饲粮维生素A添加水平对7～12月龄梅花鹿生长性能、血清生化指标及初角茸生长的影响

张 婷 王晓旭 王 卓 李仁德 孙伟丽 鲍 坤 钟 伟 李光玉

(中国农业科学院特产研究所，吉林省特种经济动物分子生物学省部共建实验室，长春130112)

饲粮维生素A添加水平对7～12月龄梅花鹿生长性能、血清生化指标及初角茸生长的影响

张 婷 王晓旭 王 卓 李仁德 孙伟丽 鲍 坤 钟 伟 李光玉*

(中国农业科学院特产研究所，吉林省特种经济动物分子生物学省部共建实验室，长春130112)

本试验旨在研究饲粮维生素A添加水平对7～12月龄梅花鹿生长性能、血清生化指标及初角茸生长的影响。选取40只7月龄平均体重为(39.64±4.10) kg的健康雄性梅花鹿，随机分成4组，每组10个重复，每个重复1只，分别饲喂在基础饲粮(含5 mg/kg β-胡萝卜素)中添加0(对照组)、2 500、5 000 和10 000 IU/kg维生素A的试验饲粮。试验期从7月龄开始至12月龄结束。结果表明：1)饲粮维生素A添加水平对梅花鹿生长性能无显著性影响(P>0.05)。2)与对照组相比，饲粮添加2 500、5 000 IU/kg维生素A显著提高梅花鹿血清免疫球蛋白A(IgA)含量、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性(P<0.05)，饲粮添加2 500、5 000、10 000 IU/kg维生素A显著提高谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性(P<0.05)，饲粮维生素A添加水平对血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、丙二醛(MDA)、睾酮(T)及雌二醇(E2)含量无显著性影响(P>0.05)。3)5 000 IU/kg维生素A添加组初角茸干茸重显著高于对照组(P<0.05)，但与其他2组差异不显著(P>0.05)。由此得出，在本试验条件下，适量添加维生素A能够增强7～12月龄梅花鹿免疫和抗氧化功能，提高初角茸干茸重。7～12月龄梅花鹿饲喂以玉米和苜蓿草粉为主的饲粮时，饲粮维生素A适宜添加水平为2 500～5 000 IU/kg。

梅花鹿；维生素A；生长性能；血清生化指标；初角茸

维生素A是含有β-白芷酮环的不饱和一元醇，是人和动物所必需的脂溶性维生素。维生素A参与许多机体生理过程包括细胞代谢、组织分化、繁殖、免疫和骨骼发育等[1-3]。在反刍动物营养上，Eldaim等[4]发现饲粮中添加维生素A有利于提高羔羊日增重。Kleczkowski等[5]研究表明维生素A添加有利于提高肉牛机体抗氧化水平。Lu等[6]报道维生素A有利于提高奶牛机体免疫水平。而维生素A在鹿科动物上的研究报道较少，且主要集中在维生素A代谢产物视黄酸调控角基萌发进而影响鹿茸生长方面。Kierdorf等[7]研究发现，向白尾鹿角基注射视黄酸加快了鹿茸生长。Allen等[8]研究表明，视黄酸受体在鹿茸组织中表达，并且激活该受体促进了软骨组织细胞分化。梅花鹿是我国主要饲养的鹿种之一，具有很高的经济价值。幼龄梅花鹿生长发育快，通常体重的大小关系到繁殖性能和鹿茸产量[9]，因此在冬季缺少青绿饲料的圈养条件下，为幼鹿提供充足的维生素A将有助于提高健康水平和经济效益。本试验旨在研究不同维生素A添加水平对7～12月龄梅花鹿生长性能、免疫及抗氧化水平和初角茸生长的影响，为梅花鹿机体维生素A营养状况的评价提供科学依据，以期指导生产实践。

