粪堆上等处。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验所用大球盖菇菌种。

1.2 试验方法

1.2.1 菌种筛选 采用常规方法制备PDA培养基1 000 mL，分装制成PDA平面培养基，接入直径为3 mm且菌龄一致的5种菌种，每个菌种接种3个平板。

1.2.2 母种培养基筛选 将筛选出的大球盖菇优质菌株接种到不同配方制备的培养基中，进行25 ℃黑暗恒温培养。在培养过程中定时对大球盖菇菌丝的生长密度、菌丝色泽、菌丝生长势等生长状况进行观察评估，通过菌丝的生长指标筛选出最佳配方。

根据查阅大量文献以及实验室原有的实验成果，拟定如下5个母种培养基配方，并按照如下配方使用常规培养基配制方法配制培养基，经高温高压湿热灭菌(121 ℃，20 min)后制成斜面或平板培养基。培养基配方如下：

(1)PSA培养基：马铃薯200 g，蔗糖20 g，琼脂20 g，水1 000 mL。

(2)PSA培养基：马铃薯200 g，蔗糖20 g，琼脂20 g，水1 000 mL，蛋白胨3 g，酵母膏2 g。

(3)马铃薯200 g，蔗糖20 g，琼脂20 g，水1 000 mL，蛋白胨3 g，酵母膏2 g，KH2PO43 g，MgSO42 g。

(4)马铃薯200 g，蔗糖20 g，琼脂20 g，水1 000 mL，蛋白胨3 g，酵母膏2 g，KH2PO43 g，MgSO42 g，玉米粉10 g。

(5)马铃薯200 g，蔗糖20 g，蛋白胨2 g，酵母膏1 g，玉米粉10 g，维生素B 1片，稻草15 g，水1 000 mL。

1.2.3 不同培养基上生长情况测试 利用孔径为3mm的打孔器在培养皿内旺盛生长的供试菌种的同一半径上打孔，将菌丝块随机地转接到培养皿和试管斜面，恒温培养(25 ℃)，每两天定时测量菌落中心垂直的一组直径，并求得其平均值作为菌落直径。同时每天定时观察记录菌丝的密度、菌丝粗壮程度、菌丝色泽以及菌丝生长势等菌丝生长指标。

2 结果与分析

2.1 菌种筛选

表1不同菌种在PDA培养基中生长速度及菌丝生长势的比较

菌种编号菌落生长速度/mm·d-1重复1重复2重复3平均生长速度/mm·d-1菌丝长势评价13．513．533．483．47++23．563．583．533．56++33．673．63．73．67+++43．513．553．53．52++53．473．493．453．47+++

表2 不同菌种在PDA培养基中生长速度方差分析

由表1中对菌丝生长势的评价可知，在PDA培养基上生长势最好的3号菌种和5号菌种。同时，由表2方差分析结果得出，1号菌种与5号菌种之间sig.=0.986，差异不显著；而4号菌种与2号菌种之间sig.=0.55，差异亦不明显；但3号菌种与其他各组之间都存在显著差异。由此可知，在生长速度上，各组菌种存在差异，其中3号菌种菌丝生长速度最快。结合以上两点得出，根据在PDA培养基上菌丝生长速度及长势的评价可以筛选出最优菌种为3号菌种。

2.2 培养基的筛选

如表3，④、⑤号菌丝生命力明显强于其他组，菌丝雪白，能形成密度大且边缘整齐的菌落；②、③菌落边缘不整齐，此外密度和色泽也略差；①号菌丝细弱，颜色灰白，且随着培养时间延长菌丝会形成索状菌丝。大球盖菇菌丝在以上5种培养基中的生长情况为(表4)，⑤号生长速度最快，达到6.82 mm·d-1，高于④号的6.57 mm·d-1，并明显高于其他3组，5组间差异显著。

表3 不同培养基所培养的菌丝生长情况

表4 大球盖菇菌丝在5种培养基上的菌丝生长速度

培养基筛选试验表明：添加稻草玉米粉能明显促进大球盖菇的生长，能够明显提高菌丝长速、长势。

3 结论

本文通过对实验室现有的大球盖菇菌种及母种培养基筛选实验，得出以下结果：

(1)本试验通过实验室现有的5种大球盖菇菌种在PDA培养基上的生长速度及生长势的比较分析得出：3号菌种生长速度最快，相比1号、2号、4号、5号菌种分别提高了5.44%、3.00%、4.09%、5.45%，且菌丝浓白、粗壮，所以3号菌种为实验室现有最优菌株。

(2)通过对筛选出的最优菌株在常见的5种培养基中生长速度及菌丝在培养基中菌落边缘整齐度、菌丝密度、菌丝生长势、菌丝色泽的比较得出，大球盖菇最适母种培养基配方为：马铃薯200 g·L-1，蔗糖20 g·L-1，蛋白胨2 g·L-1，酵母膏1 g·L-1，玉米粉10 g·L-1，维生素B 1片·L-1，稻草15 g·L-1。

[1] Hawksworth D L,Kirk P M, Sutton B C, et al. Ainsworth and Bisby's Dictionary of the fungi Ⅷ[M].London:CABI, 1995

[2] 王新娜,李红超,杨勇岐.利用农作物秸秆种植大球盖菇新技术[J].陕西农业科学，2005 (5):134-135

[3] 黄年来.大球盖菇的分类地位和特征特性[J].食用菌, 1995(6):11

[4] 黄年来.美国波兰大球盖菇的栽培技术[J].食用菌,1996(1):27

[5] 萨仁图雅,图力古尔.大球盖菇研究进展[J].食用菌学报,2005,12(4):57-64

StrainandCultureMediumofScreeningofStrophariarugoso-annulata

Cheng Yuan

(Wuchang City Baolong shop seed forest, Heilongjiang Haidian 150200)

Q949.329.81

A

10.13601/j.issn.1005-5215.2017.09.018

1005-5215(2017)09-0057-02

2017-05-25

程远(1982-)，男，黑龙江巴彦人，大学，工程师，从事小浆果及食用菌等培养研究.