支气管哮喘慢性阻塞性肺疾病重叠综合征中诱导痰嗜酸粒细胞检测的应用价值

古丽班努 热西汗·依不拉昔

830000新疆维吾尔自治区人民医院

支气管哮喘慢性阻塞性肺疾病重叠综合征中诱导痰嗜酸粒细胞检测的应用价值

古丽班努 热西汗·依不拉昔

830000新疆维吾尔自治区人民医院

目的：探讨ACOS中诱导痰嗜酸粒细胞检测的应用价值。方法：收治ACOS患者31例为观察组，选择体检健康者30例为对照组，对比诱导痰嗜酸粒细胞指标。结果：在观察组，肺功能指标下降，EOS升高，与对照组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)；治疗后肺功能指标改善，EOS下降，与治疗前比较，差异有统计学意义(P＜0.05)，与对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。诱导痰嗜酸粒细胞计数诊断ACOS的特异性、敏感性、约登指数分别为87.1%、80.6%、83.9%。治疗后ACOS诱导痰嗜酸粒细胞计数与FEV1值增幅呈正相关(P＜0.05)。结论：ACOS患者诱导痰嗜酸粒细胞水平增长与肺功能具有一定相关性，疾病治疗时加强诱导痰嗜酸粒细胞检测可为临床治疗提供指导。

支气管哮喘；慢性阻塞性肺疾病；诱导痰；嗜酸粒细胞

支气管哮喘及慢性阻塞性肺疾病均属慢性气道疾病，在临床有一定区分难度，且经研究表明，二者可并存，共称为ACOS。痰诱导(IS)属无创性呼吸道分泌物细胞，可通过综合检测气道炎症各项指标，为疾病后期诊疗提供参考。故本文以ACOS患者为研究对象，探讨ACOS中诱导痰嗜酸粒细胞检测的应用价值，现报告如下。

资料与方法

2014年12月-2015年12月收治ACOS患者31例作为观察组，同期体检健康者30例作为对照组。其中，观察组男17例，女14例，年龄25～68岁，平均(37.2±1.9)岁；对照组男15例，女15例，年龄23～70岁，平均(38.3±2.0)岁；两组一般资料对比，差异无统计学意义(P＞0.05)有可比性。观察组患者均符合中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病及支气管哮喘诊断标准[1]，且使用支气管扩张剂后第一秒用力呼吸容积(FEV1)占预计值百分比(FEV1%)＜80%，FEV1/用力肺活量(FVC)＜70%；入选时肺功能检查指标显示急性支气管扩张剂反应FEV1改善≥12%且绝对值增加≥200 mL。

方法：①痰液诱导：肺功能测试后，吸入200～400 μg沙丁胺醇，20 min后，若1 s用力呼气量百分数预计值(FEV1%pre)＞60%则行痰液诱导。3%～5%高渗盐水雾化吸入，测FEV1，20 min后，若FEV1%pre＞60%则继续操作；FEV1下降10%～20%，吸入200 μg沙丁胺醇；若下降＜10%则可以4%～5%盐水雾化，总吸入20～30 min，期间鼓励咳嗽，收集痰液。②痰液处理：达合格痰体积后，加入4倍体积0.1%二硫苏糖醇(DTT)；摇床震荡15 min，加入等体积磷酸盐缓冲液，震荡5 min，纱布过滤，离心10 min(800 r/min)。沉淀，用D-PBS制成细胞悬液，配比稀释后计数器上做细胞计数，台酚蓝染色，出现蓝色则记为非活性细胞，低倍视野下鳞状上皮细胞＞10个，标本淘汰。取细胞悬液涂片染色检查。③治疗：受试者均单纯接受ICS治疗，吸入布地奈德粉吸入剂400 μg/d，治疗3个月后进行检查。

结 果

两组肺功能及诱导痰嗜酸粒细胞数量对比分析：观察组患者的肺功能指标下降，EOS升高，与对照组比较，差异具有统计学意义(P＜0.05)；治疗后肺功能指标改善，EOS下降，与对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，见表1。

痰嗜酸粒细胞数计数诊断的敏感性、特异性及约登指数：以诱导痰嗜酸粒细胞＞2.5%为截点，诱导痰嗜酸粒细胞计数诊断ACOS的特异性87.1%，敏感性80.6%，约登指数83.9%。

诱导痰嗜酸粒细胞计数与FEV1变化的相关性：治疗后，ACOS患者诱导痰嗜酸粒细胞计数与FEV1值增幅呈显著正相关(r=0.527，P＜0.05)。

表1 两组肺功能及诱导痰嗜酸粒细胞数量对比(±s)

表1 两组肺功能及诱导痰嗜酸粒细胞数量对比(±s)