1 材料与方法

1.1试验设计与试验动物饲养管理

选取40只7月龄平均体重为(39.64±4.10) kg的健康雄性梅花鹿，随机分成4组，每组10个重复，每个重复1只，分别饲喂在基础饲粮(含5 mg/kg β-胡萝卜素)中添加0(对照组)、2 500、5 000 和10 000 IU/kg维生素A的试验饲粮。基础饲粮为以玉米、豆粕、苜蓿草粉、玉米胚芽、食盐、预混料等按不同比例制成的粉状全混合日粮(TMR)，其组成及营养水平见表1。饲养试验在中国农业科学院特产研究所茸鹿试验基地进行，试验期从7月龄开始至12月龄结束。试验时间为2016年1月至2016年6月。试验期间，由专人饲喂，早晚各1次，称量记录每组鹿的给料量和剩料量，以计算每只鹿的平均日采食量，并根据生长状况每周调整1次饲喂量，保证充足洁净的饮水。

1.2样品采集

试验期末于晨饲前向每头鹿注射0.6～1.3 mg/kg BW的盐酸塞拉嗪进行麻醉。称体重，颈静脉采血10 mL，放置至血清析出，4 000 r/min离心5 min，收集血清于-20 ℃保存待测。同时，由专业人员在距离角柄上方2 cm处将初角茸平行锯下，称重后放入自封袋中-20 ℃保存待测干物质含量。采样结束后，注射1.5 mL/kg BW尼可刹米解除麻醉。

1.3样品测定

饲粮粗蛋白质含量测定采用凯氏定氮法，参照GB/T 6432—1994；粗脂肪含量测定采用索氏提取仪，参照GB/T 6433—1994；粗灰分含量按照GB/T 6438—1992测定；钙含量测定采用乙二胺四乙酸(EDTA)络合滴定法，参照GB/T 6436—1992；磷含量测定采用钒钼酸铵比色法，参照GB/T 6437—1992;酸性洗涤纤维(ADF)和中性洗涤纤维(NDF)含量测定采用范氏(Van Soest)洗涤纤维分析法，参照GB/T 20806—2006;β-胡萝卜素含量参照GB/T 5009.83—2003进行测定。

采用还原型谷胱甘肽(GSH)消耗法测定血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性；黄嘌呤氧化法测定血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性；硫代巴比妥酸法测定血清丙二醛(MDA)含量，测定试剂盒均购自中生北控生物科技有限公司。血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)、睾酮(T)及雌二醇(E2)采用酶联免疫吸附测定(ELASA)法测定，试剂盒购自上海双赢生物科技有限公司。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)

1)每千克预混料含有One kilogram of premix contained the following：Mg 76 mg，Cu 36 mg，Mn 43 mg,Fe 53 mg，Zn 45 mg，Se 31 mg，VD3496.8 IU，VE 82.8 IU，VK30.23 mg，VB110.092 mg，VB20.69 mg，VB121.38 mg，叶酸 folic acid 0.023 mg，烟酸 nicotinic acid 1.62 mg，泛酸钙 calcium pantothenate 1.15 mg，CaHPO45.17 g，CaCO34.57 g。

2)实测值 Measured values。

新鲜初角茸经切片后放入真空冷冻干燥机中-40 ℃干燥48 h，干物质含量依据以下公式计算：

干物质含量(%)=(干茸重/鲜茸重)×100。

1.4数据统计

试验数据采用Excel 2003进行整理，采用SPSS 9.13软件中GLM程序进行统计分析，多重比较采用Duncan氏法进行，其中P<0.05为差异显著，P>0.05为差异不显著，结果以平均值±标准差表示。

2 结 果

2.1饲粮维生素A添加水平对7～12月龄梅花鹿生长性能的影响

由表2可知，饲粮维生素A添加水平对7～12月龄梅花鹿平均日采食量、平均日增重和料重比均无显著性影响(P>0.05)。

2.2饲粮维生素A添加水平对7～12月龄梅花鹿血清生化指标的影响

由表3可知，与对照组相比，饲粮添加2 500、5 000 IU/kg维生素A显著提高血清IgA含量和T-SOD活性(P<0.05)，饲粮添加2 500、5 000、10 000 IU/kg维生素A显著提高血清GSH-Px活性(P<0.05)。饲粮维生素A添加水平对血清IgG、IgM、MDA、T及E2含量无显著性影响(P>0.05)。

表2 饲粮维生素A添加水平对7～12月龄梅花鹿生长性能的影响

同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，相同或无小写字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with the same or no small letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

表3 饲粮维生素A添加水平对7～12月龄梅花鹿血清生化指标的影响

2.3饲粮维生素A添加水平对7～12月龄梅花鹿初角茸生长的影响

由表4可知，5 000 IU/kg维生素A添加组梅花鹿初角茸干茸重显著高于对照组(P<0.05)，但与其他2组差异不显著(P>0.05)。饲粮维生素A添加水平对初角茸干物质含量、茸高、鲜茸重无显著性影响(P>0.05)。

表4 饲粮维生素A添加水平对7～12月龄梅花鹿初角茸生长的影响

3 讨 论

3.1饲粮维生素A添加水平对7～12月龄梅花鹿生长性能的影响

作为动物机体必需的脂溶性维生素，饲粮中添加适量维生素A有利于提高反刍动物生长性能。魏立民等[10]研究表明维生素A可以显著提高海南和牛的日增重，并且以7 500 IU/kg 添加量效果最好。Eldaim等[4]报道饲粮中添加维生素A可增加羔羊的初生重和日增重。但是本试验结果发现，饲粮维生素A添加水平对7～12月龄梅花鹿生长性能无显著性影响。这与Arnett等[11]在羔羊和Gibb等[12]在肉牛上的研究结果一致。分析可能原因有：一方面，虽然对照组没有额外添加维生素A，但是基础饲粮中含有少量β-胡萝卜素，β-胡萝卜素在鹿体内转化为维生素A以补充饲粮维生素A的不足[13]。另一方面，当梅花鹿7～9月龄时正值北方冬季，寒冷的天气条件下鹿群生长慢，从而导致整个试验期各组梅花鹿之间生长性能指标差异不显著。

3.2饲粮维生素A添加水平对7～12月龄梅花鹿血清生化指标的影响

GSH-Px和T-SOD是机体内重要的抗氧化酶。GSH-Px以GSH为还原剂分解体内的脂质过氧化物，阻断活性氧自由基对机体的进一步损伤，因而可防止细胞膜和其他生物组织免受过氧化损伤。超氧化物歧化酶(SOD)的主要功能是催化超氧化阴离子自由基发生歧化反应，保护生物膜免受过氧化物引起的氧化损伤和增强机体的抗氧化能力，进而增强机体抗病能力。大量研究表明，维生素A可有效提高动物机体抗氧化能力。Lu等[6]报道奶牛饲粮添加高水平维生素A(220 IU/kg BW)显著提高血清GSH-Px和T-SOD活性。刘汝祥等[14]研究发现不同维生素A水平对荷斯坦种公牛血清GSH-Px和T-SOD活性影响显著。本试验结果表明添加维生素A可显著提高7～12月龄梅花鹿机体抗氧化水平。这主要是由于维生素A本身具有的抗氧化和清除自由基功能[15]。

维生素A与动物免疫应答有着密切的关系，它可以通过非特异性免疫反应、细胞免疫和体液免疫维持机体健康。维生素A能够促进巨噬细胞活化，增强其对特异抗原的作用，促进B淋巴细胞活性增强，增加IgA、IgG和IgM合成与分泌，从而影响免疫[16]。本试验结果表明，饲粮中添加2 500、5 000 IU/kg维生素A可提高7～12月龄梅花鹿血清IgA含量，说明饲粮添加维生素A有利于提高梅花鹿机体免疫水平，这与Soliman[17]和王平等[18]在山羊上的研究结果一致。

作为雄性梅花鹿的第二性征，鹿茸的生长与发育与性激素密切相关，其中T和E2被认为是控制鹿茸生长和骨化的主要因素[19-20]。T是一种产生于间质细胞的雄激素，能促进雄性动物的第二性征的表现、雄性生殖道及附性腺的发育，并刺激精子的发生。E2是机体内生物活性最高的雌激素，有利于促进雌性动物生殖器官的发育和发情行为的产生。在非反刍动物上，Huang等[21]试验发现维生素A添加可以显著提高小鼠体内T的基础分泌量。接永泽[22]研究表明，低温条件下提高饲料维生素A水平可以显著提高公鸭血清T含量。而在本试验中，饲粮维生素A添加水平未对7～12月龄梅花鹿血清T和E2含量产生显著性影响。