组别 例数 时间 FEV1%pre FEV1/FVCE(%) EOS(%)观察组 31 治疗前 76.12±7.35 69.79±3.09 6.24±2.13治疗后 93.25±8.31 77.82±4.07 3.13±0.87对照组 30 108.24±13.07 87.24±4.31 0.27±0.09

讨 论

20世纪90年代初，Pin等改良痰液诱导方法，提出痰诱导定时法，指出雾化吸入高渗盐水需遵循浓度逐增等特征，安全性高、重复性好且操作简单、无创[2]。痰液属下呼吸道分泌物，多由巨噬细胞、支气管上皮细胞及炎性细胞等细胞成分及液相成分组成。故基于此，采用高渗盐水诱导痰操作可不影响对嗜酸粒细胞的检测，细胞计数较为可靠[3]。ACOS患者气道嗜酸细胞浸润多与气道受损有关，可在气流阻塞及临床症状产生前改变，故患者痰中嗜酸细胞持续聚集可能与产生增加、凋亡受抑及肺巨噬细胞清除嗜酸细胞障碍有关。痰中嗜酸粒细胞可表达IgG、CR1、CD18等受体，若嗜酸粒细胞激活则可释放ECP等颗粒蛋白引起气道损伤[4]。本次研究中，ACOS患者FEV1%pre、FEV1/FVCE肺功能指标明显下降，而EOS明显提升，可知患者痰液嗜酸粒细胞与疾病具有重要相关性。

糖皮质激素属哮喘及慢性阻塞性肺疾病重要治疗药物，可抑制嗜酸粒细胞趋化、黏附及聚集。本次研究中，ACOS患者FEV1%pre、FEV1/FVCE肺功能指标明显上升，肺功能明显好转，而EOS则显著降低，可能与糖皮质激素可抑制并诱导嗜酸粒细胞凋亡、抑制T细胞及嗜酸粒细胞其细胞因子释放等因素相关[5]。同时，表明ACOS气道炎症有嗜酸粒细胞增多的哮喘气道炎性反应，检查诱导痰嗜酸粒细胞可作为诊断ACOS的重要指标。

综上所述，检测诱导痰嗜酸粒细胞对COPD和ACOS的鉴别诊断具有重要意义，通过检测能够预测ACOS对ICS治疗的反应性，日后也可为ACOS机制的研究及治疗药物的研发提供科学依据。

[1]王虹,张少卿,毛锐,等.诱导痰细胞因子水平对鉴别慢性阻塞性肺疾病、支气管哮喘及慢性阻塞性肺疾病合并支气管哮喘的价值[J].安徽医科大学学报,2013,48(8)：953-956.

[2]郭亚丽,张晓宇,马利军,等.哮喘、慢性阻塞性肺疾病和哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征[J].临床内科杂志,2013,30(4)：230-232.

[3]刘鹏飞,赵大辉,张杜超,等.吸烟对慢性阻塞性肺疾病及慢性阻塞性肺疾病-哮喘重叠综合征患者呼出气一氧化氮的影响[J].解放军医学院学报,2016,37(4)：317-319.

[4]蔡晓婷,时国朝,万欢英,等.慢性阻塞性肺疾病患者体重指数、呼出气一氧化氮、肺气肿评分分组特征[J].中国呼吸与危重监护杂志,2013,12(3)：223-227.

[5]张敏会.呼出气一氧化氮检测对哮喘-COPD重叠综合征(ACOS)的诊疗意义[J].中国保健营养,2015,25(14)：287-288.

Application value of detection of eosinophils in induced sputum of patients with bronchial asthma and chronic obstructive pulmonary disease overlap syndrome

Gulibannu Rexihan·Yibulaxi
The People's Hospital of Xinjiang Uygur Autonomous Region 830000

Objective：To explore the application value of detection of eosinophils in induced sputum of patients with ACOS.Methods：31 patients with ACOS were selected as the observation group.30 healthy subjects were selected as the control group.We compared the eosinophil indices in induced sputum of the two groups.Results：In the observation group,the pulmonary function indexes were decreased;the EOS was elevated;compared with the control group,the differences were statistically significant(P＜0.05).After treatment,the pulmonary function indexes were improved;EOS was decreased;compared with before treatment,the differences were statistically significant(P＜0.05);compared with the control group,the differences were not statistically significant(P＞0.05).The specificity,sensitivity and Jorden index of induced sputum eosinophils count in the diagnosis of ACOS were 87.1%,80.6%and 83.9%respectively.After treatment,ACOS induced sputum eosinophils count was positively correlated with the increase in FEV1value(P＜0.05).Conclusion：The increased levels of eosinophils in induced sputum of patients with ACOS were associated with lung function.In the treatment of diseases,we should strengthen the detection of eosinophils in induced sputum,which can provide guidance for clinical treatment.

Bronchial asthma;Chronic obstructive pulmonary disease;Induced sputum;Eosinophils

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.22.73