3.3饲粮维生素A添加水平对7～12月龄梅花鹿初角茸生长的影响

鹿茸是生长在雄鹿(驯鹿除外)额骨顶端未骨化密生绒毛的嫩角[23]。前人研究表明，维生素A能够促进骨骼的生长发育，维持成骨细胞及破骨细胞正常功能,保障骨细胞正常代谢[24]。鹿茸生长受到多方面因素的调控，包括激素、体重、天气、饲养密度和营养等因素[25-27]。国外有关维生素A对鹿茸生长影响的研究主要集中在其代谢产物视黄酸调控角基萌发进而影响鹿茸生长方面。Bubenik[28]研究发现，向白尾鹿角基注射全反式视黄醇提高了鹿茸生长速率。Allen等[8]研究表明视黄酸受体在鹿茸组织中表达，并且体外试验表明激活该受体促进了软骨组织细胞分化。本试验结果发现，饲粮添加维生素A对初角茸高度无显著性影响，但是与对照组相比，5 000 IU/kg维生素A的添加显著提高了干茸重,具体机制有待进一步研究。

4 结 论

在本试验条件下，适量添加维生素A能够增强梅花鹿免疫和抗氧化功能，提高初角茸干茸重。7～12月龄梅花鹿饲喂以玉米和苜蓿草粉为主的饲粮时，饲粮维生素A适宜添加水平为2 500～5 000 IU/kg。

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*Corresponding author, professor, E-mail： tcslgy@126.com

(责任编辑 王智航)

Effects of Dietary Supplemental Level of Vitamin A on Growth Performance, Serum Biochemical Indictors and First Antler Growth of 7- to 12-Month-Old Sika Deer (Cervus nippon)

ZHANG Ting WANG Xiaoxu WANG Zhuo LI Rende SUN Weili BAO Kun ZHONG Wei LI Guangyu*

(Jilin Provincial Key Laboratory for Molecular Biology of Special Economic Animals, Institute of Special Animal and Plant Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Changchun 130112, China)

This experiment was conducted to study the effects of dietary supplemental level of vitamin a on growth performance, serum biochemical indictors and first antler growth of 7- to 12-month-old sika deer (Cervusnippon). Forty healthy 7-month-old male sika deer [initial body weight: (39.64±4.10) kg] were randomly assigned to 4 groups, and each group contained 10 replicates with 1 deer per replicate. Deer in different groups were fed a basal diet (containing 5 mg/kg β-carotene) supplemented with 0 (control group), 2 500, 5 000 and 10 000 IU/kg vitamin A, respectively. The experiment was started from 7 to 12 months of age. The results showed as follows: 1) dietary vitamin A supplementation had no significant effects on growth performance of deer (P>0.05). 2) Compared with control group, serum immunoglobulin A (IgA) content and total superoxide dismutase (T-SOD) activity were significantly increased by dietary supplementation of vitamin A at 2 500 and 5 000 IU/kg (P<0.05), and serum glutathione peroxidase (GSH-Px) activity was significantly increased by dietary supplementation of vitamin A at 2 500， 5 000 and 10 000 IU/kg (P<0.05), while serum contents of immunoglobulin G (IgG), immunoglobulin M (IgM), malondialdehyde (MDA), testosterone (T) and estradiol (E2) were not significantly affected (P>0.05). 3) Deer

diet supplemented with 5 000 IU/kg vitamin A had significantly higher dry antler weight compared with control group (P<0.05), but had no significant difference compared with the other two groups (P>0.05). In conclusion, proportional adding of vitamin A can improve immunity and antioxidant capacity, increase dry antler weight of 7- to 12-month-old sika deer under the present experimental conditions. The suitable vitamin A supplemental level is 2 500 to 5 000 IU/kg of diet mainly consist of corn and alfalfa meal.[ChineseJournalofAnimalNutrition,2017,29(9)：3146-3152]

sika deer; vitamin A; growth performance; serum biochemical indicators; first antler growth

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.09.016

2017-02-15

中国农业科学院科技创新工程;吉林省重大科技攻关专项(20140203018NY)

张 婷(1988—),女，吉林长春人，硕士研究生，研究方向为特种动物营养与代谢。E-mail： zhangting542118@163.com

*通信作者：李光玉，研究员，博士生导师，E-mail： tcslgy@126.com

S816.72

：A

：1006-267X(2017)09-3146-07